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依他尼酸联合顺铂化疗促肺癌A549细胞凋亡的作用及机制研究
被引量：
2
1
作者
黄玲萍
谢丽霞
+2 位作者
邱钰超
胡萍
叶小群
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第17期1720-1727,共8页
目的探讨依他尼酸(ethacrynic acid,EA)杀伤肺癌A549细胞球的作用及机制研究。方法无血清培养基中培养A549细胞球,应用Western blot检测CD133、SOX2、Ep CAM和ABCG2的蛋白表达水平。应用1、2、5、10、20 mg/m L的浓度顺铂(cisplatin,DDP...
目的探讨依他尼酸(ethacrynic acid,EA)杀伤肺癌A549细胞球的作用及机制研究。方法无血清培养基中培养A549细胞球,应用Western blot检测CD133、SOX2、Ep CAM和ABCG2的蛋白表达水平。应用1、2、5、10、20 mg/m L的浓度顺铂(cisplatin,DDP)分别处理A549及细胞球48 h,用MTT检测48 h内细胞的存活率。应用比色法检测10、50、100、200μmol/L EA对A549细胞球中谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)活性的抑制作用。应用流式细胞术、Western blot、Real-timePCR、相差显微镜观察检测200μmol/L EA处理A549细胞球前后ROS水平、细胞成球能力、β-catenin、Sox2和ABCG2 mRNA和蛋白以及β-catenin启动子活性的变化情况。应用β-catenin腺病毒感染A549细胞球后,再用200μmol/L EA的处理A549细胞球,利用Real-time PCR和Western blot检测β-catenin S、Sox2和ABCG2 mRNA和蛋白的变化,并用MTT检测A549细胞球增殖的抑制作用。结果成功培养出悬浮的A549细胞球,其高表达肿瘤干细胞标志物CD133、SOX2、Ep CAM以及耐药相关蛋白ABCG2,并可耐受不同浓度DDP的杀伤作用。200μmol/L EA处理A549细胞球后ROS水平明显升高,而GST活性、β-catenin、Sox2和ABCG2 mRNA和蛋白的表达、β-catenin的启动子活性、A549细胞球的成球能力显著下降,并且200μmol/L EA联合5 mg/m L DDP可增强对抑制A549细胞球增殖的作用和增加细胞凋亡的水平(P<0.05)。过表达β-catenin后,200μmol/L EA对β-catenin、Sox2和ABCG2 mRNA和蛋白的抑制作用较空载体组显著减弱。此外,过表达β-catenin可显著缓解200μmol/L EA联合5 mg/m L DDP对A549细胞球的增殖抑制作用。结论 EA通过抑制GST活性和β-catenin水平,发挥抑制A549细胞球增殖和干性,促进其凋亡的作用。EA可望成为治疗肺癌及肺癌干细胞的药物。
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关键词
肺癌干细胞
依他尼酸
GST
Β-CATENIN
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题名
依他尼酸联合顺铂化疗促肺癌A549细胞凋亡的作用及机制研究
被引量：
2
1
作者
黄玲萍
谢丽霞
邱钰超
胡萍
叶小群
机构
南昌
大学
第二附属医院呼吸
内科
江西省井冈山大学临床医学院内科教研室
江西省
新钢中心医院呼吸
内科
出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第17期1720-1727,共8页
基金
江西省科学技术厅社会发展攻关项目(20141BBG70035)
江西省重大科技资助项目(20143ACB20011)~~
文摘
目的探讨依他尼酸(ethacrynic acid,EA)杀伤肺癌A549细胞球的作用及机制研究。方法无血清培养基中培养A549细胞球,应用Western blot检测CD133、SOX2、Ep CAM和ABCG2的蛋白表达水平。应用1、2、5、10、20 mg/m L的浓度顺铂(cisplatin,DDP)分别处理A549及细胞球48 h,用MTT检测48 h内细胞的存活率。应用比色法检测10、50、100、200μmol/L EA对A549细胞球中谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)活性的抑制作用。应用流式细胞术、Western blot、Real-timePCR、相差显微镜观察检测200μmol/L EA处理A549细胞球前后ROS水平、细胞成球能力、β-catenin、Sox2和ABCG2 mRNA和蛋白以及β-catenin启动子活性的变化情况。应用β-catenin腺病毒感染A549细胞球后,再用200μmol/L EA的处理A549细胞球,利用Real-time PCR和Western blot检测β-catenin S、Sox2和ABCG2 mRNA和蛋白的变化,并用MTT检测A549细胞球增殖的抑制作用。结果成功培养出悬浮的A549细胞球,其高表达肿瘤干细胞标志物CD133、SOX2、Ep CAM以及耐药相关蛋白ABCG2,并可耐受不同浓度DDP的杀伤作用。200μmol/L EA处理A549细胞球后ROS水平明显升高,而GST活性、β-catenin、Sox2和ABCG2 mRNA和蛋白的表达、β-catenin的启动子活性、A549细胞球的成球能力显著下降,并且200μmol/L EA联合5 mg/m L DDP可增强对抑制A549细胞球增殖的作用和增加细胞凋亡的水平(P<0.05)。过表达β-catenin后,200μmol/L EA对β-catenin、Sox2和ABCG2 mRNA和蛋白的抑制作用较空载体组显著减弱。此外,过表达β-catenin可显著缓解200μmol/L EA联合5 mg/m L DDP对A549细胞球的增殖抑制作用。结论 EA通过抑制GST活性和β-catenin水平,发挥抑制A549细胞球增殖和干性,促进其凋亡的作用。EA可望成为治疗肺癌及肺癌干细胞的药物。
关键词
肺癌干细胞
依他尼酸
GST
Β-CATENIN
Keywords
lung cancer stem cells
ethacrynic acid
glutathione S-transferase
β-catenin
分类号
R73-361 [医药卫生—肿瘤]
R734.2 [医药卫生—肿瘤]
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作者
出处
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1
依他尼酸联合顺铂化疗促肺癌A549细胞凋亡的作用及机制研究
黄玲萍
谢丽霞
邱钰超
胡萍
叶小群
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017
2
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