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人肝癌多药耐药细胞系BEL-7402/ADM的建立及耐药相关基因表达检测 被引量:10
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作者 王宁 杨海山 +1 位作者 刘洁 李玉 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期361-364,共4页
目的:建立人肝癌多药耐药细胞系,研究其耐药特性及机制。方法:应用人肝癌细胞株BEL - 74 0 2 ,采用阿霉素(ADM)大剂量间歇诱导法,建立多药耐药细胞系BEL - 74 0 2 / ADM。相差显微镜观察细胞,用MTT法检测该耐药细胞株对多种化疗药物的... 目的:建立人肝癌多药耐药细胞系,研究其耐药特性及机制。方法:应用人肝癌细胞株BEL - 74 0 2 ,采用阿霉素(ADM)大剂量间歇诱导法,建立多药耐药细胞系BEL - 74 0 2 / ADM。相差显微镜观察细胞,用MTT法检测该耐药细胞株对多种化疗药物的多药耐药性,采用流式细胞术检测该耐药细胞表面多药耐药基因(MDR)的表达产物P糖蛋白(P- gp)、多药耐药相关蛋白(MRP)及谷胱甘肽硫转移系统(GSH / GST)的表达情况,应用RT- PCR检测MDR、MRP基因表达水平。结果:BEL - 74 0 2 / ADM对多种抗癌药物产生耐药,对ADM的耐药性(半数抑制浓度,IC50 )提高了17.31倍。流式细胞仪分析发现(6 5 .5±5 .8) %的BEL - 74 0 2 / ADM细胞表面P- gp表达阳性,而对照细胞BEL - 74 0 2表达仅为(31.3±4 .3) % ;(32 .4±3.5 ) %的BEL - 74 0 2 / ADM细胞表面MRP表达阳性,而对照细胞BEL - 74 0 2表达仅为(2 3.4±3.1) % ,二者差异有显著性(P<0 .0 1) ;BEL - 74 0 2 / ADM和BEL -74 0 2细胞的GSH/ GST表达无明显变化(P>0 .0 5 )。RT- PCR检测发现BEL - 74 0 2 / ADM中MDR及MRP m RNA高表达。结论:BEL - 74 0 2 / ADM具有明确的多药耐药性,其多药耐药相关基因MDR及MRP m RNA表达升高。 展开更多
关键词 肝肿瘤 肿瘤细胞 培养的 表柔比星 抗药性 肿瘤
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