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猪圆环病毒2型、3型、4型三重PCR检测方法的建立与初步应用 被引量：1
1
作者 梁惠平 吴虹瑾 +10 位作者 肖艳 曾庆华 刘琪 黄曼孜 李昕宇 陈翰卓 文姝寓 喻富伟 尹经毅 张俊杰 吴欢生 《生物灾害科学》 2025年第3期354-362,共9页
【目的】为了建立成本低且能同时快速检测猪圆环病毒2型(PCV2)、猪圆环病毒3型(PCV3)、猪圆环病毒4型(PCV4)的方法。【方法】根据PCV2、PCV3、PCV4各自的Rep基因组序列设计3对特异性引物,通过优化反应条件,建立了一种能同时检测上述3种... 【目的】为了建立成本低且能同时快速检测猪圆环病毒2型(PCV2)、猪圆环病毒3型(PCV3)、猪圆环病毒4型(PCV4)的方法。【方法】根据PCV2、PCV3、PCV4各自的Rep基因组序列设计3对特异性引物,通过优化反应条件,建立了一种能同时检测上述3种圆环病毒的三重PCR方法。【结果】建立的三重PCR方法对PCV2、PCV3、PCV4的基因组DNA均能高效扩增,对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)、猪细小病毒(PPV)、猪传染性胃肠炎病毒(TEGV)及猪塞内卡病毒(SVA)的核酸均无特异性扩增,特异性较强;对PCV2、PCV3、PCV4的重组质粒最低检测限分别为3.5×10^(3)拷贝/μL、5.6×10^(3)拷贝/μL、4.7×10^(3)拷贝/μL,与试验建立的单一PCR检测结果一致,具有较高的检测灵敏度。采用三重PCR技术检测,结果确认其中PCV2阳性率为64%(16/25),PCV3阳性率为32%(8/25),PCV4阳性率为40%(10/25);其中双重感染(PCV2/3、PCV2/4、PCV3/4)发生率均为8%(2/25),而三重共感染率为4%(1/25)。应用本试验的单一PCR引物进行复检,二者结果一致。【结论】三重PCR方法可以有效地快速同时检测PCV2/3/4,为检测猪圆环病毒混合感染及该病的流行病学调查提供了技术支持。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 猪圆环病毒3型 猪圆环病毒4型 三重PCR
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