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RNA干扰Livin基因表达增强骨肉瘤MG-63耐药细胞对多柔比星的化疗敏感性
被引量：
3
1
作者
孙廓
袁初平
+1 位作者
李怀强
廖琦
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第12期1375-1380,共6页
目的:研究凋亡抑制蛋白基因Livin在逆转骨肉瘤耐药中的作用。方法:应用多柔比星逐步诱导法诱导人骨肉瘤MG-63细胞建立耐药细胞株,MTT实验检测耐药细胞株的耐药指数,Western blotting法检测MG-63细胞和耐药细胞中Livin蛋白表达的差异。构...
目的:研究凋亡抑制蛋白基因Livin在逆转骨肉瘤耐药中的作用。方法:应用多柔比星逐步诱导法诱导人骨肉瘤MG-63细胞建立耐药细胞株,MTT实验检测耐药细胞株的耐药指数,Western blotting法检测MG-63细胞和耐药细胞中Livin蛋白表达的差异。构建Livin shRNA真核表达载体,应用LipofectmineTM2000转染至耐药骨肉瘤细胞中,Real-time PCR和Western blotting分别检测Livin shRNA转染前后MG-63耐药细胞中Livin基因和蛋白表达的变化,流式细胞术检测细胞凋亡的变化,MTT法检测对多柔比星化疗敏感性的变化。结果:成功构建重组质粒p Silencer3.1-H1 neo-Livin si。诱导的耐药细胞MG-63/R对多柔比星的耐药指数为81.32±5.33。Livin shRNA可抑制MG-63细胞中Livin基因和蛋白表达,明显低于空白对照组和非特异性转染组(分别下调72%和69%,P<0.05)。特异性转染Livin shRNA组MG-63/R细胞的凋亡率显著高于未转染组和非特异性转染组[(22.4±3.2)%vs(4.2±1.1)%、(4.7±0.6)%,P<0.05]。3组细胞在加入多柔比星后增殖均受到不同程度的抑制,且呈明显的时间-效应关系,但特异性转染组细胞的存活率均显著低于其他两组(P<0.05)。结论:应用RNA干扰技术下调Livin的基因表达可有效促进耐药MG-63骨肉瘤细胞的凋亡,从而增加其对化疗药物的敏感性。
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关键词
骨肉瘤
LIVIN基因
RNA干扰
多柔比星
耐药
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题名
RNA干扰Livin基因表达增强骨肉瘤MG-63耐药细胞对多柔比星的化疗敏感性
被引量：
3
1
作者
孙廓
袁初平
李怀强
廖琦
机构
南昌大学第二附属
医院
骨科
江西省都昌县中医院骨科
出处
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第12期1375-1380,共6页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.81660443)
江西省卫计委科技项目资助(No.20155278)~~
文摘
目的:研究凋亡抑制蛋白基因Livin在逆转骨肉瘤耐药中的作用。方法:应用多柔比星逐步诱导法诱导人骨肉瘤MG-63细胞建立耐药细胞株,MTT实验检测耐药细胞株的耐药指数,Western blotting法检测MG-63细胞和耐药细胞中Livin蛋白表达的差异。构建Livin shRNA真核表达载体,应用LipofectmineTM2000转染至耐药骨肉瘤细胞中,Real-time PCR和Western blotting分别检测Livin shRNA转染前后MG-63耐药细胞中Livin基因和蛋白表达的变化,流式细胞术检测细胞凋亡的变化,MTT法检测对多柔比星化疗敏感性的变化。结果:成功构建重组质粒p Silencer3.1-H1 neo-Livin si。诱导的耐药细胞MG-63/R对多柔比星的耐药指数为81.32±5.33。Livin shRNA可抑制MG-63细胞中Livin基因和蛋白表达,明显低于空白对照组和非特异性转染组(分别下调72%和69%,P<0.05)。特异性转染Livin shRNA组MG-63/R细胞的凋亡率显著高于未转染组和非特异性转染组[(22.4±3.2)%vs(4.2±1.1)%、(4.7±0.6)%,P<0.05]。3组细胞在加入多柔比星后增殖均受到不同程度的抑制,且呈明显的时间-效应关系,但特异性转染组细胞的存活率均显著低于其他两组(P<0.05)。结论:应用RNA干扰技术下调Livin的基因表达可有效促进耐药MG-63骨肉瘤细胞的凋亡,从而增加其对化疗药物的敏感性。
关键词
骨肉瘤
LIVIN基因
RNA干扰
多柔比星
耐药
Keywords
osteosarcoma
Livin gene
RNA interference
doxorubicin
drug resistance
分类号
R738.1 [医药卫生—肿瘤]
R730.5 [医药卫生—肿瘤]
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作者
出处
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1
RNA干扰Livin基因表达增强骨肉瘤MG-63耐药细胞对多柔比星的化疗敏感性
孙廓
袁初平
李怀强
廖琦
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017
3
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