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研究生基因工程实验课程教学分析与思考
1
作者
罗刚
王学杨
王俊
《黑龙江动物繁殖》
2022年第2期55-59,共5页
基因工程是一门系统性和实操性很强的学科之一,实验课是理论课的延伸,也是生命科学人才培养的重要环节。面对研究型人才培养需求的增加,文章通过设计实验课程内容,选用不同的教学方法和优化课程评价体系三个方面改进实验课程的教学方案...
基因工程是一门系统性和实操性很强的学科之一,实验课是理论课的延伸,也是生命科学人才培养的重要环节。面对研究型人才培养需求的增加,文章通过设计实验课程内容,选用不同的教学方法和优化课程评价体系三个方面改进实验课程的教学方案,以达到激发学生科研兴趣、强化学生实验操作技能、培养学生系统性分析问题和解决问题能力及创新思维,提高研究生培养质量的目的。
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关键词
研究生
基因工程实验
教学
改革
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职称材料
对丝腺细胞因子SGF-1具有调控作用的家蚕miRNAs功能研究
被引量:
1
2
作者
王欣
陈晨
+4 位作者
范洋洋
谢雨辰
钱平
唐顺明
沈兴家
《江苏农业科学》
北大核心
2016年第3期53-58,共6页
为了研究家蚕miRNAs对丝腺细胞因子SGF-1表达的调控作用,以SGF-1为靶基因,利用生物信息学软件RNAhybrid和RNA22预测对SGF-1具有潜在调控作用的候选家蚕miRNAs,经茎环PCR鉴定后分别构建重组表达载体,在细胞水平研究家蚕miRNAs的功能。结...
为了研究家蚕miRNAs对丝腺细胞因子SGF-1表达的调控作用,以SGF-1为靶基因,利用生物信息学软件RNAhybrid和RNA22预测对SGF-1具有潜在调控作用的候选家蚕miRNAs,经茎环PCR鉴定后分别构建重组表达载体,在细胞水平研究家蚕miRNAs的功能。结果表明,转染了bmo-miR-305*重组质粒组的luc荧光素酶活性比未转染时极显著下调(P<0.01);转染了bmo-miR-3327*重组质粒组的luc荧光素酶活性比未转染时极显著下调(P<0.01);再各自转染了inhibitors后荧光蛋白表达量均上调(P<0.05)。说明SGF-1 3'UTR上存在bmo-miR-305*和bmo-miR-3327*的结合位点,且bmo-miR-305*和bmo-miR-3327*对SGF-1的转录后表达具有一定抑制作用。
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关键词
家蚕
MIRNAS
丝腺转录因子
SGF-1
功能鉴定
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职称材料
家蚕己糖激酶基因进化分析及其多转录本在胚胎早期发育过程中的表达特性
被引量:
3
3
作者
许瑾
邵云华
+5 位作者
黄静怡
沈广胜
朱娟
王梅仙
唐顺明
沈兴家
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第6期1701-1708,共8页
【目的】明确家蚕(Bombyx mori)二化性品系胚胎早期发育过程中己糖激酶基因(BmHK)不同转录本的表达特性,为深入探究BmHK基因各转录本的生物学功能及揭示其在家蚕胚胎早期发育中的作用机制提供理论依据。【方法】从NCBI检索并下载家蚕等1...
【目的】明确家蚕(Bombyx mori)二化性品系胚胎早期发育过程中己糖激酶基因(BmHK)不同转录本的表达特性,为深入探究BmHK基因各转录本的生物学功能及揭示其在家蚕胚胎早期发育中的作用机制提供理论依据。【方法】从NCBI检索并下载家蚕等12种昆虫的HK氨基酸序列,采用MEGA 7.0的邻接法(NJ)构建基于HK氨基酸序列相似性的系统发育进化树。以家蚕二化性品系秋丰活化越年蚕卵(丙2胚胎)为材料,分别制备非滞育命运卵(ND)、滞育命运卵(DD)和即时浸酸卵(IA),采用实时荧光定量PCR检测BmHK基因各转录本在家蚕二化性品系胚胎早期发育过程中的表达特性。【结果】BmHK基因属于HSP70-actin家族,存在4个不同的转录本,其长度分别为4610、4608、2818和1520 bp,依次命名为BmHK-a、BmHK-b、BmHK-c和BmHK-d。BmHK-a在3种蚕卵胚胎早期发育过程中整体上呈先升高后降低的变化趋势,且各时间点均表现为IA蚕卵>ND蚕卵>DD蚕卵,IA蚕卵中的BmHK-a相对表达量于发育2 h达峰值,在ND蚕卵和DD蚕卵中于发育48 h达峰值,此后其表达快速下调,至发育96 h均处于较低水平;BmHK-b在3种蚕卵中的表达水平整体上表现为IA蚕卵>ND蚕卵>DD蚕卵,3种蚕卵中的BmHK-b相对表达量变化趋势基本一致,均随发育时间推移呈逐渐上升趋势;BmHK-c在3种蚕卵中的表达差异明显,初产蚕卵中已有较高的表达水平,受精后迅速升高,至发育72 h后BmHK-c在3种蚕卵中的相对表达量再次升高;BmHK-d在3种蚕卵中的相对表达量整体上呈先升高后降低的变化趋势,且各时间点均表现为ND蚕卵>IA蚕卵>DD蚕卵,但IA蚕卵中BmHK-d表达峰值出现的时间早于DD蚕卵和ND蚕卵。【结论】BmHK-a和BmHK-d主要在家蚕胚胎早期发育(产卵或浸酸后3 d)过程中发挥重要作用;BmHK-b虽然也参与家蚕胚胎早期发育过程,但不是主要的糖代谢相关酶;BmHK-c与家蚕胚胎早期发育关系密切,通过糖酵解为胚胎发育提供能量。
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关键词
家蚕
己糖激酶(HK)
转录本
滞育
糖酵解
胚胎早期发育
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职称材料
家蚕卵形指数对孵化率的影响及孵化相关基因表达分析
被引量:
2
4
作者
王雪珍
徐娇
+3 位作者
王闪闪
浦月霞
沈兴家
唐顺明
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第12期3109-3115,共7页
[目的]分析家蚕卵形指数对孵化率的影响规律,以及孵化酶基因(BmHEⅠ和BmHEⅡ)、几丁质酶基因(Chitinase)和周期蛋白基因(Period)在不同卵形间的表达规律,为阐明家蚕卵形指数与孵化率的相关性及其分子机理打下基础。[方法]调查家蚕Nistar...
[目的]分析家蚕卵形指数对孵化率的影响规律,以及孵化酶基因(BmHEⅠ和BmHEⅡ)、几丁质酶基因(Chitinase)和周期蛋白基因(Period)在不同卵形间的表达规律,为阐明家蚕卵形指数与孵化率的相关性及其分子机理打下基础。[方法]调查家蚕Nistari品种野生型正常形品种(Nistari+)及其新突变体纺锤形品种(Nistari-)的卵形指数、孵化率、受精率和转青死卵率,分析其卵形指数与孵化率的相关性;并通过实时荧光定量PCR检测蚕卵胚胎发育后期孵化相关基因的表达情况。[结果lNistari+蚕卵的平均卵形指数为1.26,极显著低于Nistari-蚕卵(1.73)(P<0.01,下同);孵化率为96.22%,极显著高于Nistari-蚕卵(51.33%)。当Nistari+蚕卵的卵形指数为1.24~1.25时,其孵化率(97.39%)和受精率(98.84%)均最高,转青死卵率最低(2.61%);而Nistari-蚕卵的卵形指数为1.77~1.81时,其孵化率(56.52%)和受精率(74.87%)均最高,转青死卵率最低(43.48%)。相关分析结果表明,Nistari蚕卵孵化率、受精率和转青死卵率与卵形指数存在一定的相关性,且受卵形指数影响。在蚕卵胚胎发育后期(孵化前),Nistari+蚕卵的BmHEⅠ、BmHEⅡ、Chitinase和Period基因大量表达,对应的相对表达量显著(P<0.05)或极显著高于NISTAR-蚕卵。[结论]家蚕Nistari品种的卵形指数与孵化率存在一定相关性,而BmHEⅠ、BmHEⅡ、Chitinase和Period基因的表达差异是导致Nistari-蚕卵与Nistari+蚕卵孵化率差异的分子基础。
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关键词
家蚕
Nistari品种
卵形指数
孵化率
孵化相关基因
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职称材料
题名
研究生基因工程实验课程教学分析与思考
1
作者
罗刚
王学杨
王俊
机构
江苏科技大学生物技术学院/江苏省蚕桑生物学与生物技术重点实验室
出处
《黑龙江动物繁殖》
2022年第2期55-59,共5页
基金
全国农业专业学位研究生教育指导委员会2019年研究生教育管理重点课题“助力蚕桑产业精准扶贫的农业硕士校所政企协同培养模式研究”(2019-NYZD-05)
江苏科技大学教改项目“导师制下‘滚动式’培养模式创新研究”(XJG2021030)。
文摘
基因工程是一门系统性和实操性很强的学科之一,实验课是理论课的延伸,也是生命科学人才培养的重要环节。面对研究型人才培养需求的增加,文章通过设计实验课程内容,选用不同的教学方法和优化课程评价体系三个方面改进实验课程的教学方案,以达到激发学生科研兴趣、强化学生实验操作技能、培养学生系统性分析问题和解决问题能力及创新思维,提高研究生培养质量的目的。
关键词
研究生
基因工程实验
教学
改革
Keywords
postgraduates
experiment of Genetic Engineering
teaching
reform
分类号
G643 [文化科学—高等教育学]
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职称材料
题名
对丝腺细胞因子SGF-1具有调控作用的家蚕miRNAs功能研究
被引量:
1
2
作者
王欣
陈晨
范洋洋
谢雨辰
钱平
唐顺明
沈兴家
机构
江苏科技大学生物技术学院/江苏省蚕桑生物学与生物技术重点实验室
中国农业科
学院
蚕业研究所
出处
《江苏农业科学》
北大核心
2016年第3期53-58,共6页
基金
国家自然科学基金(编号:31172266
31402143)
江苏省普通高校研究生科研创新计划(编号:CXZZ12_0726)
文摘
为了研究家蚕miRNAs对丝腺细胞因子SGF-1表达的调控作用,以SGF-1为靶基因,利用生物信息学软件RNAhybrid和RNA22预测对SGF-1具有潜在调控作用的候选家蚕miRNAs,经茎环PCR鉴定后分别构建重组表达载体,在细胞水平研究家蚕miRNAs的功能。结果表明,转染了bmo-miR-305*重组质粒组的luc荧光素酶活性比未转染时极显著下调(P<0.01);转染了bmo-miR-3327*重组质粒组的luc荧光素酶活性比未转染时极显著下调(P<0.01);再各自转染了inhibitors后荧光蛋白表达量均上调(P<0.05)。说明SGF-1 3'UTR上存在bmo-miR-305*和bmo-miR-3327*的结合位点,且bmo-miR-305*和bmo-miR-3327*对SGF-1的转录后表达具有一定抑制作用。
关键词
家蚕
MIRNAS
丝腺转录因子
SGF-1
功能鉴定
分类号
S881.2 [农业科学—特种经济动物饲养]
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
家蚕己糖激酶基因进化分析及其多转录本在胚胎早期发育过程中的表达特性
被引量:
3
3
作者
许瑾
邵云华
黄静怡
沈广胜
朱娟
王梅仙
唐顺明
沈兴家
机构
江苏科技大学生物技术学院/江苏省蚕桑生物学与生物技术重点实验室
杭州市农业农村局
蚕桑
技术
推广总站
中国农业科
学院
蚕业研究所/农业农村部
蚕桑
遗传改良
重点
实验室
出处
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第6期1701-1708,共8页
基金
国家自然科学基金项目(31672490)
江苏省自然科学基金项目(BK20191226)。
文摘
【目的】明确家蚕(Bombyx mori)二化性品系胚胎早期发育过程中己糖激酶基因(BmHK)不同转录本的表达特性,为深入探究BmHK基因各转录本的生物学功能及揭示其在家蚕胚胎早期发育中的作用机制提供理论依据。【方法】从NCBI检索并下载家蚕等12种昆虫的HK氨基酸序列,采用MEGA 7.0的邻接法(NJ)构建基于HK氨基酸序列相似性的系统发育进化树。以家蚕二化性品系秋丰活化越年蚕卵(丙2胚胎)为材料,分别制备非滞育命运卵(ND)、滞育命运卵(DD)和即时浸酸卵(IA),采用实时荧光定量PCR检测BmHK基因各转录本在家蚕二化性品系胚胎早期发育过程中的表达特性。【结果】BmHK基因属于HSP70-actin家族,存在4个不同的转录本,其长度分别为4610、4608、2818和1520 bp,依次命名为BmHK-a、BmHK-b、BmHK-c和BmHK-d。BmHK-a在3种蚕卵胚胎早期发育过程中整体上呈先升高后降低的变化趋势,且各时间点均表现为IA蚕卵>ND蚕卵>DD蚕卵,IA蚕卵中的BmHK-a相对表达量于发育2 h达峰值,在ND蚕卵和DD蚕卵中于发育48 h达峰值,此后其表达快速下调,至发育96 h均处于较低水平;BmHK-b在3种蚕卵中的表达水平整体上表现为IA蚕卵>ND蚕卵>DD蚕卵,3种蚕卵中的BmHK-b相对表达量变化趋势基本一致,均随发育时间推移呈逐渐上升趋势;BmHK-c在3种蚕卵中的表达差异明显,初产蚕卵中已有较高的表达水平,受精后迅速升高,至发育72 h后BmHK-c在3种蚕卵中的相对表达量再次升高;BmHK-d在3种蚕卵中的相对表达量整体上呈先升高后降低的变化趋势,且各时间点均表现为ND蚕卵>IA蚕卵>DD蚕卵,但IA蚕卵中BmHK-d表达峰值出现的时间早于DD蚕卵和ND蚕卵。【结论】BmHK-a和BmHK-d主要在家蚕胚胎早期发育(产卵或浸酸后3 d)过程中发挥重要作用;BmHK-b虽然也参与家蚕胚胎早期发育过程,但不是主要的糖代谢相关酶;BmHK-c与家蚕胚胎早期发育关系密切,通过糖酵解为胚胎发育提供能量。
关键词
家蚕
己糖激酶(HK)
转录本
滞育
糖酵解
胚胎早期发育
Keywords
Bombyx mori
hexokinase(HK)
transcript
diapause
glycolytic
early embryonic development
分类号
S882.4 [农业科学—特种经济动物饲养]
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职称材料
题名
家蚕卵形指数对孵化率的影响及孵化相关基因表达分析
被引量:
2
4
作者
王雪珍
徐娇
王闪闪
浦月霞
沈兴家
唐顺明
机构
江苏科技大学生物技术学院/江苏省蚕桑生物学与生物技术重点实验室
中国农业科
学院
蚕业研究所/农业农村部
蚕桑
与遗传改良
重点
实验室
广西蚕业
技术
推广站
出处
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第12期3109-3115,共7页
基金
国家自然科学基金项目(31372376,31672490)
江苏省自然科学基金项目(BK20141285)。
文摘
[目的]分析家蚕卵形指数对孵化率的影响规律,以及孵化酶基因(BmHEⅠ和BmHEⅡ)、几丁质酶基因(Chitinase)和周期蛋白基因(Period)在不同卵形间的表达规律,为阐明家蚕卵形指数与孵化率的相关性及其分子机理打下基础。[方法]调查家蚕Nistari品种野生型正常形品种(Nistari+)及其新突变体纺锤形品种(Nistari-)的卵形指数、孵化率、受精率和转青死卵率,分析其卵形指数与孵化率的相关性;并通过实时荧光定量PCR检测蚕卵胚胎发育后期孵化相关基因的表达情况。[结果lNistari+蚕卵的平均卵形指数为1.26,极显著低于Nistari-蚕卵(1.73)(P<0.01,下同);孵化率为96.22%,极显著高于Nistari-蚕卵(51.33%)。当Nistari+蚕卵的卵形指数为1.24~1.25时,其孵化率(97.39%)和受精率(98.84%)均最高,转青死卵率最低(2.61%);而Nistari-蚕卵的卵形指数为1.77~1.81时,其孵化率(56.52%)和受精率(74.87%)均最高,转青死卵率最低(43.48%)。相关分析结果表明,Nistari蚕卵孵化率、受精率和转青死卵率与卵形指数存在一定的相关性,且受卵形指数影响。在蚕卵胚胎发育后期(孵化前),Nistari+蚕卵的BmHEⅠ、BmHEⅡ、Chitinase和Period基因大量表达,对应的相对表达量显著(P<0.05)或极显著高于NISTAR-蚕卵。[结论]家蚕Nistari品种的卵形指数与孵化率存在一定相关性,而BmHEⅠ、BmHEⅡ、Chitinase和Period基因的表达差异是导致Nistari-蚕卵与Nistari+蚕卵孵化率差异的分子基础。
关键词
家蚕
Nistari品种
卵形指数
孵化率
孵化相关基因
Keywords
sailkworm(Bombyx mori)
Nistari varieties
egg shape index
hatching rate
hatching related genes
分类号
S882.4 [农业科学—特种经济动物饲养]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
研究生基因工程实验课程教学分析与思考
罗刚
王学杨
王俊
《黑龙江动物繁殖》
2022
0
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职称材料
2
对丝腺细胞因子SGF-1具有调控作用的家蚕miRNAs功能研究
王欣
陈晨
范洋洋
谢雨辰
钱平
唐顺明
沈兴家
《江苏农业科学》
北大核心
2016
1
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职称材料
3
家蚕己糖激酶基因进化分析及其多转录本在胚胎早期发育过程中的表达特性
许瑾
邵云华
黄静怡
沈广胜
朱娟
王梅仙
唐顺明
沈兴家
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021
3
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职称材料
4
家蚕卵形指数对孵化率的影响及孵化相关基因表达分析
王雪珍
徐娇
王闪闪
浦月霞
沈兴家
唐顺明
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020
2
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