胶体金免疫层析法快速检测腹泻性贝毒软海绵酸的研究 被引量：15

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作者 刘仁沿 梁玉波 +3 位作者 陈媛 许道艳 陈冰君 刘永健 《分析科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期31-34,共4页

腹泻性贝毒是一类分布较广的赤潮毒素,严重威胁到人类的健康和安全。本文用胶体金标记利用细胞融合技术制备的抗软海绵酸单克隆抗体,使用卵清蛋白合成高偶联比的包被抗原,以硝酸纤维素膜为载体,利用免疫层析技术原理,建立了快速检测软... 腹泻性贝毒是一类分布较广的赤潮毒素,严重威胁到人类的健康和安全。本文用胶体金标记利用细胞融合技术制备的抗软海绵酸单克隆抗体,使用卵清蛋白合成高偶联比的包被抗原,以硝酸纤维素膜为载体,利用免疫层析技术原理,建立了快速检测软海绵酸的免疫层析试纸条方法。方法检出限12 ng/mL(0.96纳克/条)。 展开更多

关键词 软海绵酸 单克隆抗体 免疫层析 胶体金

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胶体金免疫层析法定量检测猪肉中克伦特罗 被引量：19

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作者 李超辉 陈雪岚 +4 位作者 郭亮 许恒毅 刘文娟 赖卫华 熊勇华 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期167-172,共6页

建立了基于T/C比值的胶体金免疫层析法快速定量检测猪肉中克伦特罗残留的新方法。胶体金免疫层析试纸条的定量检测线性范围为0.1～1.5 ng/g,检测猪肉中克伦特罗残留的最低检测灵敏度为0.19 ng/g。比较了5种猪肉组织样本中克伦特罗的简... 建立了基于T/C比值的胶体金免疫层析法快速定量检测猪肉中克伦特罗残留的新方法。胶体金免疫层析试纸条的定量检测线性范围为0.1～1.5 ng/g,检测猪肉中克伦特罗残留的最低检测灵敏度为0.19 ng/g。比较了5种猪肉组织样本中克伦特罗的简便提取方法,其中采用0.02 mol/L,含2.8%NaCl的HCl溶液抽提猪肉样品2次的提取方案,克伦特罗的平均回收率达到76.7%,变异系数为7.4%。实际样本加标回收实验显示,加标量为0.5、1.0、2.0及3.0 ng/g时,胶体金试纸条检测回收率分别为(60.4±12.8)%,(70.24±4.2)%,(75.9±4.9)%,(71.1±5.0)%。与传统ELISA方法比对,结果显示2种方法具有较好的相关性(R2=0.9136)。以上实验结果证实,基于T/C比值法的胶体金免疫层析试纸条可用于猪肉组织样品中克伦特罗的快速及定量检测。 展开更多

关键词 克伦特罗 胶体金试纸条 猪肉

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胶体金免疫层析试纸条定量检测猪尿中克伦特罗 被引量：20

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作者 李超辉 罗薇 +3 位作者 徐波 刘文娟 许恒毅 熊勇华 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第12期114-118,共5页

目的:建立胶体金免疫层析试纸条快速、定量检测尿样中克伦特罗的方法。方法:采用正交设计获得克伦特罗胶体金试纸条最佳工艺条件,建立T/C比值法定量检测尿样中克伦特罗残留。结果:胶体金免疫层析试纸条检测尿样中克伦特罗的最低检测限0.... 目的:建立胶体金免疫层析试纸条快速、定量检测尿样中克伦特罗的方法。方法:采用正交设计获得克伦特罗胶体金试纸条最佳工艺条件,建立T/C比值法定量检测尿样中克伦特罗残留。结果:胶体金免疫层析试纸条检测尿样中克伦特罗的最低检测限0.22ng/mL;当尿液中克伦特罗质量浓度在0.1～2.0ng/mL范围内,胶体金免疫层析试纸条具有较好的线性关系且50%抑制质量浓度(IC50)为0.36ng/mL;加标回收实验结果表明,阴性尿样分别添加0.5、1.0、1.5ng/mL克伦特罗,试纸条检测的平均回收率为(102.4±7.8)%、(96.5±6.8)%以及(103.3±7.2)%。结论:成功建立了基于胶体金免疫层析试纸条定量检测尿样中克伦特罗的方法。 展开更多

关键词 免疫层析试纸条 克伦特罗 定量检测

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大肠杆菌O157:H7胶体金试纸条研制 被引量：18

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作者 黄岭芳 段霞 +3 位作者 陈媛 刘文娟 魏华 赖卫华 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第24期355-359,共5页

采用胶体金标记抗大肠杆菌O157:H7单克隆抗体(鼠源),通过将大肠杆菌O157:H7多克隆抗体和驴抗鼠抗体(二抗)喷涂于硝酸纤维素膜分别作为检测线和质控线,研制大肠杆菌O157:H7胶体金快速检测试纸条。通过优化实验,确定最佳条件为标记量16.8... 采用胶体金标记抗大肠杆菌O157:H7单克隆抗体(鼠源),通过将大肠杆菌O157:H7多克隆抗体和驴抗鼠抗体(二抗)喷涂于硝酸纤维素膜分别作为检测线和质控线,研制大肠杆菌O157:H7胶体金快速检测试纸条。通过优化实验,确定最佳条件为标记量16.8μg/mL、标记pH8.0、封闭剂PEG20000、检测时样品最佳pH7.0～7.5。对26株常见细菌交叉反应结果表明,该试纸条除与鼠伤寒沙门氏菌ATCC13311和金黄色葡萄球菌CMCC26003有轻微交叉反应外,与其他24株菌均无交叉反应。该试纸条灵敏度为104CFU/mL。用该试纸条检测大肠杆菌O157:H7操作简便、快捷、灵敏度高、特异性强。 展开更多

关键词 大肠杆菌O157:H7 胶体金 试纸条

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胶体金免疫层析法定量检测孔雀石绿 被引量：13

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作者 山珊 彭涛 +3 位作者 杨万春 刘春梅 熊勇华 赖卫华 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第16期160-163,共4页

基于竞争抑制反应原理,制备孔雀石绿胶体金免疫层析试纸条,通过胶体金读取仪,读取试纸条上检测线(T线)及质控线(C线)的吸光度,建立孔雀石绿免疫层析定量检测方法。使用胶体金读取仪在多个时间段对不同质量浓度的孔雀石绿标品进行检测。... 基于竞争抑制反应原理,制备孔雀石绿胶体金免疫层析试纸条,通过胶体金读取仪,读取试纸条上检测线(T线)及质控线(C线)的吸光度,建立孔雀石绿免疫层析定量检测方法。使用胶体金读取仪在多个时间段对不同质量浓度的孔雀石绿标品进行检测。以标品的不同质量浓度为横坐标,分别以T线吸光度、T/C值和T/(T+C)值为纵坐标建立3种检测模式。结果表明:检测时间为10min时,T线吸光度与标品质量浓度关系曲线的R2=0.9438,变异系数为1.6%～8.2%;T/C值与标准品质量浓度关系曲线的R2=0.9811,变异系数为0.4%～3.7%;T/(T+C)值与标准品质量浓度关系曲线的R2=0.9916,变异系数为0.3%～2.2%,和其前两种模型比较,最后一种方法的线性关系好,变异系数小,检测灵敏度为3μg/L,是一种较为理想的检测模型。 展开更多

关键词 孔雀石绿 免疫层析法 定量检测方法

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三聚氰胺胶体金免疫层析方法的建立 被引量：7

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作者 夏骏 赖卫华 +5 位作者 涂继平 徐国茂 张新宇 冯荣华 衷平海 何小立 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第20期139-143,共5页

建立了一种快速检测三聚氰胺的胶体金试纸条的方法,其中包括胶体金的制备、金标抗体的制备、试纸条的组装和测试等步骤。结果表明:三聚氰胺快速检测试纸条的检测限为10 g/L,检测时间为10min,可实现原料乳不经处理直接上样,是一种简便准... 建立了一种快速检测三聚氰胺的胶体金试纸条的方法,其中包括胶体金的制备、金标抗体的制备、试纸条的组装和测试等步骤。结果表明:三聚氰胺快速检测试纸条的检测限为10 g/L,检测时间为10min,可实现原料乳不经处理直接上样,是一种简便准确的快速检测方法。 展开更多

关键词 胶体金 三聚氰胺 免疫层析 检测

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胶体金试纸条快速检测食品中磺胺二甲基嘧啶残留 被引量：12

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作者 林晓丽 饶辉 +3 位作者 熊勇华 陈媛 刘文娟 赖卫华 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第24期366-369,共4页

目的:旨在建立一种快速、简便的针对磺胺二甲基嘧啶残留的检测方法。方法:应用竞争抑制免疫层析原理,研制磺胺二甲基嘧啶胶体金试纸条。结果:该试纸条检测限为10ng/mL、检测时间5min,与其他磺胺类药物交叉反应小,可用于多种食品样本的检... 目的:旨在建立一种快速、简便的针对磺胺二甲基嘧啶残留的检测方法。方法:应用竞争抑制免疫层析原理,研制磺胺二甲基嘧啶胶体金试纸条。结果:该试纸条检测限为10ng/mL、检测时间5min,与其他磺胺类药物交叉反应小,可用于多种食品样本的检测,且样本检测限为100μg/kg。结论:该方法操作简便、灵敏度高且特异性强,可实现对食品样品中磺胺二甲基嘧啶残留的快速检测。 展开更多

关键词 磺胺二甲基嘧啶 胶体金 试纸条 快速检测

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赭曲霉毒素A无毒体系胶体金试纸条的研制及与传统胶体金试纸条的比较 被引量：14

8

作者 赖卫华 许杨 +2 位作者 熊勇华 陈媛 刘文娟 《食品科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期465-468,共4页

本实验介绍了赭曲霉毒素A无毒体系胶体金试纸条的研制方法,其中包括胶体金的生产、金标抗体的制备、无毒体系试纸条的组装等步骤。所制备的赭曲霉毒素A无毒体系胶体金试纸条和传统的胶体金试纸条进行了比较,测试结果表明,赭曲霉毒素A无... 本实验介绍了赭曲霉毒素A无毒体系胶体金试纸条的研制方法,其中包括胶体金的生产、金标抗体的制备、无毒体系试纸条的组装等步骤。所制备的赭曲霉毒素A无毒体系胶体金试纸条和传统的胶体金试纸条进行了比较,测试结果表明,赭曲霉毒素A无毒体系胶体金试纸条的检测限和检测时间与传统的胶体金试纸条相同,适合于赭曲霉毒素A现场筛查之用。 展开更多

关键词 赭曲霉毒素A 胶体金:试纸条 模拟表位肽

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应用胶体金试纸条快速检测赭曲霉毒素A的研究 被引量：64

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作者 赖卫华 熊勇华 +1 位作者 陈高明 许杨 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第5期204-207,共4页

本文介绍了一种快速检测赭曲霉毒素A的胶体金试纸条的研制方法,其中包括胶体金的生产、金标抗体的制备、试纸条的组装和测试等步骤。测试结果表明赭曲霉毒素A快速检测试纸条的检测限为10ng/ml,检测时间为10min,加上使用方便,经济适用,... 本文介绍了一种快速检测赭曲霉毒素A的胶体金试纸条的研制方法,其中包括胶体金的生产、金标抗体的制备、试纸条的组装和测试等步骤。测试结果表明赭曲霉毒素A快速检测试纸条的检测限为10ng/ml,检测时间为10min,加上使用方便,经济适用,使之适合于赭曲霉毒素A现场快速检测之用。 展开更多

关键词 赭曲霉毒素A 胶体金 试纸条

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盐酸克仑特罗ELISA试剂盒的研制 被引量：6

10

作者 李鹏 赖卫华 +3 位作者 陈雪岚 陈媛 金晶 田瑞丽 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第12期296-300,共5页

在间接竞争酶联免疫吸附法的基础上,研制了一种可以检测尿样或食品中盐酸克仑特罗的试剂盒。ELISA检测方法的各个影响因素均通过实验进行了优化。该试剂盒具有良好的灵敏度,半抑制率(IC50)为0.6ng/ml,该抗体与肾上腺素等结构类似物的交... 在间接竞争酶联免疫吸附法的基础上,研制了一种可以检测尿样或食品中盐酸克仑特罗的试剂盒。ELISA检测方法的各个影响因素均通过实验进行了优化。该试剂盒具有良好的灵敏度,半抑制率(IC50)为0.6ng/ml,该抗体与肾上腺素等结构类似物的交叉反应率均小于0.3%,回收率为90%～104%,批内变异系数小于6%,批间变异系数小于10%,试剂盒在12个月保存期内稳定。可用于盐酸克仑特罗的快速定量检测。 展开更多

关键词 盐酸克仑特罗 酶联免疫吸附法 试剂盒

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黄曲霉毒素M_1模拟表位的筛选和鉴定 被引量：8

11

作者 熊啸 熊勇华 涂祖新 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第7期339-341,共3页

目的:从噬菌体表面7肽库中筛选出黄曲霉毒素M1抗原的模拟表位。方法与结果:经过4轮淘选,筛选获得了4个与抗AFM1单克隆抗体具有较高亲和性的阳性噬菌体克隆,编号为A1、A2、A3和A4。间接竞争抑制实验结果表明:当噬菌体滴度为2.5×1010... 目的:从噬菌体表面7肽库中筛选出黄曲霉毒素M1抗原的模拟表位。方法与结果:经过4轮淘选,筛选获得了4个与抗AFM1单克隆抗体具有较高亲和性的阳性噬菌体克隆,编号为A1、A2、A3和A4。间接竞争抑制实验结果表明:当噬菌体滴度为2.5×1010CFU时,噬菌体A1、A2、A3和A4对AFM1与抗AFM1单克隆抗体结合的抑制率分别为41.8%、40.6%、36.7%和37.6%。测定其核酸序列,其中A1、A2为同一克隆,氨基酸序列为LTSFPRH;A3、A4为同一克隆,氨基酸序列为MAPSSWR。结论:从噬菌体7肽库中筛选到2个AFM1的理想模拟表位。 展开更多

关键词 黄曲霉毒素M1 模拟表位 噬菌体展示肽库

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