目的 探讨Hank′s平衡盐溶液(Hank′s balanced salt solution,HBSS)诱导的饥饿环境对肺癌细胞凋亡相关分子高迁移率组蛋白B1(HMGB1)表达的调控作用,并分析肺癌患者血清HMGB1水平在肺癌筛查中的应用价值。方法 设置HBSS处理组(使用HBSS...目的 探讨Hank′s平衡盐溶液(Hank′s balanced salt solution,HBSS)诱导的饥饿环境对肺癌细胞凋亡相关分子高迁移率组蛋白B1(HMGB1)表达的调控作用,并分析肺癌患者血清HMGB1水平在肺癌筛查中的应用价值。方法 设置HBSS处理组(使用HBSS更换完全培养基后继续培养)与对照组(使用完全培养基进行培养)。利用HBSS处理Lewis肺癌细胞12 h后,采用分光光度法检测肺癌细胞中含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)活性。利用HBSS处理Lewis肺癌细胞 0.5 h 后,采用流式细胞术检测饥饿条件下肺癌细胞中氧化应激效应分子——活性氧(ROS)的表达水平。利用HBSS处理Lewis肺癌细胞0、4、8和12 h后,使用western blot检测细胞内HMGB1蛋白的表达水平。采用ELISA法检测肺癌患者( n =50)血清中HMGB1的表达水平,并分析其与血清肿瘤标志物水平间的相关性。结果 与对照组(0.14±0.01 U/L)相比,HBSS刺激 12 h 后,Lewis肺癌细胞中Caspase-3活性(0.24±0.01 U/L)明显升高( P <0.01)。流式细胞术检测结果表明,与对照组(MFI:63.00±4.58)相比,HBSS刺激0.5 h后,Lewis肺癌细胞中ROS水平(MFI:293.00±9.54)上调( P <0.01)。western blot结果显示,HBSS刺激0、4、8和12 h后,Lewis肺癌细胞中HMGB1蛋白的表达水平明显升高( P 均<0.01)。ELISA法结果显示,与健康人对照(3.36±0.20 ng/mL)相比,肺癌患者血清中HMGB1的水平(12.76±0.74 ng/mL)明显升高( P <0.05),且与血清CEA水平呈正相关( r =0.44, P <0.01)。结论 肿瘤饥饿环境能够促进肺癌细胞中凋亡相关分子HMGB1的表达,肺癌患者血清HMGB1水平与肺癌发展密切相关。展开更多
文摘目的 探讨Hank′s平衡盐溶液(Hank′s balanced salt solution,HBSS)诱导的饥饿环境对肺癌细胞凋亡相关分子高迁移率组蛋白B1(HMGB1)表达的调控作用,并分析肺癌患者血清HMGB1水平在肺癌筛查中的应用价值。方法 设置HBSS处理组(使用HBSS更换完全培养基后继续培养)与对照组(使用完全培养基进行培养)。利用HBSS处理Lewis肺癌细胞12 h后,采用分光光度法检测肺癌细胞中含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)活性。利用HBSS处理Lewis肺癌细胞 0.5 h 后,采用流式细胞术检测饥饿条件下肺癌细胞中氧化应激效应分子——活性氧(ROS)的表达水平。利用HBSS处理Lewis肺癌细胞0、4、8和12 h后,使用western blot检测细胞内HMGB1蛋白的表达水平。采用ELISA法检测肺癌患者( n =50)血清中HMGB1的表达水平,并分析其与血清肿瘤标志物水平间的相关性。结果 与对照组(0.14±0.01 U/L)相比,HBSS刺激 12 h 后,Lewis肺癌细胞中Caspase-3活性(0.24±0.01 U/L)明显升高( P <0.01)。流式细胞术检测结果表明,与对照组(MFI:63.00±4.58)相比,HBSS刺激0.5 h后,Lewis肺癌细胞中ROS水平(MFI:293.00±9.54)上调( P <0.01)。western blot结果显示,HBSS刺激0、4、8和12 h后,Lewis肺癌细胞中HMGB1蛋白的表达水平明显升高( P 均<0.01)。ELISA法结果显示,与健康人对照(3.36±0.20 ng/mL)相比,肺癌患者血清中HMGB1的水平(12.76±0.74 ng/mL)明显升高( P <0.05),且与血清CEA水平呈正相关( r =0.44, P <0.01)。结论 肿瘤饥饿环境能够促进肺癌细胞中凋亡相关分子HMGB1的表达,肺癌患者血清HMGB1水平与肺癌发展密切相关。
