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三氯杀螨砜对斑马鱼胚胎的生态毒理效应: 1; 作者刘宝刘静 +2 位作者张旭程杨艳黎美凤《南方农业学报》北大核心 2025年第8期2662-2671,共10页; 【目的】探究三氯杀螨砜(TDN)对斑马鱼胚胎的生态毒理效应,为揭示TDN对水生生物的毒性作用机制及有机氯农药的环境生态风险评估提供数据支撑。【方法】将斑马鱼胚胎分别暴露于0、6、9、12、15、18 mg/L的TDN溶液中,记录TDN暴露对斑马鱼... 展开更多; 关键词斑马鱼胚胎三氯杀螨砜氧化应激细胞凋亡炎症反应; 在线阅读下载PDF 职称材料

猴痘病毒A23R蛋白的表达、纯化及其小鼠抗血清制备被引量：2: 2; 作者王毅豪李名志 +8 位作者贾梦乐杨领弟熊嘉琪王婷王宇刘树荣郭韫丽孔令保黎美凤《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期642-648,共7页; 目的大肠杆菌细胞表达和镍柱纯化猴痘病毒(MPXV)A23R蛋白,制备小鼠抗MPXV A23R的高效价抗血清。方法构建重组质粒pET-28a-MPXV-A23R,并转化至大肠杆菌BL21中诱导表达,优化蛋白表达条件后获得大量蛋白。镍柱纯化重组蛋白A23R并进行Wester... 展开更多; 关键词猴痘病毒(MPXV) A23R 表达纯化免疫; 在线阅读下载PDF 职称材料

猴痘病毒E2L蛋白的表达、纯化及免疫原性评价被引量：2: 3; 作者贾梦乐熊嘉琦 +6 位作者杨领弟王毅豪孙静婷王婷黎美凤孔令保彭棋《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期3056-3063,共8页; 【目的】构建猴痘病毒E2L蛋白原核表达载体,经诱导表达及纯化鉴定后免疫接种昆明小鼠评价其免疫原性,为猴痘病毒诊断试剂、疫苗和特异性治疗药物的研发打下基础。【方法】根据GenBank已公布的猴痘病毒基因组序列优化密码子后合成E2L基因... 展开更多; 关键词猴痘病毒 E2L蛋白原核表达免疫原性; 在线阅读下载PDF 职称材料

持续感染口蹄疫病毒VP1蛋白对细胞转录组的影响被引量：1: 4; 作者杨黎刘萍 +7 位作者韦美华柯雄锋刘丽清宋静静方莹唐欢孔令保辛秀《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期411-421,共11页; 【目的】通过转录组测序(RNA-Seq)方法分析持续感染口蹄疫病毒结构蛋白VP1诱导的PK-15细胞基因表达谱的变化,探索VP1蛋白对宿主细胞信号通路的影响。为后续开展VP1影响FMDV持续感染相关机制研究提供基础数据和理论支持。【方法】PK-15... 展开更多; 关键词转录组基因表达谱 FMDV 持续感染 VP1 差异表达基因; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名三氯杀螨砜对斑马鱼胚胎的生态毒理效应: 1; 作者刘宝刘静张旭程杨艳黎美凤; 机构江西农业大学病原微生物研究所/南昌市动物病毒与基因工程重点实验室/江西农业大学生物科学与工程学院江西省农业技术推广中心; 出处《南方农业学报》北大核心 2025年第8期2662-2671,共10页; 基金国家自然科学基金项目(32460928) 江西省自然科学基金项目(20224BAB215036,20242BAB25396) 江西省教育厅科技基金项目(GJJ2200442)。; 文摘【目的】探究三氯杀螨砜(TDN)对斑马鱼胚胎的生态毒理效应,为揭示TDN对水生生物的毒性作用机制及有机氯农药的环境生态风险评估提供数据支撑。【方法】将斑马鱼胚胎分别暴露于0、6、9、12、15、18 mg/L的TDN溶液中,记录TDN暴露对斑马鱼胚胎存活率、卵黄囊面积、心率和体长的影响。使用试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性及丙二醛(MDA)含量。实时荧光定量PCR检测斑马鱼胚胎凋亡、炎症和免疫相关基因的相对表达量。采用吖啶橙染色和苏丹黑染色鉴定细胞凋亡水平和嗜中性粒细胞数量。【结果】随TDN浓度和暴露时间增加,斑马鱼胚胎存活率逐渐降低,在0~15 mg/L的TDN中暴露72 h,斑马鱼胚胎卵黄囊面积显著(P<0.05,下同)或极显著(P<0.01,下同)增大,心率显著或者极显著降低,体长缩短,15 mg/L TDN处理斑马鱼胚胎出现明显的心包水肿。与0 mg/L TDN处理相比,在6、9、12和15 mg/L的TDN暴露下,斑马鱼胚胎CAT活性均极显著升高,MDA含量均有所升高,9、12与15 mg/L TDN处理SOD活性均极显著升高。与0 mg/L TDN处理相比,6、9、12和15 mg/L TDN处理斑马鱼胚胎促凋亡相关基因Bax和P53相对表达量均有所升高,抗凋亡相关基因Bcl-2相对表达量整体上有所降低,炎症相关基因IL-6、IL-8、CXCL-C1C、TNF-α、Myd88和P65相对表达量均有所升高,免疫相关基因Ifnγ和Mxa和Mxb相对表达量均有所升高。吖啶橙染色和苏丹黑染色结果显示,与0 mg/L TDN处理相比,其他各TDN处理细胞凋亡水平整体上升高,嗜中性粒细胞减少。【结论】TDN对斑马鱼胚胎的毒性作用表现在生长发育受损、诱导氧化应激反应、细胞凋亡、炎症反应和抑制免疫功能,其可能通过“氧化应激—凋亡—免疫紊乱”途径发挥作用。含氯杀虫剂的危害机理具有共性,应在环境风险评估中重视其对机体稳态的长期干扰。; 关键词斑马鱼胚胎三氯杀螨砜氧化应激细胞凋亡炎症反应; Keywords zebrafish embryos 2,4,5,4′-tetrachlorodiphenyl sulfone oxidative stress apoptosis inflammatory responses; 分类号 S965.819 [农业科学—水产养殖]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猴痘病毒A23R蛋白的表达、纯化及其小鼠抗血清制备被引量：2: 2; 作者王毅豪李名志贾梦乐杨领弟熊嘉琪王婷王宇刘树荣郭韫丽孔令保黎美凤; 机构江西农业大学:病原微生物研究所; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期642-648,共7页; 基金国家自然科学基金(31860038) 南昌市动物病毒与基因工程重点实验项目(2021-NCZDSYS-008) +1 种基金江西省教育厅科技基金(GJJ2200442)。; 文摘目的大肠杆菌细胞表达和镍柱纯化猴痘病毒(MPXV)A23R蛋白,制备小鼠抗MPXV A23R的高效价抗血清。方法构建重组质粒pET-28a-MPXV-A23R,并转化至大肠杆菌BL21中诱导表达,优化蛋白表达条件后获得大量蛋白。镍柱纯化重组蛋白A23R并进行Western blot法鉴定。纯化后的A23R蛋白免疫小鼠,制备A23R多克隆抗体,采用ELISA检测抗体免疫滴度。结果在0.6 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)、诱导温度37℃、诱导20 h时,获得的A23R重组蛋白表达量最大,纯化后的蛋白纯度约为96.07%,经Western blot法鉴定为目的蛋白。重组蛋白免疫小鼠,第6周时IgG抗体的效价达到1∶102400。结论成功获得高表达和高纯度的重组A23R蛋白,并制备了小鼠抗MPXV-A23R的高效价血清。; 关键词猴痘病毒(MPXV) A23R 表达纯化免疫; Keywords monkeypox virus(MPXV) A23R expression purification immunity; 分类号 Q939.47 [生物学—微生物学] R392.11 [医药卫生—免疫学] R392-33 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猴痘病毒E2L蛋白的表达、纯化及免疫原性评价被引量：2: 3; 作者贾梦乐熊嘉琦杨领弟王毅豪孙静婷王婷黎美凤孔令保彭棋; 机构江西农业大学生物科学与工程学院/南昌市动物病毒与基因工程重点实验室/江西农业大学病原微生物研究所; 出处《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期3056-3063,共8页; 基金国家自然科学基金项目(32202823,31860038) 中国博士后科学基金项目(2022M711398)。; 文摘【目的】构建猴痘病毒E2L蛋白原核表达载体,经诱导表达及纯化鉴定后免疫接种昆明小鼠评价其免疫原性,为猴痘病毒诊断试剂、疫苗和特异性治疗药物的研发打下基础。【方法】根据GenBank已公布的猴痘病毒基因组序列优化密码子后合成E2L基因,将其克隆至表达载体pET-28a(+)上构建原核表达载体pET-28a-E2L,然后转化大肠杆菌BL21(DE3)受态细胞,采用控制变量的方法对融合蛋白最佳诱导表达条件进行优化,通过SDS-PAGE和Western blotting进行鉴定。融合蛋白经His-Bind柱亲和层析纯化后,经腹腔注射免疫昆明小鼠,从免疫当天(第0 d)开始每隔7 d通过断尾法采集昆明小鼠血清1次,采用ELISA检测血清抗体效价。【结果】以构建的原核表达载体pET-28a-E2L转化BL21(DE3)受态细胞后,经IPTG诱导,能成功表达获得融合蛋白E2L,且主要以包涵体的形式进行表达。融合蛋白E2L的最佳诱导表达条件为40℃下以1.0 mmol/L IPTG诱导16 h,通过His-Bind柱亲和层析纯化时的最佳咪唑洗脱浓度为100 mmol/L。昆明小鼠免疫试验结果表明,纯化后的融合蛋白E2L能诱导昆明小鼠产生较高水平的体液免疫,至免疫第42 d昆明小鼠血清仍然维持较高抗体水平,抗体效价高达1∶70400,说明融合蛋白E2L具有良好的免疫原性。【结论】猴痘病毒E2L蛋白在原核表达系统能实现高效表达,且以纯化后的融合蛋白E2L免疫昆明小鼠能产生较强的体液免疫,表明具有良好的免疫原性,可用于新型猴痘病毒检测方法及预防疫苗的研发。; 关键词猴痘病毒 E2L蛋白原核表达免疫原性; Keywords monkeypox virus E2L protein prokaryotic expression immunogenicity; 分类号 S852.659.1 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名持续感染口蹄疫病毒VP1蛋白对细胞转录组的影响被引量：1: 4; 作者杨黎刘萍韦美华柯雄锋刘丽清宋静静方莹唐欢孔令保辛秀; 机构江西农业大学病原微生物研究所江西农业大学生物科学与工程学院南昌市动物病毒与基因工程重点实验室; 出处《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期411-421,共11页; 基金江西省自然科学基金青年项目(20192BAB214001)。; 文摘【目的】通过转录组测序(RNA-Seq)方法分析持续感染口蹄疫病毒结构蛋白VP1诱导的PK-15细胞基因表达谱的变化,探索VP1蛋白对宿主细胞信号通路的影响。为后续开展VP1影响FMDV持续感染相关机制研究提供基础数据和理论支持。【方法】PK-15细胞分别转染pCAGGS-HA(对照载体)、pCAGGS-HA-Pi-VP1质粒,转染36 h后,Western blot检测VP1蛋白表达,同时提取两组细胞总RNA进行转录组测序(每组3个重复,2组6个样本)。将测序所得的序列进行过滤比对,获得差异表达基因后,对差异表达基因进行了生物信息学分析。采用qRT-PCR验证关键差异表达基因的表达。【结果】RNA-Seq共鉴定出3376个差异表达基因(DEGs)|log2(Fold Change)|>0和padj<0.05,其中上调基因1744个,下调基因1632个。许多参与免疫反应和炎症的效应基因差异表达。GO和KEGG富集分析显示,差异基因GO条目绝大部分与核糖体有关,而KEGG富集中涉及了与天然免疫相关的信号通路,如TNF信号通路、Toll受体信号通路。【结论】pCAGGS-HA-Pi-VP1转染PK-15细胞之后,改变了细胞的表达谱,获得的DEGs及其功能注释信息有助于理解其对宿主细胞的影响,为后续开展VP1影响FMDV持续感染相关机制研究提供基础数据和理论支持。; 关键词转录组基因表达谱 FMDV 持续感染 VP1 差异表达基因; Keywords transcriptome gene expression profile FMDV persistent infection VP1 differ-entially expressed genes; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	三氯杀螨砜对斑马鱼胚胎的生态毒理效应	刘宝刘静张旭程杨艳黎美凤	《南方农业学报》北大核心	2025	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	猴痘病毒A23R蛋白的表达、纯化及其小鼠抗血清制备	王毅豪李名志贾梦乐杨领弟熊嘉琪王婷王宇刘树荣郭韫丽孔令保黎美凤	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2023	2	在线阅读下载PDF 职称材料
3	猴痘病毒E2L蛋白的表达、纯化及免疫原性评价	贾梦乐熊嘉琦杨领弟王毅豪孙静婷王婷黎美凤孔令保彭棋	《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心	2023	2	在线阅读下载PDF 职称材料
4	持续感染口蹄疫病毒VP1蛋白对细胞转录组的影响	杨黎刘萍韦美华柯雄锋刘丽清宋静静方莹唐欢孔令保辛秀	《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2022	1	在线阅读下载PDF 职称材料