微滴式数字PCR检测日本血吸虫核酸的方法建立及应用的初步评价

1

作者 汤宪时 杨静 +2 位作者 曲国立 许永良 仝德胜 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2025年第5期544-552,共9页

目的建立微滴式数字PCR(Droplet Digital PCR,ddPCR)检测日本血吸虫的方法,初步评价其应用价值。方法设计合成用于染料法和探针法的引物和探针,构建含靶标序列的质粒,评价两种方法检测重组质粒、感染性钉螺和混合钉螺DNA的灵敏度,采用... 目的建立微滴式数字PCR(Droplet Digital PCR,ddPCR)检测日本血吸虫的方法,初步评价其应用价值。方法设计合成用于染料法和探针法的引物和探针,构建含靶标序列的质粒,评价两种方法检测重组质粒、感染性钉螺和混合钉螺DNA的灵敏度,采用阴性钉螺、曼氏血吸虫、肝吸虫、曼氏迭宫绦虫基因组DNA以及日本血吸虫虫体基因组DNA评价两种方法的特异性,应用和评价探针法检测以不同毛钉比和孵育时长接触毛蚴的钉螺早期感染情况,检测感染过量尾蚴(200条)小鼠体内童虫在不同组织器官中早期移行分布情况。结果检测质粒梯度稀释产物,绘制ddPCR标准曲线,染料法回归方程为y=-0.8399x+7.0509,相关系数R^(2)=0.9881;探针法回归方程为y=-1.0475x+7.2551,相关系数R^(2)=0.9998。探针法质粒检测下限介于38.94 cp/μL和194.74 cp/μL之间。两种方法均可在浓度不低于0.002 ng/μL感染性钉螺基因组DNA样本中和各组混合钉螺基因组DNA中检出阳性反应。探针法检测阴性钉螺、曼氏血吸虫、肝吸虫、曼氏迭宫绦虫结果与对照组比较无显著差异,而染料法检测阴性钉螺DNA(291 ng/μL)检测值为(20.3±4.39)cp/μL与对照组检测值(1.5±0.1)cp/μL比较有明显差别。探针法检测钉螺早期感染显示,在毛钉比高于5∶1的室温条件下孵育30 s即可检出钉螺体内毛蚴DNA,检测值在短时间(5 min)内达高峰,峰值随毛钉比增高呈相应倍数增高的趋势。探针法检测小鼠早期感染显示,童虫第2 d进入肺部,第4 d进入肝脏,血供丰富的脏器(脾、肾、脑)一直有移行的童虫,心脏和胰腺第9 d有异位寄生的趋势,睾丸检测值前9 d始终处于阴性对照水平。结论ddPCR探针法在检测质粒、感染性钉螺和混合钉螺中比染料法更准确可靠,特异性更强,染料法在钉螺检测中存在非特异反应。探针法有望敏感有效反映钉螺早期感染情况,及童虫在宿主小鼠体内移行和在多组织内的分布情况。 展开更多

关键词 日本血吸虫 钉螺 小鼠 微滴式数字PCR(ddPCR)

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江苏省血吸虫病健康教育效果终期评价 被引量：6

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作者 王雷平 李波 +3 位作者 沈怡平 吴伟 朱荫昌 赵勇进 《中国健康教育》 2002年第4期226-228,共3页

目的　评价 1992～ 1998年江苏省世界银行贷款项目血吸虫病健康教育的效果。方法　按分层随机抽样法 ,在不同类型流行区抽取 9个试点县 ,每个试点县各抽取 1个行政村 ,以 7～ 60岁的居民为目标人群 ,并根据不同目标人群接触疫水方式和... 目的　评价 1992～ 1998年江苏省世界银行贷款项目血吸虫病健康教育的效果。方法　按分层随机抽样法 ,在不同类型流行区抽取 9个试点县 ,每个试点县各抽取 1个行政村 ,以 7～ 60岁的居民为目标人群 ,并根据不同目标人群接触疫水方式和感染血吸虫的特点 ,分为成年男性、妇女、学生 3个组。在基线调查基础上 ,分别对 3组目标人群连续 7年实施针对性干预措施 ,用定性和定量方法对干预效果进行评价。结果　实施干预后 ,目标人群血防知识知晓率分别由 5 0 3 %、 48 9%和 5 1 2 %上升为 90 0 %、 88 9%和 96 0 %。娱乐性和生活性接触疫水率分别由 8 68%、 2 8 5 7%下降为 2 15 %、 18 5 0 %。查病和化疗依从率由 61 1%、 73 0 %上升为 92 2 %、97 9%。血吸虫感染率 (COPT)分别由 2 96%、 2 41%、 1 88%下降为 1 3 2 %、 0 63 %、 0 3 3 %。结论　健康教育能有效地控制血吸虫病 ,并对血吸虫病其他防治措施具有促进作用。 展开更多

关键词 血吸虫病 健康教育 终期评价 效果 江苏

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日本血吸虫幼虫在钉螺体内发育有效积温的研究 被引量：7

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作者 孙乐平 周晓农 +4 位作者 洪青标 黄轶昕 杨国静 奚伟萍 姜玉骥1 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2003年第6期59-61,共3页

目的　研究日本血吸虫幼虫在钉螺体内发育成熟所需的热量 (发育有效积温 )。方法　现场采集无血吸虫感染的钉螺 ,以钉螺∶毛蚴为 1∶2 0比例进行实验感染 ,感染后常规饲养 ,以逸蚴法确定感染性钉螺 ,根据变温动物发育积温和有效积温的... 目的　研究日本血吸虫幼虫在钉螺体内发育成熟所需的热量 (发育有效积温 )。方法　现场采集无血吸虫感染的钉螺 ,以钉螺∶毛蚴为 1∶2 0比例进行实验感染 ,感染后常规饲养 ,以逸蚴法确定感染性钉螺 ,根据变温动物发育积温和有效积温的计算公式 (Q =∑Tn、K =N(T -C) ) ,计算血吸虫在钉螺体内发育的尾蚴开放积温和发育有效积温。结果　在 2 1～30℃之间 ,血吸虫在钉螺体内尾蚴开放的最低积温为 12 0 0日度 ,最高积温为 3480日度 ,平均积温为 2 2 0 2 75± 378 86日度。血吸虫在钉螺体内的发育有效积温常数为 84 2 91日度 (95 %可信区间为 6 99 2 8～ 986 5 4日度 )。结论　日本血吸虫在钉螺体内要完成发育至成熟的尾蚴 ,所需的有效积温 (环境温度在 15 17℃以上的累积温度 )必须达到 84 2 91日度。 展开更多

关键词 日本血吸虫幼虫 钉螺 发育有效积温 环境温度 开放积温

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吡喹酮抗血吸虫作用机制的研究进展 被引量：8

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作者 钱科 汪伟 梁幼生 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2013年第9期979-983,共5页

血吸虫病是一种严重危害人类健康、影响社会经济发展的热带病。吡喹酮是当前用于血吸虫病病原学治疗的首选药物,但吡喹酮抗血吸虫的作用机制尚未完全阐明。文中就吡喹酮抗血吸虫作用机制最新研究进展作一综述。

关键词 血吸虫 吡喹酮 作用机制

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江苏省部分地区HIV阳性男男性行为者抗病毒治疗耐药发生及其影响因素队列研究 被引量：1

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作者 杨蒙蒙 叶鲁 +8 位作者 嵇冬静 徐青 杨传坤 闫红静 李建军 丁萍 傅更锋 还锡萍 羊海涛 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期636-640,共5页

目的 :探讨江苏省部分地区HIV阳性的男男性行为者(men who have sex with men,MSM)抗病毒治疗耐药发生情况及其影响因素。方法:采用前瞻性动态队列研究,纳入符合标准的治疗者随访观察,计算基因型耐药发病密度,用COX回归模型探讨发生耐... 目的 :探讨江苏省部分地区HIV阳性的男男性行为者(men who have sex with men,MSM)抗病毒治疗耐药发生情况及其影响因素。方法:采用前瞻性动态队列研究,纳入符合标准的治疗者随访观察,计算基因型耐药发病密度,用COX回归模型探讨发生耐药的影响因素。结果:本研究共纳入符合标准的MSM 407例,总观察人时为845.77人年,随访期间共有23例发生基因型耐药,发病密度为2.72/100人年。多因素COX回归分析显示治疗前CD4+T淋巴细胞计数≤200个/μL、治疗起始用药方案是发生基因型耐药的危险因素。结论:江苏省参加抗病毒治疗的MSM耐药率处在较低水平,建议对该人群实行早治疗策略,治疗起始方案推荐优先选用含依非韦伦(EFV)的方案。 展开更多

关键词 HIV MSM 抗病毒治疗 耐药 队列研究

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三峡工程有利于长江中下游血吸虫病的防治 被引量：5

6

作者 肖荣炜 《水资源保护》 CAS 1993年第1期20-22,共3页

本文阐明我国血防工作虽然取得很大成绩,但面临的任务仍十分艰巨。当前,长江中下游五省洲滩有钉螺分布的面积约28亿m^2,病人每年保持在100万左右,不仅一时治理不了,而且仍有可能出现继续蔓延之势。根据实验及论证结果,兴建三峡工程将为... 本文阐明我国血防工作虽然取得很大成绩,但面临的任务仍十分艰巨。当前,长江中下游五省洲滩有钉螺分布的面积约28亿m^2,病人每年保持在100万左右,不仅一时治理不了,而且仍有可能出现继续蔓延之势。根据实验及论证结果,兴建三峡工程将为长江中下游血吸虫病的防治带来有利影响。三峡水库的运行可以加强长江中下游的抗洪能力,使洲滩钉螺随洪水扩散的机会和数量减少,压缩洲滩有螺面积,并为综合开发利用洲滩创造条件。三峡库区所在地原无钉螺分布,研究证明,建库后库区出现钉螺孽生场所的可能性不大。因此,工程对长江中下游血吸虫病的防治有利无弊,可以充分利用三峡建坝对灭螺和防病的有利因素,着手探讨和实施行之有效的对策措施,使消灭血吸虫病成为三峡工程的社会效益之一。 展开更多

关键词 血吸虫病 三峡工程 库区 钉螺 洲滩 长江中下游

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胶体染料试纸条法快速诊断家畜血吸虫病的研究 被引量：6

7

作者 何伟 朱荫昌 +3 位作者 徐明 曹国群 华万全 叶萍 《中国兽医寄生虫病》 2002年第3期1-3,3,共4页

为了适应现场家畜血吸虫病的筛查需要 ,设计了简便快速的胶体染料试纸条诊断技术用于检测家畜血清中的抗血吸虫抗体 ,以该方法检测血吸虫病牛、猪血清 83份 ,其结果为阳性检出率 1 0 0 %,健康牛、猪血清 73份的检测结果为阴性符合率分别... 为了适应现场家畜血吸虫病的筛查需要 ,设计了简便快速的胶体染料试纸条诊断技术用于检测家畜血清中的抗血吸虫抗体 ,以该方法检测血吸虫病牛、猪血清 83份 ,其结果为阳性检出率 1 0 0 %,健康牛、猪血清 73份的检测结果为阴性符合率分别为 95 .3 %和 94.0 %,与感染肝片形吸虫的牛、羊血清 1 6份的交叉反应率为 1 8.8%。表明本方法敏感性高 。 展开更多

关键词 胶体染料试纸条法 快速诊断 日本血吸虫病 家畜

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江苏省耐多药肺结核患者痰涂片阴转影响因素的前瞻性队列研究 被引量：2

8

作者 卢鹏 刘巧 +3 位作者 陆伟 丁晓艳 竺丽梅 羊海涛 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2017年第3期368-372,共5页

目的:探讨江苏省耐多药肺结核患者痰涂片阴转的影响因素。方法:在江苏省徐州、镇江、连云港和南通4个城市选取确诊的耐多药肺结核患者作为研究对象,分析可能对痰阴转产生影响的各种因素。结果:2011年12月—2014年3月共纳入127例耐多药... 目的:探讨江苏省耐多药肺结核患者痰涂片阴转的影响因素。方法:在江苏省徐州、镇江、连云港和南通4个城市选取确诊的耐多药肺结核患者作为研究对象,分析可能对痰阴转产生影响的各种因素。结果:2011年12月—2014年3月共纳入127例耐多药肺结核患者。其中106例(83.5%)患者痰涂片阴转,中位阴转时间为145 d(四分位数间距:102~228 d)。81例(63.8%)耐多药患者治愈;46例(36.2%)耐多药患者治疗失败或死亡。吸烟(HR:0.561,95%CI:0.320~0.984,P=0.044)、氧氟沙星耐药(HR:0.556,95%CI:0.317~0.975,P=0.041)和初始涂片等级>1(HR:0.557,95%CI:0.334~0.928,P=0.025)是痰阴转的危险因素。结论:吸烟、耐氧氟沙星和初始涂片等级偏高是影响耐多药肺结核痰涂片阴转的危险因素。 展开更多

关键词 痰涂片阴转 耐多药 结核病 危险因素

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血吸虫感染与炎症性肠病相互关系的研究进展 被引量：3

9

作者 朱恬宇(综述) 黄玉政(审校) 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2022年第1期82-86,共5页

随着炎症性肠病(IBD)在全球的发病率普遍增加,IBD的预防及治疗也逐渐成为科学界关注的热点问题之一。越来越多的研究表明,“卫生假说”可能为研究IBD疾病及其预防治疗提供方向。研究显示,寄生虫等病原体可刺激人体免疫系统,调节机体免... 随着炎症性肠病(IBD)在全球的发病率普遍增加,IBD的预防及治疗也逐渐成为科学界关注的热点问题之一。越来越多的研究表明,“卫生假说”可能为研究IBD疾病及其预防治疗提供方向。研究显示,寄生虫等病原体可刺激人体免疫系统,调节机体免疫应答,并营造免疫抗炎微环境,从而有效干预感染后的炎症发生发展,为包括IBD在内的自身性免疫疾病的治疗提供了研究方向。血吸虫作为机体寄生蠕虫的代表,人和动物均易感。血吸虫感染宿主后,在宿主体内完成尾蚴、童虫、成虫、虫卵的生活史,某种程度上也形成了共生关系。作为消化和泌尿系统的病原体,血吸虫可改变机体免疫微环境和肠道微生物菌群。近年来,血吸虫针对IBD治疗方面的研究也日益增加。文章从血吸虫感染与机体免疫、细胞因子和肠道菌群等方面就血吸虫感染与IBD相互关系的研究进展进行综述。 展开更多

关键词 血吸虫 炎症性肠病 机体免疫 肠道菌群

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球形小泡螺生长发育的最佳光照时长研究

10

作者 吴平进 施亮 +2 位作者 孙伯超 黄玉政 杨坤 《江西农业》 2025年第17期187-189,共3页

【目的】研究光照时长对球形小泡螺生长发育的影响,为实验室优化球形小泡螺的饲养条件提供依据,为桑给巴尔减少血吸虫病的传播媒介从而防治血吸虫病提供参考。【方法】实验选取桑给巴尔奔巴岛采集的球形小泡螺,将孵化15 d后的球形小泡... 【目的】研究光照时长对球形小泡螺生长发育的影响,为实验室优化球形小泡螺的饲养条件提供依据,为桑给巴尔减少血吸虫病的传播媒介从而防治血吸虫病提供参考。【方法】实验选取桑给巴尔奔巴岛采集的球形小泡螺,将孵化15 d后的球形小泡螺子一幼代随机分到5个实验组,每个实验组每天分别接受16 h、14 h、12 h、10 h、8 h光照,在实验箱中饲养90 d,观察球形小泡螺的存活情况和体重变化情况,计算生存率和体重增长率。【结果】饲养90 d后,不同光照时长实验组的生存率差异无统计学意义(P>0.05)。球形小泡螺的体重和增长率在光照14 h组最高(40.72±13.50,7.2579),8 h组的体重和增长率最低(18.27±6.77,3.2049),不同光照时长与体重增长率呈现正相关(r=0.926,P=0.024),8 h组与12 h组、14 h组和16 h光照时长组体重和体重增长率差异有统计学意义(P<0.05)。【结论】光照时长对球形小泡螺的生长发育有正向影响,每天光照14 h为小泡螺适宜的光照条件。 展开更多

关键词 球形小泡螺 血吸虫病 光照 生长发育 坦桑尼亚桑给巴尔

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南水北调工程对日本血吸虫中间宿主湖北钉螺(Oncomelania hupensis)分布的影响 被引量：15

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作者 汪伟 梁幼生 +1 位作者 戴建荣 黄轶昕 《生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期4235-4245,共11页

中国南水北调工程是缓解北方缺水和生态环境恶化的重大战略性工程。从长江下游引水北上的南水北调东线工程,因其引水口处在有日本血吸虫中间宿主湖北钉螺孳生的江苏省江都市,并且输水干线将穿过我国钉螺分布区及其最北点的宝应县（北纬3... 中国南水北调工程是缓解北方缺水和生态环境恶化的重大战略性工程。从长江下游引水北上的南水北调东线工程,因其引水口处在有日本血吸虫中间宿主湖北钉螺孳生的江苏省江都市,并且输水干线将穿过我国钉螺分布区及其最北点的宝应县（北纬33°15′）进入钉螺非分布区。为探讨因南水北调将钉螺带到北方钉螺非分布区后,钉螺能否生存与繁殖并形成新有螺区,研究沿工程输水干线在江苏徐州（北纬34°21′）和山东济宁（北纬35°23′）现场设点,采用螺笼放养定量观察法,对北移钉螺生存繁殖力及其子代钉螺的适应性作了为期8 a的纵向观察;采用组织学、组织化学、酶组织化学及电镜技术,观察了北移钉螺生殖腺变化。结果：北移钉螺及其子代在徐州存活时间不超过8 a,在济宁存活时间不超过1.5 a;钉螺北移3～6个月后,其雌、雄生殖腺均呈萎缩状,相关代谢酶和组化成分含量出现异常变化。研究认为,南水北调若将钉螺移至北纬33°15′～34°21′地区,钉螺虽然能存活一定时间,但其繁殖力逐年下降,种群呈逐渐消亡趋势;若移至北纬35°23′以北地区,钉螺则难以存活。因而,随南水北调移至北纬33°15′以北地区的钉螺难以正常生存繁殖形成新的有螺区。 展开更多

关键词 南水北调工程 湖北钉螺 分布 生态学

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不同气候变化情景下中国血吸虫病传播的范围与强度预估 被引量：18

12

作者 杨坤 潘婕 +3 位作者 杨国静 李石柱 许吟隆 周晓农 《气候变化研究进展》 CSCD 2010年第4期248-253,共6页

旨在采用区域气候模型PRECIS模拟的A2、B2两种温室气体排放情景下,预估2050年时段(2046—2050年)和2070年时段(2066—2070年)我国血吸虫病的传播范围和强度的变化状况。结果表明,相对2005年时段(1991—2005年),2050年和2070年时段A2、B... 旨在采用区域气候模型PRECIS模拟的A2、B2两种温室气体排放情景下,预估2050年时段(2046—2050年)和2070年时段(2066—2070年)我国血吸虫病的传播范围和强度的变化状况。结果表明,相对2005年时段(1991—2005年),2050年和2070年时段A2、B2情景下血吸虫病分布范围的北界线出现北移,在中国东部尤其是江苏和安徽省境内北移明显。2050年时段,A2、B2情景下的血吸虫病潜在北界线分布相似。长江、洞庭湖及鄱阳湖周围的血吸虫传播指数明显上升,以洞庭湖周围与湖北省内的长江沿线区域上升更加明显。2070年时段,A2情景下血吸虫病潜在北界线的北移趋势明显大于B2情景,进入到山东省境内。血吸虫传播指数进一步增加,A2情景增加的幅度明显大于B2情景。总之,在未考虑将来的适应措施与其他环境因素对血吸虫病传播影响的前提下,A2、B2情景下的血吸虫病的流行区分布和传播指数都将发生明显变化,其中A2情景对我国血吸虫病流行的影响程度大于B2情景。 展开更多

关键词 气候变化 传播范围 传播强度 血吸虫病 预估 中国

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重组日本血吸虫中国大陆株磷酸丙糖异构酶蛋白质表达、纯化及特性分析 被引量：14

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作者 余传信 朱荫昌 +3 位作者 殷旭仁 华万全 司进 管晓虹 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1999年第4期31-33,共3页

磷酸丙糖异构酶（ＴＰＩ）是已被公认的血吸虫病疫苗候选分子之一，本研究将日本血吸虫中国大陆株ＴＰＩ分子基因ＤＮＡ片段定向克隆到表达载体ｐＧＥＸ－４Ｔ－３（编码２６ｋＤａ的ＧＳＴ蛋白）中，构建重组表达质粒，然后转化大肠杆... 磷酸丙糖异构酶（ＴＰＩ）是已被公认的血吸虫病疫苗候选分子之一，本研究将日本血吸虫中国大陆株ＴＰＩ分子基因ＤＮＡ片段定向克隆到表达载体ｐＧＥＸ－４Ｔ－３（编码２６ｋＤａ的ＧＳＴ蛋白）中，构建重组表达质粒，然后转化大肠杆菌ＢＬ２１感受态细胞，阳性克隆用ＩＰＴＧ诱导，阳性菌株可表达分子量约５５ｋＤａ的融合蛋白（ＧＳＴ－ＴＰＩ），此融合蛋白可与ＧｌｕｔａｔｈｉｏｎｅＳｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ结合成复合物，用凝血酶切割融合蛋白复合物，获得分子量约２８ｋＤａ的重组表达ＴＰＩ分子。重组ＴＰＩ分子具有磷酸丙糖异构酶活性，并能被日本血吸虫重感染兔血清，血吸虫病人血清所识别。重组ＴＰＩ免疫家兔产生抗体的效价最高可达１∶２５６００，该血清抗体能识别日本血吸虫中国大陆株成虫抗原中分子量约２８ｋＤａ的蛋白条带。 展开更多

关键词 日本血吸虫 磷酸丙糖异构酶 TPI蛋白

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新发展晚期血吸虫病患者血清肽谱分析 被引量：2

14

作者 黄玉政 华海涌 +3 位作者 殷安华 徐敏皋 周正元 尤璐 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期576-579,共4页

目的 ：分析新发展晚期血吸虫病患者血清多肽,筛选有潜在应用价值的标志蛋白,为其诊断与发病机制研究奠定基础。方法：采集新发展晚期血吸虫病患者与健康人血清,利用包被有弱阳离子的磁珠富集纯化血清多肽,应用基质辅助激光解析电离时... 目的 ：分析新发展晚期血吸虫病患者血清多肽,筛选有潜在应用价值的标志蛋白,为其诊断与发病机制研究奠定基础。方法：采集新发展晚期血吸虫病患者与健康人血清,利用包被有弱阳离子的磁珠富集纯化血清多肽,应用基质辅助激光解析电离时间飞行质谱（MALDI-TOF-MS）Flex分析技术结合Mascot生物信息学分析血清多肽指纹图谱。结果：与健康对照组比较,在0.8~13.0 ku区段,新发展晚期血吸虫病患者血清中m/z 2 082、4 282多肽表达上调（P〈0.01）,2 661、2 991、3 241、5 337、5 906多肽表达下调（P〈0.05）;常规晚期血吸虫病患者血清中m/z 2 662、4 209、5 337与5 906处显著下调,2 082处显著上调。结论：m/z3 241、4 282血清差异多肽对新发展晚期血吸虫病患者的诊断可能具有潜在应用价值,对该病发生发展的机制也奠定了理论基础。 展开更多

关键词 新发展晚期血吸虫病 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 血清多肽

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日本血吸虫毛蚴对不同密度和距离湖北钉螺易感性的初步实验观察 被引量：1

15

作者 汪伟 李洪军 +5 位作者 李幼子 邢云天 曲国立 魏剑英 戴建荣 梁幼生 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期64-68,共5页

为探讨日本血吸虫(Schistosoma japonicum)毛蚴对不同密度、不同距离湖北钉螺(Oncomelania hupensis)易感性,在现场环境下,采用20 000条新鲜孵化出的日本血吸虫毛蚴分别感染1、2、3、5 m处的湖北钉螺,每处钉螺分为5、10、50、100只/袋4... 为探讨日本血吸虫(Schistosoma japonicum)毛蚴对不同密度、不同距离湖北钉螺(Oncomelania hupensis)易感性,在现场环境下,采用20 000条新鲜孵化出的日本血吸虫毛蚴分别感染1、2、3、5 m处的湖北钉螺,每处钉螺分为5、10、50、100只/袋4个密度组,感染4 h后带回实验室饲养,8周后解剖观察钉螺感染情况。结果发现,距离1、2、3、5 m,密度5、10、50、100只/袋4个组钉螺感染率分别为7.06%、4.35%、2.47%和1.23%;4.55%、4.44%、4.11%和2.27%;2.62%、1.58%、1.29%和1.1%;2.36%、4.04%、2.73%和1.5%。研究表明,钉螺感染概率与距毛蚴投放的距离成反比;但是,未得出钉螺感染率与钉螺密度之间的线性关系。 展开更多

关键词 日本血吸虫(Schistosoma japonicum) 湖北钉螺(Oncomelania hupensis) 毛蚴 密度 距离

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三种抗原用于斑点免疫金银染色试验(Dot-IGSS)诊断华支睾吸虫病的研究 被引量：4

16

作者 郑葵阳 杜文平 +1 位作者 郑霞 吴中兴 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1993年第5期25-27,共3页

应用斑点免疫金银染色技术(Dot-IGSS),以华支睾吸虫成虫抗原(AWA)、尿素溶解性成虫抗原(CWU)和硫酸铵沉淀成虫抗原(AW)诊断华支睾吸虫病,60例血清抗体检出率均达100.0％,与正常人血清反应(60例)阴性符合率为93.3～96.6％,与日本血吸虫病... 应用斑点免疫金银染色技术(Dot-IGSS),以华支睾吸虫成虫抗原(AWA)、尿素溶解性成虫抗原(CWU)和硫酸铵沉淀成虫抗原(AW)诊断华支睾吸虫病,60例血清抗体检出率均达100.0％,与正常人血清反应(60例)阴性符合率为93.3～96.6％,与日本血吸虫病人(60例)的交叉反应为0～5.0％,与囊虫病人(30例)和肝炎病人(15例)的交叉反应分别为3.3～6.7％和0。各抗原间未见显著性差异(P>0.05)。但与混合阳性血清反应,AW活性似较AWA和CWU强。 展开更多

关键词 抗原 异形吸虫病 免疫诊断

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花生四烯酸对小鼠日本血吸虫病治疗效果观察 被引量：4

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作者 汤宪时 赵松 +3 位作者 熊春蓉 蒋甜甜 仝德胜 杨坤 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期722-727,共6页

目的观察花生四烯酸对小鼠体内日本血吸虫的杀虫效果。方法小鼠感染日本血吸虫尾蚴后,被随机分为给药组、溶剂组和未处理组。给药组小鼠在不同给药时间点,以300 mg/kg的剂量连续2 d或连续7 d灌服花生四烯酸溶液,溶剂组小鼠在相应时间点... 目的观察花生四烯酸对小鼠体内日本血吸虫的杀虫效果。方法小鼠感染日本血吸虫尾蚴后,被随机分为给药组、溶剂组和未处理组。给药组小鼠在不同给药时间点,以300 mg/kg的剂量连续2 d或连续7 d灌服花生四烯酸溶液,溶剂组小鼠在相应时间点灌服玉米油,各组小鼠于感染后42 d解剖,收集小鼠体内成虫、肝内虫卵并计数,计算减虫率和减卵率。结果300 mg/kg花生四烯酸对小鼠体内日本血吸虫成虫(28~35 d)有杀虫效果,减虫率超过40%,肝内减卵率超过70%,与溶剂组的差异均有统计学意义(P<0.05)。300 mg/kg花生四烯酸对小鼠体内童虫期(1~28 d)日本血吸虫没有明显的杀虫效果。结论花生四烯酸对日本血吸虫成虫有杀虫作用,具有被用于日本血吸虫病药物治疗的潜力。 展开更多

关键词 日本血吸虫 花生四烯酸 效果

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荧光实时定量PCR定量水体中日本血吸虫尾蚴方法的建立 被引量：3

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作者 王本敬 王文波 +5 位作者 周霞 陈艳勤 张静 刘晨晨 梁幼生 诸葛洪祥 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1075-1081,共7页

目的建立快速、高效、特异的定量水体中尾蚴的数量和检测水体中日本血吸虫尾蚴残余基因组DNA的方法,来评估水体受日本血吸虫尾蚴污染的程度。方法根据日本血吸虫基因组DNA中的3个多拷贝序列Sjrh1.0(序列号:U92488.1)、18S小亚基单位核... 目的建立快速、高效、特异的定量水体中尾蚴的数量和检测水体中日本血吸虫尾蚴残余基因组DNA的方法,来评估水体受日本血吸虫尾蚴污染的程度。方法根据日本血吸虫基因组DNA中的3个多拷贝序列Sjrh1.0(序列号:U92488.1)、18S小亚基单位核糖体核酸基因(18SrRNA)序列(序列号:AY157226.1)和逆转录转座子SjR2的G55A序列(G55A)(序列号:AF412221.1),设计常规PCR引物和实时定量PCR引物,选取较好的靶序列建立SYBR GreenI实时定量PCR方法,绘制尾蚴数的对数与Ct值的标准曲线,并对疫水中日本血吸虫尾蚴残余的基因组DNA进行检测。结果尾蚴数的对数与Ct值的标准曲线有良好的线性关系,相关系数r2为0.918 6,重复性良好。结论本方法特异性高,灵敏,可定量水体中尾蚴数,对疫水检测有一定的预警作用。 展开更多

关键词 日本血吸虫 尾蚴 荧光实时定量PCR 预警

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青蒿琥酯和双氢青蒿素对华支睾吸虫所致小鼠肝纤维化的治疗作用研究 被引量：1

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作者 汤宪时 梁幼生 +3 位作者 许永良 吴潇潇 季文翔 仝德胜 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期1098-1105,共8页

目的观察和评估青蒿琥酯(ART)和双氢青蒿素(DHA)对华支睾吸虫所致小鼠肝纤维化的治疗作用。方法BALB/c小鼠35只,每只小鼠灌胃感染30个华支睾吸虫囊蚴,饲养30 d,建立小鼠华支睾吸虫病肝纤维化模型,随机分为7组,即青蒿琥酯组(ART组)、氯... 目的观察和评估青蒿琥酯(ART)和双氢青蒿素(DHA)对华支睾吸虫所致小鼠肝纤维化的治疗作用。方法BALB/c小鼠35只,每只小鼠灌胃感染30个华支睾吸虫囊蚴,饲养30 d,建立小鼠华支睾吸虫病肝纤维化模型,随机分为7组,即青蒿琥酯组(ART组)、氯化钠组(NaCl组)、吡喹酮组(PZQ组)、吡喹酮+青蒿琥酯组[(PZQ+ART)组]、双氢青蒿素组(DHA组)、聚氧乙烯蓖麻油组(EL组)、吡喹酮+双氢青蒿素组[(PZQ+DHA)组],每组5只小鼠。采用腹腔注射法(ART)和经口灌胃法(DHA),用药剂量都为20 mg/kg,每天1次,连续用药30 d,合并PZQ用药组于感染华支睾吸虫囊蚴30 d后300 mg/kg PZQ连续灌胃治疗2次。取各组小鼠肝组织,应用苏木精-伊红(HE)和马松(Masson)染色显示小鼠肝组织病理学变化和胶原增生情况,应用荧光定量PCR和Western Blot检测肝组织α-SMA、TGF-β、Col I、Col III mRNA和蛋白表达,应用肝功检测试剂盒测定小鼠血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)和碱性磷酸酶(ALP)含量。结果HE和Masson染色显示小鼠感染华支睾吸虫囊蚴30 d后肝脏汇管区有炎性细胞浸润,周围出现大量胶原纤维,有肝纤维化形成;Western Blot结果显示,感染组小鼠肝脏Col III表达量(1.26±0.01)高于未感染组(0.75±0.14)(t=2.01,P<0.05)。荧光定量PCR结果显示,接受ART和DHA治疗的小鼠与各自对照组相比,各纤维化相关基因mRNA表达水平没有显著差异。Western Blot结果显示,接受ART治疗后,ART组(0.32±0.04、0.81±0.09)和(PZQ+ART)组(0.16±0.01、1.02±0.18)的Col I、Col III蛋白表达水平都低于NaCl组(1.54±0.38、2.24±0.35),而且PZQ+ART组的Col I表达水平低于ART组(t=1.98,P<0.05);接受DHA治疗的小鼠α-SMA、Col I蛋白表达水平与对照组比较没有显著差异。肝功能检测结果显示,ART组(197.75±8.84)U/L和(PZQ+ART)组(234.66±42.54)U/L血清AST水平与NaCl组(150±20.29)U/L比较明显升高;(PZQ+DHA)组(29±12.98)U/L血清ALT水平较EL组(107.25±54.26)U/L和PZQ组(58±8.71)U/L降低,(PZQ+DHA)组(143±27.43)U/L血清AST水平较EL组(207±42.48)U/L降低(t=0.75,P<0.05)。结论青蒿琥酯(ART)在20 mg/kg剂量下对华支睾吸虫所致小鼠肝纤维化有治疗作用,合并杀虫抗纤维化效果更好,但对肝功有一定影响。双氢青蒿素(DHA)在20 mg/kg剂量下没有明显改善小鼠肝纤维化,但合并吡喹酮(PZQ)可以起到一定程度保肝作用。 展开更多

关键词 华支睾吸虫 肝纤维化 青蒿琥酯 双氢青蒿素

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检测水体日本血吸虫毛蚴PCR方法的建立

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作者 王廷安 沈海英 +4 位作者 申云侠 王文波 王本敬 梁幼生 诸葛洪祥 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期562-564,共3页

目的建立一种灵敏、特异的痕量检测日本血吸虫毛蚴的PCR方法。方法取感染6～8w日本血吸虫的小鼠肝脏,碾磨后沉淀,孵化并利用间接连续离心法富集毛蚴,采用蛋白酶K-苯酚法提取毛蚴基因组DNA。登陆GenBank查询获得日本血吸虫保守序列18S小... 目的建立一种灵敏、特异的痕量检测日本血吸虫毛蚴的PCR方法。方法取感染6～8w日本血吸虫的小鼠肝脏,碾磨后沉淀,孵化并利用间接连续离心法富集毛蚴,采用蛋白酶K-苯酚法提取毛蚴基因组DNA。登陆GenBank查询获得日本血吸虫保守序列18S小亚基单位核糖体脱氧核酸(18SrDNA)基因,利用引物设计软件PrimerPremier5.0和Oligo6自主设计一对引物,建立检测日本血吸虫毛蚴的PCR方法。梯度稀释血吸虫毛蚴基因组DNA进行PCR方法的灵敏性试验,设置阴性对照,PCR产物通过电泳鉴定。结果 PCR扩增日本血吸虫毛蚴得到特异性DNA片段,片段长度为463bp,阴性对照组无扩增产物。PCR法可检测出日本血吸虫毛蚴DNA的最低浓度为62.5pg/μL。结论建立的检测日本血吸虫毛蚴PCR方法灵敏、特异,具有一定的预警作用。 展开更多

关键词 日本血吸虫 毛蚴 PCR 痕量检测 预警

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