人凝血因子Ⅷ的提取工艺研究 被引量：5

1

作者 梁小明 黄璠 +2 位作者 周星 何淑琴 刘敏亮 《安徽农业科学》 CAS 2013年第30期12043-12044,12048,共3页

[目的]考察制备过程中工艺优化对人凝血因子Ⅷ制备的影响.[方法]以人冰冻血浆经过融解,0～4℃离心,收集的冷沉淀为原始材料,通过调整不同倍数的溶解液、选择不同的抗凝剂、调节不同的酸沉pH,观察蛋白液的稳定性,检测蛋白液中蛋白质含量... [目的]考察制备过程中工艺优化对人凝血因子Ⅷ制备的影响.[方法]以人冰冻血浆经过融解,0～4℃离心,收集的冷沉淀为原始材料,通过调整不同倍数的溶解液、选择不同的抗凝剂、调节不同的酸沉pH,观察蛋白液的稳定性,检测蛋白液中蛋白质含量及凝血因子Ⅷ的活性.结果：加入冷沉淀重量5倍的溶解液,用4 IU/ml肝素钠抗凝,调节酸沉的pH在6.2 ～6.4范围内,蛋白液的稳定性最佳,人凝血因子Ⅷ的活性最高.[结论]通过优化人凝血因子Ⅷ提取过程的参数,可以显著提高人凝血因子Ⅷ的稳定性,降低杂蛋白浓度,保护Ⅷ因子的活性. 展开更多

关键词 冷沉淀 人凝血因子Ⅷ 酸沉

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人凝血酶原复合物提取及纯化工艺的研究 被引量：3

2

作者 何淑琴 张丽铃 黄璠 《安徽农业科学》 CAS 2013年第17期7420-7422,共3页

[目的]确定血浆中人凝血酶原复合物提取及纯化的最佳工艺条件。[方法]以人血浆为原料,凝血酶原复合物的吸附率和回收率为评价指标,采用单因素试验及正交试验对提取和纯化条件进行优选。[结果]最佳工艺为:选用pH值为7.0的DEAE-Sephadex ... [目的]确定血浆中人凝血酶原复合物提取及纯化的最佳工艺条件。[方法]以人血浆为原料,凝血酶原复合物的吸附率和回收率为评价指标,采用单因素试验及正交试验对提取和纯化条件进行优选。[结果]最佳工艺为:选用pH值为7.0的DEAE-Sephadex A50凝胶从人血浆中提取人凝血酶原复合物,吸附50 min时,凝胶对凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ的吸附率可达84.0%、86.5%、85.7%和78.0%;采用NaCl浓度为0.1 mol/L、pH值为7.2的洗涤液洗涤吸附后的凝胶5次,然后用NaCl浓度为2.0 mol/L的洗脱液洗脱3次,对凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ的回收率可达84.9%、76.4%、82.8%和78.7%。[结论]该工艺合理、可行,适合人凝血酶原复合物的工业化生产。 展开更多

关键词 人凝血酶原复合物 凝胶 提取纯化工艺

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人凝血酶原复合物的制备及临床应用 被引量：4

3

作者 黄璠 《临床医药实践》 2014年第7期529-532,共4页

人凝血酶原复合物（PCC）来源于健康人血浆，是一种具有凝血作用的血浆蛋白静脉注射制剂。PCC主要由维生素K依赖性的凝血酶原（FⅡ）、凝血酶原转化因子（FⅦ）、抗血友病乙型因子（FⅨ）和自身凝血酶原（FⅩ）等四种凝血因子组成。这... 人凝血酶原复合物（PCC）来源于健康人血浆，是一种具有凝血作用的血浆蛋白静脉注射制剂。PCC主要由维生素K依赖性的凝血酶原（FⅡ）、凝血酶原转化因子（FⅦ）、抗血友病乙型因子（FⅨ）和自身凝血酶原（FⅩ）等四种凝血因子组成。这些因子都是在肝中合成的糖蛋白。由于这四种凝血因子具有极其相似的相对分子质量和等电点、 展开更多

关键词 人凝血酶原复合物 临床应用 维生素K依赖性 制备 转化因子 相对分子质量 凝血因子 健康人血浆

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肌注手足口病(EV71型)人免疫球蛋白层析工艺研究 被引量：2

4

作者 梁小明 周星 +2 位作者 何淑琴 黄璠 刘敏亮 《安徽农业科学》 CAS 2013年第31期12262-12265,共4页

[目的]优化手足口病(EV71型)人免疫球蛋白的层析工艺条件,为制备治疗手足口病(EV71型)的人免疫球蛋白提供依据。[方法]采用单因素试验和响应面分析法,研究样品pH值、蛋白质浓度和电导率对层析后流穿液中免疫球蛋白纯度的影响。[结果]影... [目的]优化手足口病(EV71型)人免疫球蛋白的层析工艺条件,为制备治疗手足口病(EV71型)的人免疫球蛋白提供依据。[方法]采用单因素试验和响应面分析法,研究样品pH值、蛋白质浓度和电导率对层析后流穿液中免疫球蛋白纯度的影响。[结果]影响层析流穿液中免疫球蛋白纯度的主要因素为电导率,其次是蛋白质浓度,pH值对层析流穿液中免疫球蛋白蛋白纯度影响最小。手足口病(EV71型)人免疫球蛋白的最佳层析工艺参数为:pH 5.28、蛋白质浓度41.62 g/L、电导率为0.24 m/s。[结论]层析优化后的流穿液中手足口病(EV71型)人免疫球蛋白纯度可达到99.60%,可用于制备高纯度的手足口病(EV71型)人免疫球蛋白。 展开更多

关键词 手足口病 免疫球蛋白 层析 响应面法

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外用人纤维蛋白原的分离纯化 被引量：7

5

作者 黄璠 梁小明 +3 位作者 杨笃才 张丽铃 刘宇良 匡青芬 《临床医药实践》 2015年第12期923-925,共3页

目的:建立一种外用人纤维蛋白原的制备工艺。方法:以血浆冷沉淀为原料,利用铝胶吸附、酸沉淀、离子交换层析、低温乙醇沉淀等方法提取人纤维蛋白原。参考中国药典方法检测外用人纤维蛋白原的复溶时间、凝固活力、纯度、人凝血因子XⅢ效... 目的:建立一种外用人纤维蛋白原的制备工艺。方法:以血浆冷沉淀为原料,利用铝胶吸附、酸沉淀、离子交换层析、低温乙醇沉淀等方法提取人纤维蛋白原。参考中国药典方法检测外用人纤维蛋白原的复溶时间、凝固活力、纯度、人凝血因子XⅢ效价等主要指标。结果:本研究制备的产品具有复溶时间短、凝固活力强、纯度高等优点,产品质量明显高于国家标准,优于市场上同类产品。结论:本研究建立的外用人纤维蛋白原的制备工艺,能有效提高血浆的综合利用率,具有极高的经济价值和社会价值。 展开更多

关键词 人纤维蛋白原 冷沉淀 离子交换层析

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人凝血酶原复合物冻干工艺的研究 被引量：1

6

作者 何淑琴 张丽铃 黄璠 《南昌大学学报（工科版）》 CAS 2013年第2期134-138,共5页

为建立最优的人凝血酶原复合物(PCC)冻干工艺,先通过实验确定共晶点,再采用正交实验法,对PCC真空冷冻干燥过程的预冻时间、主要干燥温度、主干燥时间、解吸温度和真空压力等关键参数进行研究。获得PCC最优的冻干工艺:-40℃预冻1h;主要... 为建立最优的人凝血酶原复合物(PCC)冻干工艺,先通过实验确定共晶点,再采用正交实验法,对PCC真空冷冻干燥过程的预冻时间、主要干燥温度、主干燥时间、解吸温度和真空压力等关键参数进行研究。获得PCC最优的冻干工艺:-40℃预冻1h;主要干燥温度从-40℃升温至-28℃,再从-28℃升温至5℃,总耗时22 h,真空压力为25 Pa;解析温度维持在33℃,真空压力为5 Pa,终点测试压力无变化时结束。通过该工艺冻干出的PCC符合《中国药典》2010年版三部该项下的质量要求,经验证该冻干曲线能够应用于人凝血酶原复合物的大规模生产。 展开更多

关键词 生物制品 正交实验 人凝血酶原复合物 冻干工艺

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人纤维蛋白原制剂中蛋白质含量测定方法的探究 被引量：5

7

作者 何淑琴 梁小明 +1 位作者 黄玲 张丽铃 《临床医药实践》 2014年第12期934-935,共2页

目的:探究适宜的人纤维蛋白原制剂中蛋白质含量测定方法。方法:分别应用《中国药典》三部(2010年版)中蛋白质测定法项下三氯醋酸沉淀法和两种改良后的三氯醋酸法测定6批人纤维蛋白原制剂中的蛋白质含量,比较三种方法的稳定性和平行性。... 目的:探究适宜的人纤维蛋白原制剂中蛋白质含量测定方法。方法:分别应用《中国药典》三部(2010年版)中蛋白质测定法项下三氯醋酸沉淀法和两种改良后的三氯醋酸法测定6批人纤维蛋白原制剂中的蛋白质含量,比较三种方法的稳定性和平行性。结果:改良后的三氯醋酸沉淀2法[用三氯醋酸代替《中国药典》三部(2010年版)钨酸钠沉淀法中钨酸钠和硫酸溶液]的稳定性和平行性明显比《中国药典》三部(2010年版)中蛋白质测定法项下三氯醋酸沉淀法和改良后的三氯醋酸沉淀3法更好,相对标准偏差(RSD)更低。结论:改良后的三氯醋酸沉淀2法更适合人纤维蛋白原制剂中蛋白质含量的测定。 展开更多

关键词 人纤维蛋白原 三氯醋酸沉淀法 蛋白质含量

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高纯度凝血因子Ⅸ制剂的制备方法 被引量：2

8

作者 匡青芬 陈新朋 +4 位作者 杨笃才 张猛 杨智 黄璠 刘宇良 《临床医药实践》 2016年第6期452-455,共4页

人凝血因子Ⅸ（FⅨ）为参与人体凝血过程中不可或缺的维生素K依赖型糖蛋白,相对分子质量大小约57 k Da,在体内由肝细胞合成并分泌到血液中。血浆中人凝血因子Ⅸ的浓度很低,健康成年人为5μg/m L左右。当血浆中人凝血因子Ⅸ含量或活性大... 人凝血因子Ⅸ（FⅨ）为参与人体凝血过程中不可或缺的维生素K依赖型糖蛋白,相对分子质量大小约57 k Da,在体内由肝细胞合成并分泌到血液中。血浆中人凝血因子Ⅸ的浓度很低,健康成年人为5μg/m L左右。当血浆中人凝血因子Ⅸ含量或活性大幅下降时,内源性凝血途径受到阻碍,人体无法进行正常的凝血,从而引发B型血友病。 展开更多

关键词 人凝血因子Ⅸ 血友病患者 内源性凝血途径 血浆蛋白 肝细胞 依赖型 凝血因子制品 冷沉淀 凝血时间 病毒灭活方法

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肌注手足口病(EV71型)人免疫球蛋白的研制

9

作者 梁小明 周星 +2 位作者 何淑琴 黄璠 刘敏亮 《安徽农业科学》 CAS 2013年第20期8805-8807,共3页

[目的]研制肌注手足口病(EV71型)人免疫球蛋白,用以治疗重症手足口病。[方法]以特异性血浆为原料,采用低温乙醇法结合离子交换层析制备手足口病(EV71型)人免疫球蛋白,对其层析条件进行优化,制定了手足口病(EV71型)人免疫球蛋白检测的质... [目的]研制肌注手足口病(EV71型)人免疫球蛋白,用以治疗重症手足口病。[方法]以特异性血浆为原料,采用低温乙醇法结合离子交换层析制备手足口病(EV71型)人免疫球蛋白,对其层析条件进行优化,制定了手足口病(EV71型)人免疫球蛋白检测的质量标准,并对手足口病(EV71型)人免疫球蛋白相关指标进行检测。[结果]血浆内EV71型中和抗体效价大于1∶60的血浆份数占30%以上,制品各项检测指标符合制定的质量标准。[结论]可直接从自然感染的手足口病的供血浆员中筛选出抗EV71型高效价血浆,制备手足口病(EV71型)人免疫球蛋白。 展开更多

关键词 手足口病 免疫球蛋白 肠道病毒71型

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酶联免疫吸附试验检测人血浆中纤维蛋白原含量

10

作者 姜国亮 《中国实用医药》 2011年第17期97-98,共2页

目的探讨酶联免疫吸附试验在检测人血浆中纤维蛋白原含量中的应用价值。方法采用竞争抑制ELISA法测定人血浆中纤维蛋白原含量,并探索凝血酶、第二抗体最佳稀释倍数及适宜反应时间。在最适宜条件下测定人血浆中纤维蛋白原含量。结果第二... 目的探讨酶联免疫吸附试验在检测人血浆中纤维蛋白原含量中的应用价值。方法采用竞争抑制ELISA法测定人血浆中纤维蛋白原含量,并探索凝血酶、第二抗体最佳稀释倍数及适宜反应时间。在最适宜条件下测定人血浆中纤维蛋白原含量。结果第二抗体稀释1000倍为适宜的稀释倍数,10IU/ml为最适宜凝血酶作用浓度,室温1.5h为较理想的作用条件。FPA标准品稀释至60ng/ml,20ng/ml,5ng/ml,回收率分别为107.2%、98%、110%。结论用建立起来的竞争抑制性ELISA法测定人血浆蛋白原中,纤维蛋白肽A的含量,回收率高,操作简单方便,值得推广应用。 展开更多

关键词 酶联免疫吸附试验 血浆 纤维蛋白原 检测

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静注人免疫球蛋白(pH4)的稳定性研究

11

作者 黄军民 梁小明 +2 位作者 何淑琴 张丽铃 黄璠 《中国实用医药》 2014年第3期27-28,共2页

目的：考察静注人免疫球蛋白（pH4）的稳定性。方法对三批静注人免疫球蛋白（pH4）进行2~8℃条件下为期3年的长期稳定性试验，对考察的制品依照《中华人民共和国药典》2005年版二部中附录XIX C药物稳定性试验指导原则及《中华人民共和... 目的：考察静注人免疫球蛋白（pH4）的稳定性。方法对三批静注人免疫球蛋白（pH4）进行2~8℃条件下为期3年的长期稳定性试验，对考察的制品依照《中华人民共和国药典》2005年版二部中附录XIX C药物稳定性试验指导原则及《中华人民共和国药典》2010年版二部中附录XIX C原料药及药物制剂稳定性试验指导原则进行检测。结果在长期稳定性试验过程中，可见异物，纯度、pH值、IgG含量、蛋白质含量、分子大小分布等均无明显的变化趋势。结论静注人免疫球蛋白（pH4）稳定性良好，在进行3年长期稳定性试验后，其质量仍符合《中华人民共和国药典》2010年版三部的要求。 展开更多

关键词 静注人免疫球蛋白(pH4) 质量 稳定性

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