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条带杂交mRNA定量分析及其在血栓调节蛋白基因表达研究中的应用
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作者 周泉生 储小红 +2 位作者 顾建明 王晓冬 阮长耿 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1994年第4期423-426,共4页
含血栓调节蛋白cDNA的质粒转染大肠杆菌,经扩增、酶切、凝胶电泳纯化,获得长度为3.7kb的血栓调节蛋白cDNA,后者用随机引物法标记^(32)P,制成血栓调节蛋白的基因探针。将该探针与血栓调节蛋白mRNA进行条带杂交后,分别用β-液闪仪和放射... 含血栓调节蛋白cDNA的质粒转染大肠杆菌,经扩增、酶切、凝胶电泳纯化,获得长度为3.7kb的血栓调节蛋白cDNA,后者用随机引物法标记^(32)P,制成血栓调节蛋白的基因探针。将该探针与血栓调节蛋白mRNA进行条带杂交后,分别用β-液闪仪和放射自显影及密度扫描仪作定量分析。用本法研究了血管内皮细胞中血栓调节蛋白基因表达及血小板血栓调节蛋白mRNA的含量。 展开更多
关键词 血栓调节蛋白mRNA 基因表达 血管内皮细胞 血小板
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抗纤维蛋白单克隆抗体的制备和鉴定 被引量:5
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作者 奚晓东 赵益明 +4 位作者 王庆才 李佩霞 白霞 周泉生 阮长耿 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1994年第2期181-188,共8页
用XL-FN颗粒、D-D、FN单体等作为免疫原获得一组小鼠单克隆抗体。除了3个与FG有交叉反应,其余均只与XL-FN和/或其片段反应。其中SZ-58、SZ-60及SZ-63与血浆凝块的结合反应不受血浆或全血影响。在免疫印迹电泳中,SZ-63主要识别D-D,而SZ-5... 用XL-FN颗粒、D-D、FN单体等作为免疫原获得一组小鼠单克隆抗体。除了3个与FG有交叉反应,其余均只与XL-FN和/或其片段反应。其中SZ-58、SZ-60及SZ-63与血浆凝块的结合反应不受血浆或全血影响。在免疫印迹电泳中,SZ-63主要识别D-D,而SZ-58不识别任何区带。SZ-58、SZ-60可抑制血浆凝固,并对ADP诱导的血小板聚集有程度不同的抑制作用。SZ-60可与固相化的FG结合而与溶解态的FG无结合反应。结果提示,SZ-58、SZ-60、SZ-63对XL-FN反应的特异性较高,因此可应用于体内血栓显像而SZ-63同时又可应用于D-D检测。 展开更多
关键词 纤维蛋白 纤维蛋白原 单克隆抗体
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白细胞-内皮细胞的体外粘附反应及眼镜蛇毒的影响 被引量:2
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作者 王兆钺 陈德春 +4 位作者 何杨 张威 程满根 李福刚 阮长耿 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1991年第5期550-553,共4页
F-MLP与白三烯B_4能增加中性多形核白细胞(PMNL)对人脐静脉内皮细胞的粘附率。白三烯B_4处理的PMNL刺激内皮细胞产生6-酮-PGF_1a,F-MLP或自三烯B_4处理的PMNL促进内皮细胞释放von Willebrand因子。眼镜蛇毒抑制F-MLP或白三烯B_4对PMNL... F-MLP与白三烯B_4能增加中性多形核白细胞(PMNL)对人脐静脉内皮细胞的粘附率。白三烯B_4处理的PMNL刺激内皮细胞产生6-酮-PGF_1a,F-MLP或自三烯B_4处理的PMNL促进内皮细胞释放von Willebrand因子。眼镜蛇毒抑制F-MLP或白三烯B_4对PMNL粘附的刺激作用,但这种PMNL仍能促进内皮细胞的花生四烯酸代谢与von Willebrand因子释放。而用F-MLP、白三烯B_4和/或眼镜蛇毒预先处理内皮细胞,不影响白细胞的粘附,也不影响内皮细胞释放6-酮-PGF_1a与von Willebrand因子。这些体外试验结果表明,F-MLP与白三烯B_4在刺激PMNL-内皮细胞粘附中主要的靶细胞是PMNL而不是内皮细胞。PMNL在没有粘附于内皮细胞的情况下也可能通过释放某些介质影响内皮细胞的功能。 展开更多
关键词 白细胞 内皮细胞 蛇毒
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血小板第4因子抑制巨核细胞系膜结合型c-kit的表达(英文) 被引量:4
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作者 顾学范 奚晓东 Jacques P Caen 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1997年第2期190-201,共12页
细胞表面受体c-kit与干细胞因子(SCF)对维持血细胞的生成起重要作用。血小板第4因子(PF4)能特异性地抑制巨核细胞生成。在本实验中研究了PF4对两个巨核细胞系HEL和Dami的c-kit表达影响。结果显示,经PF4处理的两株细胞,其c-kit mRNA表达... 细胞表面受体c-kit与干细胞因子(SCF)对维持血细胞的生成起重要作用。血小板第4因子(PF4)能特异性地抑制巨核细胞生成。在本实验中研究了PF4对两个巨核细胞系HEL和Dami的c-kit表达影响。结果显示,经PF4处理的两株细胞,其c-kit mRNA表达量均下降,细胞表面受体数量降低,SCF与c-kit的结合量亦下降,两组差异有显著意义。在对细胞膜CD34表达影响方面,PF4与TGFβ1的作用相反,PF4促进CD34的表达,而TGFβ1抑制CD34的表达。研究表明,PF4抑制巨核细胞生长的机理,部分途径可能是通过抑制c-kit/SCF而产生。 展开更多
关键词 血小板第4因子 巨核细胞生成 c-kit原癌基因 CD34 基因表达
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某些疾病状态下血小板表面活化标志蛋白含量的改变 被引量:1
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作者 吴国新 李福刚 +1 位作者 李佩霞 阮长耿 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1993年第6期718-722,共5页
血小板在多种疾病中要发生活化反应并参与血栓形成,本研究利用自制的血小板表面α颗粒膜蛋白(GMP-140)分子数单位点免疫放射分析测定药盒,来研究血栓性疾病等体内血小板的活化程度。结果为:急性心肌梗塞患者体内血小板活化程度显著升高... 血小板在多种疾病中要发生活化反应并参与血栓形成,本研究利用自制的血小板表面α颗粒膜蛋白(GMP-140)分子数单位点免疫放射分析测定药盒,来研究血栓性疾病等体内血小板的活化程度。结果为:急性心肌梗塞患者体内血小板活化程度显著升高,且与病程相关,以梗塞后48h内为高峰;不稳定型心绞痛、慢性肝炎和肝硬变伴有显著的血小板活化,而稳定型心绞痛、糖尿病及原发性血小板减少性紫癜时,体内血小板活化不明显;血液透析3h血小板活化达高峰,血透结束后24h内恢复至血透前水平。这将为研究疾病状态下血小板的病生改变及血栓性疾病的体外诊断提供依据。 展开更多
关键词 血小板 抗体 单克隆 免疫放射分析
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