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基于Nrf2/SLC7A11/GPX4通路探讨葛根芩连汤通过抑制铁死亡改善非酒精性脂肪性肝病作用机制 被引量:1
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作者 骆倩 罗涛 +6 位作者 宋针珍 梁芳 黎俊森 彭淑红 曹岚 赵海平 章常华 《中国比较医学杂志》 北大核心 2025年第2期72-84,共13页
目的基于核转录因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)/溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)/谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)信号通路,通过体内外实验研究葛根芩... 目的基于核转录因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)/溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)/谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)信号通路,通过体内外实验研究葛根芩连汤治疗非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的作用机制。方法以高脂饲料长期喂养大鼠24周完成NAFLD的诱导建模,成模大鼠随机分为正常组、模型组、葛根芩连汤高、中、低剂量组和二甲双胍组。自第25周起,按照分组情况灌胃相应药物两周直至取材。生化试剂盒检测各组大鼠肝组织氧化应激水平:丙二醛(malondialdehyde,MDA)和谷胱甘肽(glutathione,GSH)。Fe^(2+)试剂盒检测各组大鼠肝组织Fe^(2+)含量。实时荧光定量逆转录PCR(qRT-PCR)法检测各组大鼠肝组织Nrf2、血红素加氧酶1(heme oxygenase-1,HO-1)、SLC7A11、谷胱甘肽合成酶(glutathione synthetase,GSS)、GPX4和酰基辅酶A合成化酶4(acyl coenzyme A synthase,ACSL4)mRNA的表达水平。采用1 mmol/L游离脂肪酸(FFA)诱导肝癌HepG2细胞产生脂质堆积模拟NAFLD构建体外模型,加入不同浓度葛根芩连汤和二甲双胍含药血清进行治疗。油红O染色检测各组细胞脂质堆积情况。试剂盒测定不同组HepG2细胞MDA和GSH含量。细胞专用Fe^(2+)试剂盒检测各组细胞Fe^(2+)含量。qRT-PCR法检测各组细胞中Nrf2、HO-1、SLC7A11、GSS、GPX4和ACSL4 mRNA的表现水平。结果动物实验中,模型组大鼠肝组织MDA和Fe^(2+)含量较正常组显著升高,GSH含量显著降低(P<0.01);葛根芩连汤高、中剂量组和二甲双胍组可大幅度降低MDA和Fe^(2+)含量,升高GSH含量,与模型组比较(P<0.01,P<0.05)。与模型组相比,葛根芩连汤高、中剂量组和二甲双胍组均能增加Nrf2、HO-1、GSS、GPX4 mRNA的表达水平,降低ACSL4 mRNA的水平(P<0.01,P<0.05)。在细胞实验中,HepG2细胞模型组红色脂滴较正常组明显增多,葛根芩连汤和二甲双胍的使用导致脂滴明显减少。试剂盒检测发现,较正常组而言,HepG2细胞模型组MDA和Fe^(2+)含量明显上升,GSH含量显著降低(P<0.01),而与模型组相比,葛根芩连汤各剂量组和二甲双胍组均可显著降低MDA和Fe^(2+)含量(P<0.01),葛根芩连汤高、中、低剂量组和二甲双胍组增加GSH含量(P<0.01,P<0.05)。qRT-PCR实验表明,葛根芩连汤高剂量组中的Nrf2、GSS、GPX4和SLC7A11,中剂量组中的Nrf2、HO-1和SLC7A11,低剂量组中的HO-1、SLC7A11和GSS以及二甲双胍组中的GSS、Nrf2、HO-1、GPX4和SLC7A11 mRNA表达水平较模型组均显著增加(P<0.01,P<0.05)。葛根芩连汤中、低剂量组和二甲双胍组ACSL4 mRNA表达量均显著降低(P<0.01,P<0.05)。结论葛根芩连汤可通过抑制铁死亡来改善非酒精性脂肪肝病,其作用机制可能与调节Nrf2/SLC7A11/GPX4信号通路有关。 展开更多
关键词 葛根芩连汤 非酒精性脂肪性肝病 铁死亡 氧化应激 Nrf2/SLC7A11/GPX4通路
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