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利用环介导等温扩增技术快速检测金枪鱼制品中的鲣鱼成分 被引量:1
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作者 许文杰 李秋萍 +4 位作者 崔晓文 操敏 李壹 熊晓辉 熊雄 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期233-238,共6页
该研究建立了金枪鱼制品中的鲣鱼成分的环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测方法。针对线粒体Cyt b基因设计了鲣鱼的特异性引物,着重对内引物FIP/BIP、dNTP Mix、缓冲液和Mg^(2+)浓度等反应参数进行了优化... 该研究建立了金枪鱼制品中的鲣鱼成分的环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测方法。针对线粒体Cyt b基因设计了鲣鱼的特异性引物,着重对内引物FIP/BIP、dNTP Mix、缓冲液和Mg^(2+)浓度等反应参数进行了优化,扩增产物采用恒温实时荧光仪和可视化核酸染料SYBR Green I进行检测,对方法的特异性和灵敏度进行了评价。结果表明,在0.2μmol/L外引物(F3和B3)、1.6μmol/L内引物(FIP和BIP)、1.6 mmol/L dNTP Mix、3.5μL 10×ThermoPol缓冲液、6 mmol/L Mg^(2+)等参数的优化条件下扩增效果最佳。该方法特异性强,灵敏度高。其检测限为50 pg/μL。采用此LAMP方法对59份市售样品进行检测,检出6份为阳性样品,与DNA条形码检测结果一致。该研究建立的LAMP检测方法可应用于金枪鱼制品中鲣鱼成分的快速特异检测,为监管机构提供技术支持。 展开更多
关键词 环介导等温扩增 鲣鱼 掺假 物种鉴定
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食品中致病菌总DNA快速提取方法比较 被引量:3
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作者 熊丽莎 程月花 +2 位作者 陆利霞 游京晶 熊晓辉 《安徽农业科学》 CAS 2013年第34期13392-13394,共3页
比较近年来国内外传统的和新的或改进的DNA提取方法:物理提取方法(煮沸法、反复冻融法、超声法)、化学提取方法(CTAB法、chelex-100法、SDS法)、酶法及复合提取法的优缺点,并重点阐述了存在的问题。
关键词 食品 致病菌 DNA提取
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基于量子点的传感技术在农药残留检测中的应用 被引量:1
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作者 张雪瑾 马学彬 +2 位作者 熊晓辉 陆利霞 迟波 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期262-267,共6页
食品中农药的残留日益威胁人类健康,而基于量子点发展起来的传感技术在农药残留的检测中有着不可比拟的优势。文中阐述了近几年来几种主要的传感技术在农药残留中的应用,并探讨了这些传感技术在农药残留检测中面临的挑战。
关键词 量子点 传感 农药残留 检测
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PCR法检测鱼及其制品中的鱼源性成分 被引量:5
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作者 程月花 陆利霞 +3 位作者 李壹 熊晓辉 陈晓宇 张一青 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第20期279-285,共7页
目的:建立一种快速、特异、灵敏的鱼源性成分聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测方法。方法:根据鱼线粒体基因组12S r RNA中的保守序列设计鱼源性特异性引物,进行PCR扩增,建立鱼源性成分检测方法;对24种鱼及鸡、牛、羊... 目的:建立一种快速、特异、灵敏的鱼源性成分聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测方法。方法:根据鱼线粒体基因组12S r RNA中的保守序列设计鱼源性特异性引物,进行PCR扩增,建立鱼源性成分检测方法;对24种鱼及鸡、牛、羊、猪、鸭、虾6种常见的易混于鱼制品的动物源性成分进行特异性检测;将草鱼肉混入其他动物肉中,混合均匀后提取DNA进行PCR扩增,确定肉样水平的检测灵敏度;将草鱼DNA混入其他动物DNA中,以混合后的DNA为模板进行PCR扩增,确定DNA水平的检测灵敏度。结果:该方法能特异性的对鱼源性成分进行快速检测,检测灵敏度达0.5%。结论:该方法能对食品中是否含有鱼源性成分进行初筛,到达快速检测的目的,对防止食品掺假、维护消费者利益、规范市场秩序有重要意义。 展开更多
关键词 聚合酶链式反应 12SRRNA基因 鱼源性成分 检测 食品
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南京部分地区食品中金黄色葡萄球菌污染状况调查 被引量:5
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作者 史昕平 陆利霞 熊晓辉 《食品安全质量检测学报》 CAS 2018年第4期723-728,共6页
目的了解南京市市场出售的食品中金黄色葡萄球菌污染情况,为预防和控制食源性疾病的发生提供依据。方法 2016年11月~2017年5月从南京市浦口区、建邺区、鼓楼区以及玄武区的各大超市,农贸市场以及牧场采集132份食品样品。按照GB 4789.10-... 目的了解南京市市场出售的食品中金黄色葡萄球菌污染情况,为预防和控制食源性疾病的发生提供依据。方法 2016年11月~2017年5月从南京市浦口区、建邺区、鼓楼区以及玄武区的各大超市,农贸市场以及牧场采集132份食品样品。按照GB 4789.10-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验》方法进行检验,并使用荧光定量PCR方法对所得结果进行验证。结果 5类132份食品样品中均未检出金黄色葡萄球菌,但出现可疑菌落率最高的食品种类为普通生肉及调味肉,其次为豆制品;针对不同地区同一种类的样品,农贸市场抽检食品中可疑菌落的发现率最高,从不同抽检时间来看,可疑菌落检出率最高出现在2017年第二季度。结论南京市市售食品中未检出金黄色葡萄球菌,表明从业人员的食品卫生意识正逐步提高,但仍需要加强食品卫生安全监管,进一步预防食源性疾病的发生。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 南京 食品安全 污染 调查
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不同食品加工方式对提取鮟鱇鱼肉DNA的影响 被引量:3
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作者 程月花 卜菁 +1 位作者 陆利霞 熊晓辉 《食品安全质量检测学报》 CAS 2016年第6期2509-2515,共7页
目的研究不同食品加工方式对提取鮟鮟鱼肉DNA的影响。方法以实时荧光PCR方法检测鮟鮟鱼成分标准为例,采取水煮、微波、油炸3种处理方式,选用试剂盒提取DNA,利用核酸蛋白测定仪测定其在260 nm、280 nm处的吸光度,通过A260来计算核酸浓度,... 目的研究不同食品加工方式对提取鮟鮟鱼肉DNA的影响。方法以实时荧光PCR方法检测鮟鮟鱼成分标准为例,采取水煮、微波、油炸3种处理方式,选用试剂盒提取DNA,利用核酸蛋白测定仪测定其在260 nm、280 nm处的吸光度,通过A260来计算核酸浓度,A260/A280来评估核酸的纯度。以提取的DNA为模板,进行实时荧光PCR扩增。通过Ct值判断不同加工方式对实时荧光PCR结果的影响。结果水煮、微波、油炸3种加工方式中,油炸对DNA的影响最明显,当在高温下油炸时间过久会导致鱼肉焦糖化反应及蛋白质变性严重,变成具有一定孔隙的焦状物,此时鱼肉在提取DNA的过程中难以消化,造成DNA提取量少,最终导致实时荧光PCR结果假阴性。而水煮、微波两种加工方式即使处理时间过久也没有对实时荧光PCR结果产生明显影响。结论在鱼制品使用实时荧光PCR方法检测时,应充分考虑加工方式对鱼制品DNA的影响。 展开更多
关键词 食品加工 鮟鱇鱼 DNA提取 实时荧光PCR
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不同核酸提取方法用于环介导等温扩增检测大西洋鲑鱼的比较分析 被引量:2
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作者 李秋萍 许文杰 +3 位作者 崔晓文 操敏 熊晓辉 熊雄 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期240-246,254,共8页
环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)已被广泛应用于鱼类真伪鉴定。LAMP扩增成功的重要前提是获得高质量的核酸。目前为止,DNA提取方法种类繁多,但对适用于LAMP的提取方法缺乏全面的研究。该研究采用十二烷基... 环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)已被广泛应用于鱼类真伪鉴定。LAMP扩增成功的重要前提是获得高质量的核酸。目前为止,DNA提取方法种类繁多,但对适用于LAMP的提取方法缺乏全面的研究。该研究采用十二烷基磺酸钠(sodium dodecyl sulfonate,SDS)、Tagliavia、Heating以及2种常用市售试剂盒(Takara,Tiangen),对4种前处理的大西洋鲑鱼组织进行DNA提取,并对DNA得率、纯度、LAMP等方面进行比较分析。结果表明,这5种提取方法从不同前处理的样品中获得的DNA均可用于LAMP反应,采用琼脂糖凝胶电泳及荧光可视化检测都可观测到阳性结果。但在实时LAMP检测中,不同提取方法和不同样品前处理方式的Ct值均存在着极显著差异(P<0.01)。SDS和Tiangen这2种提取方法虽然DNA得率较低,但可获得高纯度的DNA,并在LAMP反应中有着更低的检测限。该研究结果为大西洋鲑鱼组DNA的提取和检测以及适用于LAMP技术的不同提取方法的研究提供了参考依据。 展开更多
关键词 环介导等温扩增 大西洋鲑鱼 核酸提取 灵敏度
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抗性糊精对凝固型酸奶品质的影响 被引量:16
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作者 陈晓霞 陆利霞 +2 位作者 林丽军 姚丽丽 熊晓辉 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期91-97,共7页
以奶粉为主要原料,蔗糖,乳糖,乳清蛋白为辅料,自制抗性糊精添加量为6%,10%,15%,20%,25%,30%的凝固型酸奶。以酸度、持水力、活菌总数、品质质构参数为评价指标,考察抗性糊精添加量对凝固型酸奶品质的影响,抗性糊精的添加量在6%~20%时,... 以奶粉为主要原料,蔗糖,乳糖,乳清蛋白为辅料,自制抗性糊精添加量为6%,10%,15%,20%,25%,30%的凝固型酸奶。以酸度、持水力、活菌总数、品质质构参数为评价指标,考察抗性糊精添加量对凝固型酸奶品质的影响,抗性糊精的添加量在6%~20%时,可获得优良的感官评定且酸奶的酸度达到标准的要求,持水力达到100%,乳酸菌活菌总数最高也达到5.0×107CFU/m L,硬度为0.230~0.415 N,最大黏附力0.072~0.115N,黏附性为0.261~0.414 m J,内聚性为0.38~0.45,弹性为5.048~6.633 mm,胶黏性为0.102~0.145 N。添加了抗性糊精的酸奶比常规酸奶的变性温度低,变性峰展宽,反应总焓降低。综合各项指标确定抗性糊精添加量为6%~20%,为开发高膳食纤维凝固型酸奶提供理论依据。 展开更多
关键词 凝固型酸奶 抗性糊精 质构 热特性
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酶解鲫鱼肉制取呈味氨基酸研究 被引量:19
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作者 沈雨佳 陆利霞 +1 位作者 林丽军 熊晓辉 《中国调味品》 CAS 北大核心 2015年第1期27-31,44,共6页
实验以鲫鱼肉为原料,目的是获得酶解率高、风味良好的热反应基液。以酶解率、游离氨基酸含量和呈味氨基酸比例三指标筛选最优蛋白酶(木瓜蛋白酶、风味蛋白酶、碱性蛋白酶),通过响应面法优化风味蛋白酶酶解工艺,确定酶解温度55℃,初始pH ... 实验以鲫鱼肉为原料,目的是获得酶解率高、风味良好的热反应基液。以酶解率、游离氨基酸含量和呈味氨基酸比例三指标筛选最优蛋白酶(木瓜蛋白酶、风味蛋白酶、碱性蛋白酶),通过响应面法优化风味蛋白酶酶解工艺,确定酶解温度55℃,初始pH 6.7,加酶量2525U/g(底物),酶解率61.92%。优化后水解液中氨基态氮含量达到4.377mg/g,游离氨基酸量2.424g/dL。呈味氨基酸所占氨基酸总量比例从25.837%提升至36.848%,提高了43%;参与热反应的重要风味氨基酸总量达到0.568g/dL。对酶解液滋味贡献较大的氨基酸有Arg,Glu,Met,Ala,Lys。 展开更多
关键词 鲫鱼肉 蛋白酶 呈味氨基酸 响应面法 TAV值
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不同分子量的葡聚糖-花生分离蛋白接枝复合物的制备及其性质 被引量:4
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作者 吴周山 李晨 +4 位作者 薛瑞 梁忠 薛峰 陆利霞 熊晓辉 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2019年第1期51-57,共7页
通过不同分子量葡聚糖与花生分离蛋白发生接枝反应形成共价聚合物,并对它们的结构特性、功能特性和所形成乳浊液的流变学特性进行分析,多角度探讨葡聚糖分子量对花生分离蛋白结构及其乳浊液性质的影响并阐释原因。对接枝产物的接枝度结... 通过不同分子量葡聚糖与花生分离蛋白发生接枝反应形成共价聚合物,并对它们的结构特性、功能特性和所形成乳浊液的流变学特性进行分析,多角度探讨葡聚糖分子量对花生分离蛋白结构及其乳浊液性质的影响并阐释原因。对接枝产物的接枝度结果测定证明了接枝反应的发生,且随着葡聚糖分子量的增加,接枝程度越低。共价聚合物的二级和三级结构都发生了改变,二级结构中α-螺旋结构减少,β-转角结构增多,以20 k Da分子量的葡聚糖与花生分离蛋白接枝形成的共价聚合物PDC2变化较为明显;三级结构中,PDC2变得更加松散,结构的变化引起其分子间疏水作用力增加,表面疏水性指数达到783±19,在其乳浊液体系中,内部分子间离子作用力明显,抗剪切作用力较大,这些作用力维持着乳浊液体系的稳定性。葡聚糖接枝能够改善花生分离蛋白的功能特性,其中以20 k Da分子量的葡聚糖改善程度最为明显,为拓宽花生分离蛋白在食品工业中的应用提供了一定的依据。 展开更多
关键词 不同分子量 葡聚糖 花生分离蛋白 接枝反应 结构性质
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臭氧及其在肉制品加工中的应用研究现状 被引量:4
11
作者 梁龙 陆利霞 +1 位作者 游京晶 熊晓辉 《安徽农业科学》 CAS 2013年第34期13366-13368,13384,共4页
从臭氧的产生、性质以及臭氧在肉制品加工中的应用等方面进行阐述,为臭氧技术在肉制品加工中的进一步应用提供参考。
关键词 臭氧 臭氧水 强氧化 肉制品 食品安全
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两种化学修饰剂对小麦酯酶活性及稳定性的影响 被引量:1
12
作者 陈铭 陆利霞 +1 位作者 熊晓辉 游京晶 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第21期158-162,共5页
目的:用右旋糖酐和单甲氧基聚乙二醇(mPEG)化学修饰纯化后的小麦酯酶,并考察修饰酶的酶学性质。方法:分别采用高碘酸钠和三聚氯氰活化右旋糖酐和mPEG,得到修饰的小麦酯酶,通过红外光谱表征修饰酶基团变化,测试修饰酶的反应动力学参数,... 目的:用右旋糖酐和单甲氧基聚乙二醇(mPEG)化学修饰纯化后的小麦酯酶,并考察修饰酶的酶学性质。方法:分别采用高碘酸钠和三聚氯氰活化右旋糖酐和mPEG,得到修饰的小麦酯酶,通过红外光谱表征修饰酶基团变化,测试修饰酶的反应动力学参数,并考察温度及pH值对修饰酶活力的影响。结果:修饰后的酶与纯化酶相比,修饰酶对底物乙酸-1-萘酯的亲和力增强,并保留了大部分酶的活力,右旋糖酐修饰酶活保持率在67.1%,mPEG修饰酶的酶活保持率达到87.7%。另外,右旋糖酐修饰酶的最适温度和pH值分别为35℃和6.4,K m和V max分别为2.00mmol/L和2000 g/min,而mPEG修饰酶的最适温度和pH值为35℃和6.8,K m和V max为1.25mmol/L和2500 g/min。两种修饰酶在耐热性、耐酸碱性等方面都优于纯化酶,mPEG修饰酶的最适pH值发生改变。结论:修饰酶较纯化酶更稳定,具有一定的实用意义。 展开更多
关键词 小麦酯酶 右旋糖酐 单甲氧基聚乙二醇 酶活力 稳定性
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糖基化反应改善植物蛋白乳浊液稳定性的研究进展 被引量:2
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作者 吴周山 陆利霞 +2 位作者 熊晓辉 薛峰 李晨 《食品工业科技》 CSCD 北大核心 2017年第14期336-341,共6页
植物蛋白乳浊液是一种不稳定体系,糖基化反应能够有效地改善蛋白质乳浊液的稳定性。本文主要介绍了蛋白质糖基化的反应机理,综述了糖基化反应对大豆蛋白、花生蛋白、燕麦蛋白等各类植物蛋白乳浊液稳定性影响的国内外研究进展,并总结了... 植物蛋白乳浊液是一种不稳定体系,糖基化反应能够有效地改善蛋白质乳浊液的稳定性。本文主要介绍了蛋白质糖基化的反应机理,综述了糖基化反应对大豆蛋白、花生蛋白、燕麦蛋白等各类植物蛋白乳浊液稳定性影响的国内外研究进展,并总结了乳浊液体系稳定性的研究方法。 展开更多
关键词 植物蛋白质 糖基化反应 乳浊液稳定性
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普通聚合酶链式反应鉴定牛肉及其制品中的牛源性成分 被引量:2
14
作者 陈晓宇 陆利霞 +2 位作者 熊雄 刘元建 熊晓辉 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期215-222,共8页
依据牛种属的线粒体细胞色素b(cytochrome b,Cytb)基因上的保守序列设计牛源特异性引物对,建立一种特异性强、灵敏性高、耗时短的鉴定食品中牛源性成分的聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)方法。选取牦牛、水牛、黄牛品种... 依据牛种属的线粒体细胞色素b(cytochrome b,Cytb)基因上的保守序列设计牛源特异性引物对,建立一种特异性强、灵敏性高、耗时短的鉴定食品中牛源性成分的聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)方法。选取牦牛、水牛、黄牛品种及羊、猪、鸡、鸭、鹅、兔、马、驴、鱼、大豆、玉米等动植物源成分进行特异性试验。结果显示:所建立的方法高度特异于牛源性检测,其他非牛动植物源成分均无扩增条带。采用常见的牛品种进行灵敏性试验,结果显示所建立的方法可检测到的最低牛DNA量为0. 2 pg;将牛肉分别与猪肉、驴肉、羊肉、大豆组织混合进行PCR测定,结果表明最低检测限为鲜样品含0. 01%质量分数的牛源成分,高压121℃、0. 1MPa,20 min处理样品含0. 01%质量分数的牛源成分。对市售食品中牛源性成分检测结果与现行PCR牛源性成分检测标准方法的检测结果 100%一致。 展开更多
关键词 聚合酶链式反应(PCR) 细胞色素b(Cytb)基因 牛源性成分 鉴定
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