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过表达白血病抑制因子增强子宫内膜癌细胞对化疗药物的耐受 被引量：8
1
作者 阮晓红 钟媚共 +4 位作者 刘婉敏 刘琼茹 陆文洁 郑焱 张鑫 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期20-26,共7页
目的探讨在体外环境中,子宫内膜癌细胞高表达白血病抑制因子(LIF)后,对顺铂及紫杉醇的敏感性变化。方法利用慢病毒在子宫内膜癌细胞(HEC-1B和RL95-2)中建立稳定过表达LIF的细胞模型,以空载体慢病毒感染细胞作为对照组,用逆转录荧光定量... 目的探讨在体外环境中,子宫内膜癌细胞高表达白血病抑制因子(LIF)后,对顺铂及紫杉醇的敏感性变化。方法利用慢病毒在子宫内膜癌细胞(HEC-1B和RL95-2)中建立稳定过表达LIF的细胞模型,以空载体慢病毒感染细胞作为对照组,用逆转录荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和酶联免疫吸附试验验证LIF的表达。利用CCK-8观察LIF过表达对癌细胞活性的影响,利用Annexin V-FITC/PI法和JC-1法观察LIF过表达后,顺铂及紫杉醇诱导癌细胞凋亡及线粒体膜电位下降的情况。利用免疫印迹观察LIF过表达后,癌细胞中Bcl-2家族及STAT3通路蛋白的表达。利用荧光素酶报告基因活性检测观察LIF过表达后,癌细胞STAT3转录活性的变化。在过表达LIF的两子宫内膜癌细胞中沉默STAT3,以无义小干扰RNA序列转染细胞为对照组,观察顺铂及紫杉醇对细胞的杀伤作用。结果过表达组的子宫内膜癌细胞(HEC-1B和RL95-2)较对照组表达更高水平的HLF mRNA及分泌更多的HLF蛋白(P<0.05)。LIF的过表达不影响两子宫内膜癌细胞的体外增殖活性(P>0.05),但能增加癌细胞在顺铂及紫杉醇作用下的存活率和线粒体膜电位(P<0.05)。过表达LIF能增加两子宫内膜癌细胞中Bcl-2、Bcl-xL和p-STAT3的水平,降低Bax和Bad的水平,而不影响STAT3的水平;同时STAT3的转录活性增强(P<0.05)。在稳定表达LIF的两子宫内膜癌细胞中,沉默STAT3能显著增加顺铂及紫杉醇对细胞的杀伤作用(P<0.05)。结论在体外环境中,稳定高表达LIF能增强宫内膜癌细胞对顺铂及紫杉醇的抵抗。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 白血病抑制因子 顺铂 紫杉醇 STAT3信号通路
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冷冻与石蜡肾活检标本中PLA2R1表达的临床诊断意义比较 被引量：1
2
作者 刘琼茹 廖悦华 +5 位作者 轩慧杰 郑明珠 李荣岗 郑焱 周伟 张鑫 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期173-177,共5页
目的探讨磷脂酶A2受体1(PLA2R1)在肾脏穿刺的冷冻标本及石蜡标本中的表达,分析不同标本中阳性率的临床病理诊断意义。方法收集2013年1月~2019年2月江门市中心医院行肾脏穿刺患者的标本及临床病理资料,其中同时有肾活检冷冻标本及石蜡标... 目的探讨磷脂酶A2受体1(PLA2R1)在肾脏穿刺的冷冻标本及石蜡标本中的表达,分析不同标本中阳性率的临床病理诊断意义。方法收集2013年1月~2019年2月江门市中心医院行肾脏穿刺患者的标本及临床病理资料,其中同时有肾活检冷冻标本及石蜡标本的患者215例,仅有石蜡标本的患者785例。分别利用免疫荧光及免疫组化法检测PLA2R1在肾活检冷冻和石蜡标本中的表达,并分析PLA2R1表达与临床病理特征的相关性。结果在215例冷冻标本中,PLA2R1阳性率为19.1%;在1000例石蜡标本中,PLA2R1阳性率为32.9%,两组中PLA2R1的阳性率差异有统计学意义(P<0.001)。在冷冻和石蜡标本中,PLA2R1表达与患者性别、年龄及临床分期无关,与病理类型相关。在冷冻和石蜡标本中,PLA2R1阳性均集中于特发性膜性肾病(72.0%和79.8%),但非特发性膜性肾病中,则分别为3.0%和19.4%。结论肾活检冷冻及石蜡标本中PLA2R1表达均与特发性膜性肾病相关,但冷冻标本在特发性膜性肾病诊断中更有价值。 展开更多
关键词 膜性肾病 肾脏活检 PLA2R1 免疫组织化学 免疫荧光 冷冻组织 石蜡包埋组织
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补骨脂定对骨髓间充质干细胞向癌相关成纤维细胞分化的抑制作用 被引量：2
3
作者 钟媚共 阮晓红 +5 位作者 郑明珠 陆文洁 陈莎莎 林碧华 郑焱 张鑫 《医药导报》 CAS 北大核心 2021年第1期24-30,共7页
目的探讨不同来源的间充质干细胞(MSCs)在癌细胞诱导下分化成癌相关成纤维细胞(CAFs)的情况,观察补骨脂定对人骨髓间充质干细胞(h BMSCs)和人脐带间充质干细胞(h UCMSCs)向CAFs分化的影响。方法利用Transwell小室,建立h BMSCs和h UCMSCs... 目的探讨不同来源的间充质干细胞(MSCs)在癌细胞诱导下分化成癌相关成纤维细胞(CAFs)的情况,观察补骨脂定对人骨髓间充质干细胞(h BMSCs)和人脐带间充质干细胞(h UCMSCs)向CAFs分化的影响。方法利用Transwell小室,建立h BMSCs和h UCMSCs与4种女性特发恶性肿瘤细胞(BT-549、HEC-1B、Hela和SK-OV-3)共培养模型。梯度浓度的补骨脂定处理h BMSCs和h UCMSCs后,用Compu Syn软件计算半数抑制浓度(IC50),后续用10μmol·L-1补骨脂定处理各组细胞。用细胞增殖毒性(CCK-8法)检测细胞的增殖活性;流式细胞术分析细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达水平;用免疫印迹检测细胞中p-JAK2和p-STAT3表达水平。结果补骨脂定对h BMSCs和h UCMSCs的IC50分别是477.34和364.83μmol·L-1;在10μmol·L-1浓度下,对两种细胞活性的抑制率分别为(3.77±1.65)%和(3.70±2.11)%,均小于5%。h BMSCs与4种癌细胞共培养后,h BMSCs中α-SMA表达阳性率上升,肿瘤细胞的增殖活性增强,其p-JAK2和p-STAT3的表达水平上升;补骨脂定能显著抑制共培养体系中的上述现象。在共培养体系中,h UCMSCs中α-SMA表达阳性率不变,癌细胞的增殖活性却受抑制,其p-JAK2和p-STAT3的表达下降;补骨脂定不影响h UCMSCs中α-SMA、p-JAK2和p-STAT3的表达,但能增强h UCMSCs对癌细胞活性的抑制作用。结论在Transwell共培养环境中,补骨脂定可抑制h BMSCs向CAFs分化,降低癌细胞恶性增殖活性。 展开更多
关键词 补骨脂定 成纤维细胞 癌相关 骨髓间充质干细胞 脐带间充质干细胞
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