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用无细胞蛋白合成系统重组表达恶性疟原虫蛋白的研究
被引量：
1
1
作者
曹俊
金子修
+4 位作者
坪井敬文
鸟居本美
诸葛洪祥
夏超明
高琪
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第9期816-819,823,共5页
目的探索无细胞麦芽体外蛋白合成系统重组表达恶性疟原虫蛋白可行性,并检测用重组蛋白制备的免疫血清对原虫蛋白的特异性反应。方法将目的蛋白PfRON2的部分片断克隆连接到重组表达载体后,用无细胞麦芽体外蛋白合成系统进行重组表达并纯...
目的探索无细胞麦芽体外蛋白合成系统重组表达恶性疟原虫蛋白可行性,并检测用重组蛋白制备的免疫血清对原虫蛋白的特异性反应。方法将目的蛋白PfRON2的部分片断克隆连接到重组表达载体后,用无细胞麦芽体外蛋白合成系统进行重组表达并纯化,用纯化的重组蛋白免疫小鼠制备免疫血清,并用免疫斑点实验(Western blot)和免疫荧光抗体实验(IFA)检测该血清对恶性疟蛋白的特异性反应。结果成功克隆的重组质粒能在无细胞麦芽体外蛋白合成系统中生成大小相符的GST融合蛋白,并能较好地纯化。免疫斑点实验中,用该重组蛋白制备的免疫血清能检测到重组蛋白和恶性疟目标蛋白,免疫荧光抗体实验显示该免疫血清能成功地标记恶性疟目标蛋白所在部位。结论无细胞麦芽体外蛋白合成系统可应用于恶性疟原虫蛋白的重组表达,获得的免疫血清能特异性识别疟原虫蛋白。
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关键词
无细胞蛋白合成
恶性疟原虫
重组表达
免疫血清
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职称材料
沉默Med19对人乳腺癌裸鼠成瘤的影响
被引量：
4
2
作者
王晓艳
华东
+2 位作者
李莉华
高琪
郭子健
《实用医学杂志》
CAS
北大核心
2011年第17期3109-3112,共4页
目的:通过观察慢病毒介导的siRNA沉默Med19基因对人乳腺癌裸鼠成瘤的影响,探讨Med19在乳腺癌发生发展中的作用。方法:利用前期已稳定感染Med19-siRNA慢病毒载体的人乳腺癌MCF-7细胞,采用Westernblotting方法检测Med19蛋白的沉默效果。...
目的:通过观察慢病毒介导的siRNA沉默Med19基因对人乳腺癌裸鼠成瘤的影响,探讨Med19在乳腺癌发生发展中的作用。方法:利用前期已稳定感染Med19-siRNA慢病毒载体的人乳腺癌MCF-7细胞,采用Westernblotting方法检测Med19蛋白的沉默效果。稳定感染Med19-siRNA慢病毒载体的人乳腺癌MCF-7细胞接种于BALB/c裸鼠背侧皮下,观察裸鼠成瘤情况和移植瘤生长情况,并绘制生长曲线。以慢病毒空载体感染组作为阴性对照组。结果:所构建的Med19-siRNA慢病毒载体能有效抑制MCF-7细胞Med19蛋白的表达,蛋白表达水平下降了62%,Med19基因沉默组较空载体慢病毒感染组瘤体生长速度慢(t值分别为4.843、6.291、5.317,均P<0.01),肿瘤终体积分别为(620.08±263.07)mm3和(1406.77±351.14)mm3,终重量分别为(0.20±0.18)g和(0.67±0.27)g,差异有统计学意义(t值分别为4.399、3.615,均P<0.01)。结论:Med19基因沉默能有效抑制人乳腺癌裸鼠成瘤和移植瘤生长,表明Med19在乳腺癌发生发展中起到重要作用,并有可能成为乳腺癌靶向治疗的潜在靶点。
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关键词
乳腺肿瘤
MED19
RNA干扰
慢病毒
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职称材料
题名
用无细胞蛋白合成系统重组表达恶性疟原虫蛋白的研究
被引量：
1
1
作者
曹俊
金子修
坪井敬文
鸟居本美
诸葛洪祥
夏超明
高琪
机构
苏州大学医学院基础医学系
日本长崎大学热带病
研究所
日本爱媛大学无细胞技术
研究
中心
日本爱媛大学分子
寄生虫
教研室
江苏省血吸虫寄生虫病防治研究所
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第9期816-819,823,共5页
基金
国家自然科学基金资助(No.30700695)
文摘
目的探索无细胞麦芽体外蛋白合成系统重组表达恶性疟原虫蛋白可行性,并检测用重组蛋白制备的免疫血清对原虫蛋白的特异性反应。方法将目的蛋白PfRON2的部分片断克隆连接到重组表达载体后,用无细胞麦芽体外蛋白合成系统进行重组表达并纯化,用纯化的重组蛋白免疫小鼠制备免疫血清,并用免疫斑点实验(Western blot)和免疫荧光抗体实验(IFA)检测该血清对恶性疟蛋白的特异性反应。结果成功克隆的重组质粒能在无细胞麦芽体外蛋白合成系统中生成大小相符的GST融合蛋白,并能较好地纯化。免疫斑点实验中,用该重组蛋白制备的免疫血清能检测到重组蛋白和恶性疟目标蛋白,免疫荧光抗体实验显示该免疫血清能成功地标记恶性疟目标蛋白所在部位。结论无细胞麦芽体外蛋白合成系统可应用于恶性疟原虫蛋白的重组表达,获得的免疫血清能特异性识别疟原虫蛋白。
关键词
无细胞蛋白合成
恶性疟原虫
重组表达
免疫血清
Keywords
cell-free protein expression system
Plasmodium falciparum
recombinant protein
antiserum
分类号
R382.3 [医药卫生—医学寄生虫学]
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职称材料
题名
沉默Med19对人乳腺癌裸鼠成瘤的影响
被引量：
4
2
作者
王晓艳
华东
李莉华
高琪
郭子健
机构
苏州大学附属第四医院肿瘤
研究所
江苏省
血吸虫
病
寄生虫
病防治
研究所
出处
《实用医学杂志》
CAS
北大核心
2011年第17期3109-3112,共4页
基金
无锡市卫生局项目(编号:XM1012)
文摘
目的:通过观察慢病毒介导的siRNA沉默Med19基因对人乳腺癌裸鼠成瘤的影响,探讨Med19在乳腺癌发生发展中的作用。方法:利用前期已稳定感染Med19-siRNA慢病毒载体的人乳腺癌MCF-7细胞,采用Westernblotting方法检测Med19蛋白的沉默效果。稳定感染Med19-siRNA慢病毒载体的人乳腺癌MCF-7细胞接种于BALB/c裸鼠背侧皮下,观察裸鼠成瘤情况和移植瘤生长情况,并绘制生长曲线。以慢病毒空载体感染组作为阴性对照组。结果:所构建的Med19-siRNA慢病毒载体能有效抑制MCF-7细胞Med19蛋白的表达,蛋白表达水平下降了62%,Med19基因沉默组较空载体慢病毒感染组瘤体生长速度慢(t值分别为4.843、6.291、5.317,均P<0.01),肿瘤终体积分别为(620.08±263.07)mm3和(1406.77±351.14)mm3,终重量分别为(0.20±0.18)g和(0.67±0.27)g,差异有统计学意义(t值分别为4.399、3.615,均P<0.01)。结论:Med19基因沉默能有效抑制人乳腺癌裸鼠成瘤和移植瘤生长,表明Med19在乳腺癌发生发展中起到重要作用,并有可能成为乳腺癌靶向治疗的潜在靶点。
关键词
乳腺肿瘤
MED19
RNA干扰
慢病毒
Keywords
Breast neoplasms
Med19
RNA interference
Lentivirus
分类号
R737.9 [医药卫生—肿瘤]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
用无细胞蛋白合成系统重组表达恶性疟原虫蛋白的研究
曹俊
金子修
坪井敬文
鸟居本美
诸葛洪祥
夏超明
高琪
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008
1
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职称材料
2
沉默Med19对人乳腺癌裸鼠成瘤的影响
王晓艳
华东
李莉华
高琪
郭子健
《实用医学杂志》
CAS
北大核心
2011
4
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