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Ⅰ群禽腺病毒通用型二温式PCR和VPCR方法的建立及初步应用
1
作者
赵磊
刘畅
+4 位作者
刘欣超
王旋
黄佳佳
阮来田
张训海
《中国动物传染病学报》
CAS
北大核心
2021年第3期47-55,共9页
为建立快速检测Ⅰ群禽腺病毒(FAdV-I)血清型通用PCR方法,根据FAdV-Ⅰ12个血清型基因保守区设计引物,建立了二温式PCR和VPCR方法。结果显示:本研究建立的FAdV-Ⅰ二温式PCR方法,在90℃~94℃变性3 s、70℃~74℃退火兼延伸8 s,循环35~40次时...
为建立快速检测Ⅰ群禽腺病毒(FAdV-I)血清型通用PCR方法,根据FAdV-Ⅰ12个血清型基因保守区设计引物,建立了二温式PCR和VPCR方法。结果显示:本研究建立的FAdV-Ⅰ二温式PCR方法,在90℃~94℃变性3 s、70℃~74℃退火兼延伸8 s,循环35~40次时,最快可在15 min内完成扩增;对分属5个种的5个血清型毒株检测都呈阳性,对EDSV、NDV、沙门菌等12种禽常见病原核酸检测呈阴性;最低检测质粒拷贝数为13.9 copies/μL,最低检测病毒滴度为100.3 EID50/0.1 mL;对源于FAdV-4感染致死SPF鸡的心脏、肝脏、脾脏等14种样品核酸提取物检测均为阳性。建立的VPCR,在92℃变性0 s、70℃退火延伸0 s,40次循环时,可23 min完成,其最低检测质粒拷贝数亦为13.9 copies/μL;对150份采集自安徽省部分地区样品及送检病料的检测与分析显示,所建立的二温式PCR和VPCR总阳性检出均率为30.7%,其符合率为100%。本研究表明,所建立的通用型二温式PCR和VPCR方法,均可用于Ⅰ群FAdV的快速检测与鉴定。
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关键词
Ⅰ群禽腺病毒
通用型
二温式PCR
VPCR
快速诊断
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职称材料
题名
Ⅰ群禽腺病毒通用型二温式PCR和VPCR方法的建立及初步应用
1
作者
赵磊
刘畅
刘欣超
王旋
黄佳佳
阮来田
张训海
机构
安徽科技学院家禽疫病防控监测安徽省重点实验室
池州市贵池区动物卫生监督所
出处
《中国动物传染病学报》
CAS
北大核心
2021年第3期47-55,共9页
基金
安徽省教育厅重点项目(KJ2019A0800,KJ2017A504)
安徽省家禽产业技术体系项目(AHCYJSTX-06)
高校重点学科(AKZDXK2015B03)。
文摘
为建立快速检测Ⅰ群禽腺病毒(FAdV-I)血清型通用PCR方法,根据FAdV-Ⅰ12个血清型基因保守区设计引物,建立了二温式PCR和VPCR方法。结果显示:本研究建立的FAdV-Ⅰ二温式PCR方法,在90℃~94℃变性3 s、70℃~74℃退火兼延伸8 s,循环35~40次时,最快可在15 min内完成扩增;对分属5个种的5个血清型毒株检测都呈阳性,对EDSV、NDV、沙门菌等12种禽常见病原核酸检测呈阴性;最低检测质粒拷贝数为13.9 copies/μL,最低检测病毒滴度为100.3 EID50/0.1 mL;对源于FAdV-4感染致死SPF鸡的心脏、肝脏、脾脏等14种样品核酸提取物检测均为阳性。建立的VPCR,在92℃变性0 s、70℃退火延伸0 s,40次循环时,可23 min完成,其最低检测质粒拷贝数亦为13.9 copies/μL;对150份采集自安徽省部分地区样品及送检病料的检测与分析显示,所建立的二温式PCR和VPCR总阳性检出均率为30.7%,其符合率为100%。本研究表明,所建立的通用型二温式PCR和VPCR方法,均可用于Ⅰ群FAdV的快速检测与鉴定。
关键词
Ⅰ群禽腺病毒
通用型
二温式PCR
VPCR
快速诊断
Keywords
Ⅰgroup of Fowl aviadenovirus
generic
two-temperature PCR
VPCR
rapid detection
分类号
S852.659.1 [农业科学—基础兽医学]
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题名
作者
出处
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1
Ⅰ群禽腺病毒通用型二温式PCR和VPCR方法的建立及初步应用
赵磊
刘畅
刘欣超
王旋
黄佳佳
阮来田
张训海
《中国动物传染病学报》
CAS
北大核心
2021
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