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基因工程抗体的筛选、表达及其在食品微生物污染现场即时检测中的应用 被引量:3
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作者 赖妍 孙秀兰 +1 位作者 张银志 孙嘉笛 《食品科学》 北大核心 2025年第12期325-338,共14页
食源性致病因子如生物毒素、致病菌和食源性病毒等广泛存在于食品中,对人类健康构成严重威胁。这些污染物传播范围广、难以控制,需要进行严密监控,开发快速、高通量、简单、经济的检测方法是替代传统仪器检测方法的最佳选择。在这一背景... 食源性致病因子如生物毒素、致病菌和食源性病毒等广泛存在于食品中,对人类健康构成严重威胁。这些污染物传播范围广、难以控制,需要进行严密监控,开发快速、高通量、简单、经济的检测方法是替代传统仪器检测方法的最佳选择。在这一背景下,免疫测定法作为一种广泛应用的检测手段,其关键元件——抗体的发展显得尤为重要。基因工程抗体作为一种新兴的识别元件,在短短数十年间迅速崛起,以其低成本、高效价、易于获取的显著优势,逐渐取代传统抗体,为现场免疫检测带来了新的希望。本文综述了基因工程抗体的制备表达系统,并重点介绍了基于基因工程抗体建立的、针对食品中微生物污染的即时检测方法。同时,概述了基因工程抗体在食品中微生物污染检测领域的研究与应用趋势,强调了其在现场检测领域的重要地位和广阔前景。 展开更多
关键词 基因工程抗体 微生物污染 免疫检测 即时检测 食品安全
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可控分子量透明质酸的生物合成研究进展 被引量:2
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作者 肖森 胡立涛 +5 位作者 石智诚 王发银 余思婷 堵国成 陈坚 康振 《合成生物学》 北大核心 2025年第2期445-460,共16页
透明质酸(hyaluronic acid,HA)是一种在化妆品、食品和医疗领域广泛应用的天然直链酸性黏多糖。根据分子量大小,HA可分为高、中、低三类,不同分子量的HA具有不同的功能和应用场景。随着微生物发酵技术取代传统动物组织提取法,HA工业化... 透明质酸(hyaluronic acid,HA)是一种在化妆品、食品和医疗领域广泛应用的天然直链酸性黏多糖。根据分子量大小,HA可分为高、中、低三类,不同分子量的HA具有不同的功能和应用场景。随着微生物发酵技术取代传统动物组织提取法,HA工业化生产取得了巨大进步。然而,天然HA合成菌株兽疫链球菌的缺点(如潜在致病性以及难以分子改造),限制了不同分子量HA的生物合成研究。近年来,随着特定分子量HA需求的不断增长,代谢工程和合成生物技术已广泛应用于HA生物合成与分子量调控。本文首先分析了中高分子量HA合成的限制性因素,重点讨论了HA前体合成途径的基因调控及竞争支路的弱化。其次,探讨了HA合酶、前体供应和发酵条件对超高分子量HA合成的影响。最后,总结了低分子量HA的制备策略,包括物理化学法、酶法和微生物直接发酵法。还针对HA的生物合成与分子量调控面临的挑战——高分子量HA分子量不够高、中高分子量HA合成能力弱和低分子量HA分子量可控性差三方面展开系统性综述,加强对HA生物合成与分子量调控策略的理解,助力实现可控分子量HA的高效生物合成。 展开更多
关键词 透明质酸 分子量 生物合成 代谢工程 合成生物学
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高支化修饰木薯淀粉及产物的理化性质研究
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作者 吴昆蓉 李才明 +4 位作者 李兆丰 张宇飞 顾正彪 班宵逢 孔昊存 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期21-30,共10页
木薯淀粉在食品工业中应用广泛,但通常需要经过改性才可用于食品中。相较于传统的改性手段,酶法改性因环保安全、副产物少、产物得率高等优点成为淀粉领域的研究热点。采用来源于极端嗜热菌Rhodothermus obamensis STB05(R.obamensis ST... 木薯淀粉在食品工业中应用广泛,但通常需要经过改性才可用于食品中。相较于传统的改性手段,酶法改性因环保安全、副产物少、产物得率高等优点成为淀粉领域的研究热点。采用来源于极端嗜热菌Rhodothermus obamensis STB05(R.obamensis STB05)的淀粉分支酶(GBE)对木薯淀粉进行高支化修饰,并分析了高支化修饰对木薯淀粉分子结构、稳定性及体外消化性能等理化性质的影响。结果表明,在酶添加量为100 U/g、反应时间为12 h的条件下对木薯淀粉进行改性,所得产物中α-1,6糖苷键摩尔分数达到7.85%,比天然木薯淀粉增加152.41%;木薯淀粉分子中长链比例降低,短链比例上升,平均链长降低。木薯淀粉糊液的稳定性研究表明,经高支化修饰后,木薯淀粉糊的溶解度、凝沉性、透明度稳定性及冻融稳定性等性质均有不同程度的改善,且体外消化性能提高。该研究结果为木薯淀粉生物改性及其工业化应用提供了理论依据。 展开更多
关键词 木薯淀粉 高支化修饰 分子结构 稳定性 消化性能
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响应面法优化负压原位碱度蒸汽汽提脱氨处理兰炭废水的研究 被引量:1
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作者 杨天硕 肖小兰 +2 位作者 阮文权 傅鑫坤 王雄敏 《煤炭转化》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期79-88,共10页
采用负压原位碱度蒸汽汽提脱氨工艺处理兰炭废水,考察了蒸汽量、进水流速、pH三个单因素对氨氮去除率的影响,通过响应面模型对三个因素的交互作用进行了研究。结果表明:在响应范围内,三个因素对氨氮的去除都具有显著影响;三个因素按对... 采用负压原位碱度蒸汽汽提脱氨工艺处理兰炭废水,考察了蒸汽量、进水流速、pH三个单因素对氨氮去除率的影响,通过响应面模型对三个因素的交互作用进行了研究。结果表明:在响应范围内,三个因素对氨氮的去除都具有显著影响;三个因素按对氨氮去除率的影响由大到小依次为蒸汽量、进水流速、pH,蒸汽量和进水流速、蒸汽量和pH、进水流速和pH之间的交互作用的显著性依次降低;通过响应面法确定的去除氨氮的最佳条件为蒸汽量0.75 kg/h、进水流速2.43 L/h、pH=8.96,氨氮去除率的预测值为96.53%,通过重复实验得到该条件下氨氮去除率的实验值为95.7%,实验值与预测值吻合良好,决定系数R^(2)为0.9544,说明该模型能解释95%的响应值变化,且无失拟因素存在;此外,在负压原位碱度蒸汽汽提脱氨过程中对挥发酚和COD也有一定的去除效果。 展开更多
关键词 兰炭废水 氨氮 负压原位碱度脱氨 汽提脱氨 响应面法
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MgCl_(2)改性制备酒糟稻壳生物炭及对沼液氨氮吸附性能研究
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作者 肖小兰 潘亭羽 +3 位作者 王雄敏 傅鑫坤 杨天硕 阮文权 《环境科学与技术》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期33-40,共8页
文章以浓香型酒糟稻壳为原材料、MgCl_(2)为改性试剂,在炭化温度为700℃、MgCl_(2)浓度0.20 mol/L时制备出镁改性生物炭。通过控制吸附过程中生物炭投加量为10 g/L及吸附溶液初始pH为12,获得了最大的氨氮吸附量和氨氮去除率,分别为43.59... 文章以浓香型酒糟稻壳为原材料、MgCl_(2)为改性试剂,在炭化温度为700℃、MgCl_(2)浓度0.20 mol/L时制备出镁改性生物炭。通过控制吸附过程中生物炭投加量为10 g/L及吸附溶液初始pH为12,获得了最大的氨氮吸附量和氨氮去除率,分别为43.59 mg/g和65.64%。生物炭的表征结果表明氯化镁溶液浸渍可以提高生物炭的比表面积,改善其孔隙结构,并在生物炭表面负载一层含镁化合物的结晶,有效提高了生物炭对氨氮的吸附效果。通过模型拟合实验数据以探究其吸附行为,其中准二级动力学模型比准一级动力学模型更符合镁改性酒糟稻壳生物炭对氨氮的吸附过程,表明其吸附过程以化学吸附为主。等温模型中Langmuir模型的R2略高于Freundlich模型,Langmuir模型所得最大理论吸附量为106.99 mg/g,且两个模型的拟合都说明了该生物炭对氨氮的吸附过程为有利吸附。 展开更多
关键词 酒糟稻壳 生物炭 氨氮 吸附
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黑曲霉FS10菌株发酵对玉米胚芽粕中玉米赤霉烯酮脱除及品质影响
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作者 王进瑶 杨阳 +3 位作者 叶永丽 吴梦影 纪剑 孙秀兰 《中国粮油学报》 北大核心 2025年第6期30-37,共8页
为有效脱除玉米胚芽粕中广泛存在的玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEN)毒素并改善产品品质,本研究以黑曲霉菌株FS10为发酵菌脱除玉米胚芽粕中ZEN,考察了FS10孢子接种量、发酵温度、发酵时间、料水比对ZEN脱除率的影响,并分析发酵前后产品风... 为有效脱除玉米胚芽粕中广泛存在的玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEN)毒素并改善产品品质,本研究以黑曲霉菌株FS10为发酵菌脱除玉米胚芽粕中ZEN,考察了FS10孢子接种量、发酵温度、发酵时间、料水比对ZEN脱除率的影响,并分析发酵前后产品风味和营养成分的变化。结果表明,FS10脱除玉米胚芽粕中ZEN的最佳条件为接种质量分数15%、发酵温度30℃、发酵时间4 d、料水比1∶2 g/mL,脱除率为61.85%。固相微萃取-气相色谱-质谱法分析显示,发酵后玉米胚芽粕中的挥发性物质种类明显增加,包括具有独特香味的3-辛酮、异戊醛等物质。发酵后,玉米胚芽粕总蛋白、粗脂肪和总氨基酸质量分数分别提高了27.99%、8.02%、27.96%,粗纤维质量分数从12.21%降低到9.49%。黑曲霉FS10菌株发酵对玉米胚芽粕中的ZEN具有较高的脱除能力,且可改善胚芽粕风味与营养。 展开更多
关键词 黑曲霉FS10 玉米胚芽粕 玉米赤霉烯酮 脱毒 挥发性化合物
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耐盐产蛋白酶菌株的筛选及在肠衣废水厌氧处理中的应用
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作者 张庆元 黄振兴 +5 位作者 耿小琴 肖小兰 任洪艳 谢利娟 赵明星 阮文权 《环境化学》 北大核心 2025年第9期2526-2534,共9页
肠衣废水是一种高盐高蛋白废水,在采用厌氧生物处理工艺时高盐胁迫会抑制微生物活性,从而影响有机质降解效果.为了提高肠衣废水的厌氧生物处理效能,首先采用耐盐适应性进化策略构建出能够耐受3.2%盐度的厌氧产甲烷菌群(进化菌群),然后,... 肠衣废水是一种高盐高蛋白废水,在采用厌氧生物处理工艺时高盐胁迫会抑制微生物活性,从而影响有机质降解效果.为了提高肠衣废水的厌氧生物处理效能,首先采用耐盐适应性进化策略构建出能够耐受3.2%盐度的厌氧产甲烷菌群(进化菌群),然后,从进化菌群中筛选得到一株高耐盐蛋白酶产生菌,命名为原玻璃蝇节杆菌(Arthrobacter protophormiae)A1,其能够在8%盐度下生长并分泌蛋白酶.原玻璃蝇节杆菌A1与进化菌群的复配能够解除高盐胁迫下蛋白质水解受抑问题.在处理3.6%盐度的实际肠衣废水时,耐盐复配菌群的蛋白质降解率和有机质去除率分别达到了93.2%和75.8%.此外,复配菌群还具有一定的耐盐冗余度,在肠衣废水处理过程中展现出较好的稳定性.因此,原玻璃蝇节杆菌A1可为强化肠衣废水等高盐高蛋白废水的厌氧生物处理提供有效的菌种资源,能够显著降低处理成本,具有潜在的应用价值. 展开更多
关键词 原玻璃蝇节杆菌 耐盐蛋白酶产生菌 肠衣废水 适应性进化 厌氧生物处理
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L-丝氨酸生产菌株的高通量筛选及其发酵优化
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作者 王庚 张晓梅 +1 位作者 史劲松 许正宏 《食品与发酵工业》 北大核心 2025年第18期1-7,共7页
L-丝氨酸在医药、食品和化工等领域应用广泛,然而L-丝氨酸是目前工业化生产难度较大的氨基酸之一。该文以实验室前期构建的产L-丝氨酸的谷氨酸棒杆菌A36-AB为出发菌株,利用常温常压等离子体诱变(atmospheric and room temperature plasm... L-丝氨酸在医药、食品和化工等领域应用广泛,然而L-丝氨酸是目前工业化生产难度较大的氨基酸之一。该文以实验室前期构建的产L-丝氨酸的谷氨酸棒杆菌A36-AB为出发菌株,利用常温常压等离子体诱变(atmospheric and room temperature plasma,ARTP)结合高通量筛选,获得突变菌株A36-AB-pDser-6。突变菌株前期生长迅速,60 h时L-丝氨酸产量为15.60 g/L。进一步利用响应面法优化突变菌株发酵培养基,L-丝氨酸产量达到29.23 g/L,生产强度为0.48 g/(L·h),生产强度较出发菌株[0.36 g/(L·h)]提高了33%;发酵周期从120 h缩短至60 h。对出发菌株及高产突变株进行全基因组测序及比较分析,发现突变株存在12个单碱基突变(single nucleotide variant,SNV)和15个插入缺失突变(insertions and deletion,InDel)。其中糖酵解途径中的关键酶葡萄糖-6-磷酸异构酶(由pgi基因编码)发生较多突变,这可能是由于突变菌株发酵周期缩短。该研究为利用谷氨酸棒杆菌产L-丝氨酸的工业化生产奠定了基础。 展开更多
关键词 谷氨酸棒杆菌 L-丝氨酸 常压室温等离子体诱变 高通量筛选 响应面法
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大肠杆菌全细胞催化合成莱鲍迪苷M菌株的构建及发酵优化
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作者 王晓静 顾正华 +5 位作者 李默影 朱瑞 辛瑜 郭自涛 郭忠鹏 张梁 《食品与发酵工业》 北大核心 2025年第21期1-9,共9页
莱鲍迪苷M(rebaudioside M,Reb M)是一种天然的稀有甜味剂,以其安全性、高甜度和较少的回苦味而受到关注。从甜叶菊中提取莱鲍迪苷M的传统方法成本高且产量低。该研究采用大肠杆菌进行全细胞催化合成Reb M,避免了复杂的酶纯化步骤,并适... 莱鲍迪苷M(rebaudioside M,Reb M)是一种天然的稀有甜味剂,以其安全性、高甜度和较少的回苦味而受到关注。从甜叶菊中提取莱鲍迪苷M的传统方法成本高且产量低。该研究采用大肠杆菌进行全细胞催化合成Reb M,避免了复杂的酶纯化步骤,并适合工业化规模生产。该研究通过构建大肠杆菌底盘菌株并优化其发酵过程,实现了Reb M的高效合成。通过使用优化后的酶UGT76G1(突变T284S M88L L200A)和UGT91C1(突变F208M F379A),并引入蔗糖合酶atuSUS1以增强二磷酸尿苷-葡萄糖循环。同时,通过敲除araA(L-阿拉伯糖异构酶)和ushA(UDP糖水解酶)、过表达galU(葡萄糖-1-磷酸尿苷转移酶)并添加促溶标签XXA改造代谢途径,构建了出发菌株。通过发酵优化,确定最佳发酵条件为:在37℃下培养4 h后,加入0.1 mmol/L IPTG和15 g/L L-阿拉伯糖,在16℃下诱导16 h。在此条件下,出发菌株在42℃下反应24 h后,Reb M产量达到24.318 g/L,底物转化率达到91%,较初始条件提高了7.56倍。该研究成果为利用大肠杆菌生产莱鲍迪苷M提供了重要的指导。 展开更多
关键词 莱鲍迪苷M 重组大肠杆菌 全细胞催化 发酵优化
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琥珀酸钠对高脂饮食小鼠代谢和肠道菌群的调节作用 被引量:3
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作者 宋彪章 曹宏 +5 位作者 赵丽彤 张烽 闫继爱 马雪莹 李丹 杨菊 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期2016-2023,2073,共9页
研究不同剂量琥珀酸钠(sodium succinate,SS)对高脂饮食小鼠代谢指标及肠道菌群的改善作用。将32只6周龄C57BL/6J小鼠高脂饮食8周诱导小鼠肥胖模型后,随机分为4组,即高脂饮食组、低剂量、中剂量、高剂量琥珀酸钠组。通过定期记录体重,... 研究不同剂量琥珀酸钠(sodium succinate,SS)对高脂饮食小鼠代谢指标及肠道菌群的改善作用。将32只6周龄C57BL/6J小鼠高脂饮食8周诱导小鼠肥胖模型后,随机分为4组,即高脂饮食组、低剂量、中剂量、高剂量琥珀酸钠组。通过定期记录体重,代谢实验、检测血清血脂四项和促炎细胞因子水平、组织学分析、16S rRNA基因测序等方法来研究琥珀酸钠对高脂饮食小鼠代谢和肠道菌群的影响。结果显示,琥珀酸钠可以减缓高脂饮食小鼠体重的增加,改善血脂和炎症水平、减少附睾白色脂肪细胞的扩张以及棕色脂肪白色化,并且调节了肠道菌群的结构和组成。本研究表明琥珀酸钠通过提高高脂饮食小鼠的呼吸代谢作用增加能量消耗,提高Akkermansia、Peptostreptococcaceae、Allobaculum的相对丰度,降低Lachnospiraceae、Ileibacterium、Desulfovibrionaceae的相对丰度来改善高脂饮食小鼠的代谢紊乱和体重增加。 展开更多
关键词 琥珀酸钠 高脂饮食 呼吸 促炎细胞因子 肠道菌群
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