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休眠松材线虫幼虫快速检疫方法 被引量:1
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作者 廖月华 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期570-575,共6页
较系统地介绍了采用物理与化学相结合的方法,快速破除木包装中松材线虫幼虫休眠期,加速休眠幼虫转变为成虫,促进休眠幼虫的分离数量,缩短检疫时间,提高松材线虫的检出率。
关键词 松材线虫 幼虫休眠期 破除方法
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猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒河南09分离株ORF5基因的克隆及结构分析 被引量:1
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作者 杨春华 韩志涛 +3 位作者 胡慧 钟毅 王冬 祝建新 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期73-77,共5页
参照GenBank上登录的猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)美洲型AF494042株ORF5基因序列,设计1对特异性引物,应用RT-PCR扩增出PRRSV河南09分离株(HN-09)的ORF5基因,经与pGEM-T Easy载体连接后,筛选出阳性重组质粒进行序列测定,并利用... 参照GenBank上登录的猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)美洲型AF494042株ORF5基因序列,设计1对特异性引物,应用RT-PCR扩增出PRRSV河南09分离株(HN-09)的ORF5基因,经与pGEM-T Easy载体连接后,筛选出阳性重组质粒进行序列测定,并利用DNASTAR软件对序列进行分析。结果表明,扩增片段长度为721 bp,与预期目的片段大小一致,测序验证其为PRRSV的ORF5基因。序列分析表明,HN-09株与AF494042的同源性为93.5%,与山西、山东近年分离株的同源性为97.8%-99.2%,与河北、安徽、黑龙江等省分离株的同源性为93.4%-98.7%,但与2004年河南分离株的亲缘关系较远,其同源性为88.7%。用ANTHEPROT软件分析HN-09株和AF494042株编码蛋白质氨基酸的组成和二级结构的含量及分布,结果表明,HN-09株中碱基的突变,导致其氨基酸序列与美洲型有所不同,形成的二级结构略有差异,但二级结构元件的大致分布与美洲型相同。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒 ORF5基因 克隆 序列分析 结构分析
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检测猪繁殖与呼吸综合征病毒SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法的建立及初步应用 被引量:1
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作者 杨春华 胡慧 +2 位作者 钟毅 韩志涛 祝建新 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2010年第6期745-749,共5页
利用反转录PCR(RT-PCR)技术扩增出猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5基因部分片段,并克隆到pGEM-TEasy载体上,得到重组质粒作为荧光定量PCR检测的标准模板,以10倍梯度稀释模板,进行SYBR GreenⅠ荧光定量PCR扩增并制作标准曲线,建立PRRS... 利用反转录PCR(RT-PCR)技术扩增出猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5基因部分片段,并克隆到pGEM-TEasy载体上,得到重组质粒作为荧光定量PCR检测的标准模板,以10倍梯度稀释模板,进行SYBR GreenⅠ荧光定量PCR扩增并制作标准曲线,建立PRRSV的荧光定量PCR检测方法。该方法检测灵敏度可达10拷贝/μL,与猪圆环病毒、猪乙型脑炎病毒、猪伪狂犬病毒、猪瘟病毒、猪流感病毒和猪细小病毒不发生交叉反应,具有良好的特异性和重复性;对16份临床疑似病料进行了检测,发现15份均为荧光定量PCR阳性,而常规RT-PCR只能检测出12份阳性。结果表明,建立的实时荧光定量PCR具有特异、敏感、快速、定量、重复性好等优点,可用于临床PRRSV感染的早期诊断以及分子流行病学调查。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 GP5基因 实时荧光定量PCR SYBR GreenⅠ
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脐橙技术性贸易措施信息系统的设计与开发
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作者 彭媛 唐建军 +1 位作者 黄丽莉 院超云 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期1042-1046,共5页
随着我国脐橙生产规模的扩大,出口量的增加,其对外贸易受到进口国的技术性贸易壁垒(TBT)的风险急剧增加。为避免企业在脐橙贸易中,因遭受相关进口国设置的技术性贸易壁垒而蒙受严重损失,建立相关技术性贸易措施信息系统,让相关产业利益... 随着我国脐橙生产规模的扩大,出口量的增加,其对外贸易受到进口国的技术性贸易壁垒(TBT)的风险急剧增加。为避免企业在脐橙贸易中,因遭受相关进口国设置的技术性贸易壁垒而蒙受严重损失,建立相关技术性贸易措施信息系统,让相关产业利益者对技术性贸易壁垒能及时了解、提早预防,十分必要。介绍脐橙技术性贸易壁垒信息系统,采用.Net技术进行开发,基于C/S、B/S混合架构,开发语言为C#。系统通过对WTO/TBT涉及脐橙贸易的技术法规、植物卫生措施、技术标准与合格评定程序等关注焦点进行搜集整理,同时利用网络爬虫技术,及时收集、翻译全球脐橙主要贸易国的各类TBT信息,实现了脐橙TBT通报信息、TBT卫生信息等的检索,并有论坛系统供用户与专家之间进行交流。系统对于脐橙出口中遇到的TBT信息不对称所造成的贸易障碍,提供了一种较好的解决方案。 展开更多
关键词 技术性贸易措施 脐橙 信息系统 网络爬虫
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液相色谱-串联质谱法快速测定蔬菜中19种农药残留 被引量:12
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作者 万建春 郭平 +2 位作者 祝建新 占春瑞 左海根 《分析科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期116-120,共5页
建立了蔬菜中19种农药残留的快速测定方法。蔬菜样品用乙腈-甲酸均质提取,经三氯甲烷液-液萃取,溶剂转换后加入甲苯作为保护剂;经N-丙基乙二胺(PSA)、石墨化碳黑(GCB)净化,液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)正离子源(ESI+)、多反应监测模式(M... 建立了蔬菜中19种农药残留的快速测定方法。蔬菜样品用乙腈-甲酸均质提取,经三氯甲烷液-液萃取,溶剂转换后加入甲苯作为保护剂;经N-丙基乙二胺(PSA)、石墨化碳黑(GCB)净化,液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)正离子源(ESI+)、多反应监测模式(MRM)测定,基质匹配标准工作曲线定量。蔬菜样品基质在50~1 000ng/mL浓度范围内线性关系良好(r2>0.99)。在0.01、0.02、0.04mg/kg添加浓度水平下,各农药回收率在65.4%~120.0%之间,相对标准偏差(RSD)在3.35%~17.46%之间。实验发现QuEChERS各吸附剂对极性和化学结构不同农药的吸附作用有所不同,进一步通过正交试验设计的优化,得到了一组极性有差异和化学结构不同的农药净化用吸附剂和保护剂的组合方式。 展开更多
关键词 蔬菜 农药残留 液相色谱-串联质谱法 正交试验设计
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高效液相色谱-串联质谱法同时测定水产品中硝基呋喃和硝基咪唑类药物残留量 被引量:16
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作者 万建春 王文君 +1 位作者 占春瑞 郭平 《理化检验(化学分册)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期1168-1173,共6页
采用高效液相色谱-串联质谱法同时测定水产品中硝基呋喃和硝基咪唑类药物残留量。样品用盐酸水解,在酸性环境下进行衍生化反应16h,乙酸乙酯萃取。以PhenomenexLunaC18色谱柱为分离柱,以不同体积比的乙腈和乙酸(0.2+99.8)溶液混... 采用高效液相色谱-串联质谱法同时测定水产品中硝基呋喃和硝基咪唑类药物残留量。样品用盐酸水解,在酸性环境下进行衍生化反应16h,乙酸乙酯萃取。以PhenomenexLunaC18色谱柱为分离柱,以不同体积比的乙腈和乙酸(0.2+99.8)溶液混合液为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾正离子源多反应监测模式检测。采用同位素内标法定量。方法的检出限(3S/N)在0.15~0.30μg·kg11之间。以空白样品为基体进行加标回收试验,所得回收率在83.3%~115%之间,测定值的相对标准偏差(n=6)在2.3%~14%之间。 展开更多
关键词 高效液相色谱-串联质谱法 水产品 硝基呋喃 硝基咪唑
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赣南脐橙成熟采收期果实病害调查 被引量:1
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作者 黄丽莉 李茵 +2 位作者 祝建新 奚国华 桂家祥 《中国南方果树》 北大核心 2017年第1期37-39,共3页
2013—2015年果实成熟采收期,先后从江西赣州18个县(市、区)115个乡镇随机采集883份脐橙果实样品进行病原菌的分离和鉴定。结果表明,发现有柑桔青霉病菌Penicillium italicum、柑桔绿霉病菌P.digitatum、柑桔扩展青霉病菌P.expansum、... 2013—2015年果实成熟采收期,先后从江西赣州18个县(市、区)115个乡镇随机采集883份脐橙果实样品进行病原菌的分离和鉴定。结果表明,发现有柑桔青霉病菌Penicillium italicum、柑桔绿霉病菌P.digitatum、柑桔扩展青霉病菌P.expansum、柑桔炭疽病菌Colletotrichum gloeosporioides、柑桔干腐病菌Fusarium moniliforme、柑桔疫霉病菌Phytophthora citrophthora、柑桔黑腐病菌Alternaria citri、柑桔黑斑病菌Phoma citricarpa等8种病原真菌,以及柑桔溃疡病菌Xanthomonas axonopodis pv.citri、柑桔黄龙病菌亚洲种Candidatus Liberibacter asiaticus等2种病原细菌。其中,柑桔青霉病菌+柑桔绿霉病菌的检出率分别为40.7%,柑桔炭疽病菌的检出率为23.2%,柑桔溃疡病菌的检出率分别为7.0%,其余病原菌的检出率在0.1%~1.6%之间。赣南脐橙贮藏期,柑桔青霉病与绿霉病是重点防治对象,且要加强柑桔炭疽病的防治。 展开更多
关键词 赣南脐橙 果实病害 采收期
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柑橘花期蓟马的种类与鉴定 被引量:8
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作者 阙海勇 黄丽莉 +3 位作者 薛芳森 车飞 何海敏 陈超 《生物灾害科学》 2013年第4期355-358,共4页
为明确柑橘花期蓟马种类,以柑橘园为实验基地,系统调查橘园中蓟马的种类。经形态学鉴定共发现3种蓟马,且3种蓟马的形态分别与棕榈蓟马(Thrips palmi Karny)、淡色蓟马(Thrips flavus Schrank)和华简管蓟马(Haplothris chinesis Priesner... 为明确柑橘花期蓟马种类,以柑橘园为实验基地,系统调查橘园中蓟马的种类。经形态学鉴定共发现3种蓟马,且3种蓟马的形态分别与棕榈蓟马(Thrips palmi Karny)、淡色蓟马(Thrips flavus Schrank)和华简管蓟马(Haplothris chinesis Priesner)极其相似。对3种蓟马分别进行单头虫体的基因组DNA提取,对其ITS2基因序列进行PCR扩增并测序,测序结果登入NCBI数据进行比对,结果表明3种蓟马分别与棕榈蓟马(Thrips palmi Karny)、淡色蓟马(Thrips flavus Schrank)和华简管蓟马(Haplothris chinesis Priesner)的相似度均达99%。 展开更多
关键词 柑橘花期 蓟马种类 鉴定
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茶黄蓟马的生物学特性 被引量:7
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作者 黄丽莉 何海敏 +1 位作者 阙海勇 薛芳森 《生物灾害科学》 2013年第3期247-250,共4页
茶黄蓟马(Scirtothrips dorsalis Hoods)是江西茶园茶树(Camellia sinensis)叶片上的重要刺吸性害虫。通过室内饲养和野外调查该虫在南昌地区的生物学特性。调查结果表明:该虫在江西黄马茶园1年发生8-10代,主要以成虫和少数若虫... 茶黄蓟马(Scirtothrips dorsalis Hoods)是江西茶园茶树(Camellia sinensis)叶片上的重要刺吸性害虫。通过室内饲养和野外调查该虫在南昌地区的生物学特性。调查结果表明:该虫在江西黄马茶园1年发生8-10代,主要以成虫和少数若虫越冬。以若虫越冬的个体3月中旬开始羽化;以成虫越冬的个体4月上旬开始产卵。4月中旬茶园始见初孵若虫。11月出现的成虫和少数若虫进入越冬。成若虫喜食嫩芽和幼叶,导致叶片组织坏死。在22-30℃条件下,温度对茶黄蓟马发育历期有显著影响,随着温度升高,卵期、若虫期和成虫寿命都逐渐缩短,卵期8~3.83d,若虫期15~7.4d,成虫寿命26.92~16.9d。 展开更多
关键词 茶黄蓟马 年生活史 温度 发育历期
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