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乳腺癌组织中Survivin表达水平的定量检测及其临床价值 被引量:5
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作者 秦建伟 张建 +2 位作者 唐金海 刘敏 赵建华 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2008年第24期1407-1410,共4页
目的:建立准确定量survivin表达水平的实时荧光RT-PCR方法,探讨其在乳腺癌组织的表达及与VEGF、CerbB-2和临床病理参数间的关系。方法:收集39例乳腺癌组织及其癌旁组织,利用所建方法和免疫组化法分别检测survivinmRNA的表达水平以及VEGF... 目的:建立准确定量survivin表达水平的实时荧光RT-PCR方法,探讨其在乳腺癌组织的表达及与VEGF、CerbB-2和临床病理参数间的关系。方法:收集39例乳腺癌组织及其癌旁组织,利用所建方法和免疫组化法分别检测survivinmRNA的表达水平以及VEGF和CerbB-2蛋白的表达。结果:癌组织survivin表达的中位数水平为225393(75%CI,44366~581709)拷贝/μg总RNA,显著高于癌旁组织(2,4119拷贝/μg总RNA;75%CI,5082~61081;P<0.0001)。同一患者癌组织survivin表达量远大于其癌旁组织,两者比值的中位数是22.5(75%CI,8.4~71.3);癌组织survivin表达水平与肿块大小(P=0.036)、癌浸润分级(P<0.0001)、腋淋巴结转移(P=0.005)、雌激素受体状态(P=0.001)以及VEGF(P<0.0001)和CerbB-2(P=0.009)蛋白的表达具有相关性。结论:建立survivin mRNA定量新方法,检测结果直观可靠。Survivin在乳腺癌组织的表达量明显增高且与VEGF、CerbB-2表达正相关,可能有助于乳腺癌的靶向或联合靶向治疗。 展开更多
关键词 乳腺癌 实时RT-PCR SURVIVIN VEGF CERBB-2
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5-Aza-CdR对乳腺癌MCF-7细胞增殖及抑癌基因RASSF2A表达的影响 被引量:6
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作者 马腾飞 韦达 +2 位作者 钟山亮 张晓慧 赵建华 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期152-155,共4页
目的研究5-氮-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对乳腺癌MCF-7细胞增殖及抑癌基因RASSF2A表达的影响。方法用不同浓度的5-Aza-CdR处理MCF-7细胞12-96h,四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法和流式细胞仪分别检测药物处理前后细胞的增殖活性和凋亡率;... 目的研究5-氮-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对乳腺癌MCF-7细胞增殖及抑癌基因RASSF2A表达的影响。方法用不同浓度的5-Aza-CdR处理MCF-7细胞12-96h,四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法和流式细胞仪分别检测药物处理前后细胞的增殖活性和凋亡率;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各阶段RASSF2A mRNA的表达水平,甲基化特异性PCR(MSP)观察该基因甲基化的改变。结果用1、5、10μmol/L 5-Aza-CdR处理MCF-7细胞24、48、72和96h后,细胞生长均受到抑制,呈时间和剂量依赖性。流式细胞仪分析表明,3种药物浓度处理细胞72h后凋亡率增加,5和10μmol/L组凋亡率分别为(25.5±3.5)%和(58.2±3.2)%,与对照组(13.4±2.0)%相比差异有统计学意义(P〈0.05)。RT-PCR检测显示,不同浓度药物处理MCF-7细胞后,RASSF2A mRNA表达水平随着药物浓度的增加而逐步上调;进一步MSP检测发现这些癌细胞中RASSF2A甲基化状态得到了不同程度的逆转。结论 5-Aza-CdR可通过逆转RASSF2A基因异常甲基化导致该基因表达上调来抑制MCF-7细胞增殖,RASSF2A是一个乳腺癌相关抑癌基因。 展开更多
关键词 RASSF2A 甲基化 5-AZA-CDR 乳腺癌
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人乳腺癌多西紫杉醇耐药细胞株的建立及特性 被引量:6
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作者 李文静 张磊 +4 位作者 赖娅娜 唐金海 钟山亮 恽文 赵建华 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第21期2297-2299,共3页
目的建立人乳腺癌多西紫杉醇(Docetaxel,Doc)耐药细胞模型MCF-7/Doc,初步探讨其生物学特性。方法采用Doc低浓度逐步加量诱导法建立MCF-7/Doc耐药株;通过细胞形态学观察、生长曲线和群体倍增时间测定、MTT法药物敏感试验及流式细胞术评... 目的建立人乳腺癌多西紫杉醇(Docetaxel,Doc)耐药细胞模型MCF-7/Doc,初步探讨其生物学特性。方法采用Doc低浓度逐步加量诱导法建立MCF-7/Doc耐药株;通过细胞形态学观察、生长曲线和群体倍增时间测定、MTT法药物敏感试验及流式细胞术评价其生物学特性;实时荧光定量PCR和Western blot分别检测多药耐药基因MDR1mRNA和蛋白的表达。结果经10个月的诱导成功建立MCF-7/Doc细胞株,可在100 ng/ml Doc培养液中稳定生长,耐药指数为亲代敏感细胞MCF-7/S的33.3倍,对其他多种化疗药物呈交叉耐药状态。光镜下,药物处理后细胞变圆变小、核分裂象减少;MCF-7/Doc倍增时间较MCF-7/S延长[(41.6±1.6)h vs(30.6±1.1)h;P<0.01]。与亲代相比,耐药细胞处于G1期和G2期的细胞增加、S期减少;MDR1基因表达水平增高90.7倍,蛋白表达转为阳性,而雌激素受体阳性表达丢失。结论 MCF-7/Doc细胞具有典型的多药耐药性,MDR1基因和蛋白过表达是其获得性耐药的主要机制之一。 展开更多
关键词 乳腺癌细胞 多西紫杉醇 多药耐药 P糖蛋白
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MDR1基因多态性与乳腺癌紫杉联合蒽环类药物化疗疗效的关系 被引量:3
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作者 王健 唐金海 +5 位作者 钟山亮 赵建华 孙鹤庆 张凤霞 龚建平 季明华 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期15-19,共5页
目的:探讨多药耐药基因(MDR1)多态性对乳腺癌紫杉联合蒽环类(TA)化疗疗效的预测价值。方法:利用PCR—RFLP技术对142例乳腺癌患者进行MDR1基因变异检测,观察其多态性分布;并对其中接受TA方案的具有完整疗效评价资料的63例新辅助... 目的:探讨多药耐药基因(MDR1)多态性对乳腺癌紫杉联合蒽环类(TA)化疗疗效的预测价值。方法:利用PCR—RFLP技术对142例乳腺癌患者进行MDR1基因变异检测,观察其多态性分布;并对其中接受TA方案的具有完整疗效评价资料的63例新辅助化疗患者,开展MDR112外显子c1236T、21外显子G2677T/A和26外显子C3435T基因多态性与化{吁疗效的相关分析。结果:c1236T、G2677T/A和C3435T在142例中国汉族乳腺癌女性人群中的变异频率分别为70.7%、55.0%和46.5%。其中,3435TT基因型在63例新辅助化疗患者中表现出与TA疗效的关联,其有效率(23.1%)显著低于携带c等位基因的患者(73.5%;x^2=9.125,P=0.003)。3个位点多态之间存在连锁不均衡性,携带3435C-2677G单体型的患者,化疗有效率(72.1%)高于其他单体型携带者(40.0%;X^2=5.962,P=0.015),携带3435T-2677T或3435T-1236T单体型者,化疗有效率(54.3%或54.9%)低于对应的其他单体型携带者(82.4%和91.7%;x^2=4.128和X^2=4.118,P均为0.042);携带有3435T-2677T—1236T单体型者,化疗有效率(54.3%)低于其他单体型携带者(82.4%;X^2=4.128,P=-0.042)。结论:MDR1C3435T基因型及其与G2677T/A和(或)c1236T的单体型检测对于乳腺癌TA联合化疗疗效的预测具有重要参考价值。 展开更多
关键词 MDR1 多态性 乳腺癌 化疗疗效
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