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江西省C群脑膜炎奈瑟菌药物敏感性及PFGE分子特征分析 被引量:4
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作者 熊长辉 杨梦 +3 位作者 刘晓青 徐晓倩 王鹏 袁辉 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期679-682,共4页
目的分析江西省2006-2010年分离的C群脑膜炎奈瑟菌的药物敏感性及分子特征。方法采用E-test试纸条检测方法对38株C群脑膜炎奈瑟菌菌株进行体外抗菌药物敏感性检测,利用脉冲场凝胶电泳技术(Pulsed-Field Gel Electrophoresis,PFGE)进行... 目的分析江西省2006-2010年分离的C群脑膜炎奈瑟菌的药物敏感性及分子特征。方法采用E-test试纸条检测方法对38株C群脑膜炎奈瑟菌菌株进行体外抗菌药物敏感性检测,利用脉冲场凝胶电泳技术(Pulsed-Field Gel Electrophoresis,PFGE)进行分子特征分析。结果所有菌株对氯霉素、美洛培南、阿奇霉素、米洛环素、头孢噻肟、头孢曲松和利福平均敏感;15(39.5%)株菌株对青霉素不敏感,18(47.4%)株对氨苄西林不敏感,25(65.8%)株对环丙沙星耐药,23(60.5%)株对左氧氟沙星耐药,11(28.9%)株对复方新诺明不敏感。PFGE分型显示以AH1和AH2型为主,并且同一地区的带型以同一种带型为主。结论江西省2006-2010年分离C群脑膜炎奈瑟菌株对喹诺酮类药物具有较高的耐药性,还有大部分菌对磺胺类和青霉素类药物也不敏感。PFGE分型特征虽然呈多态性,但是以AH1和AH2型为优势克隆型。 展开更多
关键词 脑膜炎奈瑟菌 分子分型 药敏试验 脉冲场凝胶电泳
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霍乱弧菌毒力基因zot的克隆表达及生物活性 被引量:5
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作者 熊长辉 杨梦 +2 位作者 刘晓青 王鹏 徐晓倩 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期996-1001,共6页
目的对霍乱弧菌zot毒力基因进行表达并研究重组蛋白的生物活性。方法从霍乱弧菌(Vibrio cholerae)MO45中克隆zot的全基因序列,构建其原核表达质粒pET-32a(+)-zot并转化至大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中,通过诱导表达和亲和层析纯化重组蛋白... 目的对霍乱弧菌zot毒力基因进行表达并研究重组蛋白的生物活性。方法从霍乱弧菌(Vibrio cholerae)MO45中克隆zot的全基因序列,构建其原核表达质粒pET-32a(+)-zot并转化至大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中,通过诱导表达和亲和层析纯化重组蛋白,研究zot表达蛋白对人小肠上皮细胞的凋亡作用。结果纯化蛋白的浓度为0.324mg/mL,经Western blot验证表达蛋白为目的蛋白,用流式细胞仪检测经表达蛋白作用的人小肠上皮细胞显示重组zot蛋白能引起人小肠上皮细胞的早期凋亡。结论成功克隆表达了霍乱弧菌毒力基因zot,重组蛋白能引起人小肠上皮细胞的早期凋亡。 展开更多
关键词 霍乱弧菌 克隆表达 zot基因 人小肠上皮细胞
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一次食物中毒相关的侵袭性大肠杆菌分子分型分析 被引量:3
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作者 熊长辉 杨梦 +3 位作者 刘晓青 徐晓倩 王鹏 袁辉 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期747-750,共4页
目的对一起食物中毒分离的病原菌进行鉴定、毒力基因检测及分子分型。方法利用生化试验、血清学试验对病原菌进行鉴定,用普通PCR和real-time PCR对病原菌进行毒力基因检测,用PFGE对其同源性进行分析。结果分离的12份病原菌均为Escherich... 目的对一起食物中毒分离的病原菌进行鉴定、毒力基因检测及分子分型。方法利用生化试验、血清学试验对病原菌进行鉴定,用普通PCR和real-time PCR对病原菌进行毒力基因检测,用PFGE对其同源性进行分析。结果分离的12份病原菌均为Escherichia coli I,血清型为EIEC O136K78,12份病原菌均携带uid、ipaH基因,其中5份检测携带vir基因。PFGE电泳图谱显示12株病原菌带型完全相同,表明来源于同一克隆株。结论分子生物学技术与传统方法的有机结合对侵袭性大肠埃希菌的快速鉴定及分子分型具有重要意义。 展开更多
关键词 侵袭性大肠埃希菌 分子分型 PCR 脉冲场凝胶电泳
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霍乱疫情分离霍乱弧菌的耐药性及分子特征分析 被引量:2
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作者 熊长辉 杨梦 +3 位作者 刘晓青 徐晓倩 王鹏 黄孝天 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期374-376,400,共4页
目的对一起霍乱疫情分离的O139菌株进行毒力相关基因检测,耐药性和分子特征分析,了解其毒力相关基因的携带情况,药物敏感性以及同源性。方法应用PCR技术对分离到的23株O139霍乱菌进行ctx A、ctx B、ace、cep和zot毒力相关基因检测,应用K... 目的对一起霍乱疫情分离的O139菌株进行毒力相关基因检测,耐药性和分子特征分析,了解其毒力相关基因的携带情况,药物敏感性以及同源性。方法应用PCR技术对分离到的23株O139霍乱菌进行ctx A、ctx B、ace、cep和zot毒力相关基因检测,应用KB纸片法对菌株进行12种抗生素的药物敏感试验,用PFGE进行同源性分析。结果 23株O139霍乱菌ctx A、ctx B、ace、cep和zot毒力相关基因检测均为阳性,所有菌株药物敏感度一致,且对复方磺胺甲噁唑、强力霉素、庆大霉素敏感,PFGE带型一致,为同一克隆株。结论此次由O139霍乱菌引起的疫情由同一克隆株引起,实验室检测结果为霍乱疫情的快速有效控制和临床治疗提供科学依据。 展开更多
关键词 霍乱弧菌 分子分型 毒力基因 药物敏感性
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血液中分离一株O139群霍乱弧菌分子生物学检测及药物敏感性分析 被引量:1
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作者 张经宇 杨梦 +1 位作者 刘晓青 熊长辉 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期67-72,共6页
目的对南昌大学第一附属医院从患者血液中分离的一株O139群霍乱弧菌进行毒力基因检测、药物敏感试验及溯源分析。方法用PCR检测技术检测霍乱ctx A、ctx B、ace、cep、zot、rtx A、hly A、tox R、tcp A和cri毒力基因,用最小抑菌浓度(mini... 目的对南昌大学第一附属医院从患者血液中分离的一株O139群霍乱弧菌进行毒力基因检测、药物敏感试验及溯源分析。方法用PCR检测技术检测霍乱ctx A、ctx B、ace、cep、zot、rtx A、hly A、tox R、tcp A和cri毒力基因,用最小抑菌浓度(minimum inhibitory concen tration,MIC)进行体外抗菌药物敏感性检测,利用脉冲场凝胶电泳技术(pulsed-field gel electrophoresis,PFGE)进行分子同源性分析。结果 rtx A、hly A和tox R毒力基因为阳性,ctx A、ctx B、ace、cep、zot、tcp A和cri毒力基因均为阴性;药物敏感试验显示该菌对头孢吡肟、头孢曲松、头孢西丁、亚胺培南、强力霉素敏感,对氨苄西林、阿莫西林/克拉维酸、环丙沙星、庆大霉素、磺胺甲噁唑、复方磺胺甲噁唑和阿奇霉素耐药;PFGE分型显示与近5年江西省分离的O139群霍乱弧菌相似性聚类分析为80%。结论江西省首次在患者血液中分离出O139群霍乱弧菌,该菌对喹诺酮类、磺胺类和青霉素类药物具有较高的耐药性,PFGE溯源分析该菌与近5年江西省分离的O139群霍乱弧菌存在一定差异。 展开更多
关键词 霍乱弧菌 毒力基因 药物敏感性 脉冲场凝胶电泳
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