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双荧光素酶报告系统鉴定hsa-miR-4443对TIMP2基因的调控作用
被引量：
1
1
作者
马腾飞
王金焱
+3 位作者
侯俊宸
王丹丹
赵建华
钟山亮
《华中科技大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第3期269-273,共5页
目的通过构建组织基质金属蛋白酶抑制剂-2(tissue inhibitor of metalloproteinase-2,TIMP2)荧光素酶报告基因载体,观察hsa-miR-4443对TIMP2的靶向调控作用。方法生物信息学软件预测hsa-miR-4443与TIMP2 3′端非翻译区(3′untranslated ...
目的通过构建组织基质金属蛋白酶抑制剂-2(tissue inhibitor of metalloproteinase-2,TIMP2)荧光素酶报告基因载体,观察hsa-miR-4443对TIMP2的靶向调控作用。方法生物信息学软件预测hsa-miR-4443与TIMP2 3′端非翻译区(3′untranslated region,3′UTR)的结合位点,设计合成包含hsa-miR-4443结合序列及突变序列的TIMP2基因片段,构建野生型和突变型双荧光素酶报告基因载体,分别与hsa-miR-4443模拟物和阴性对照序列共转染MDA-MB-231细胞,检测荧光素酶活性,观察hsa-miR-4443对TIMP2表达的影响。结果生物信息学分析显示在TIMP2 3′UTR有3个hsa-miR-4443的潜在结合位点,酶切和测序结果均提示3个结合位点的野生型和突变型荧光素酶报告载体构建成功。hsa-miR-4443可通过第1个结合位点抑制野生型TIMP2载体的荧光素酶的表达,而对突变型载体的荧光素酶表达无影响(P=0.002)。结论 hsa-miR-4443可以靶向调控TIMP2的表达。
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关键词
hsa-miR-4443
TIMP2
双荧光素酶报告系统
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职称材料
题名
双荧光素酶报告系统鉴定hsa-miR-4443对TIMP2基因的调控作用
被引量：
1
1
作者
马腾飞
王金焱
侯俊宸
王丹丹
赵建华
钟山亮
机构
华中科技
大学
同济医学院
附属
武汉
中心
医院
检验
科
江苏省
肿瘤
医院
(
南京医科大学
附属
肿瘤
医院
)普外科
江苏省
肿瘤
医院
(
南京医科大学
附属
肿瘤
医院
)
临床
检验中心
出处
《华中科技大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第3期269-273,共5页
基金
国家自然科学基金青年基金资助项目(No.81602551)
文摘
目的通过构建组织基质金属蛋白酶抑制剂-2(tissue inhibitor of metalloproteinase-2,TIMP2)荧光素酶报告基因载体,观察hsa-miR-4443对TIMP2的靶向调控作用。方法生物信息学软件预测hsa-miR-4443与TIMP2 3′端非翻译区(3′untranslated region,3′UTR)的结合位点,设计合成包含hsa-miR-4443结合序列及突变序列的TIMP2基因片段,构建野生型和突变型双荧光素酶报告基因载体,分别与hsa-miR-4443模拟物和阴性对照序列共转染MDA-MB-231细胞,检测荧光素酶活性,观察hsa-miR-4443对TIMP2表达的影响。结果生物信息学分析显示在TIMP2 3′UTR有3个hsa-miR-4443的潜在结合位点,酶切和测序结果均提示3个结合位点的野生型和突变型荧光素酶报告载体构建成功。hsa-miR-4443可通过第1个结合位点抑制野生型TIMP2载体的荧光素酶的表达,而对突变型载体的荧光素酶表达无影响(P=0.002)。结论 hsa-miR-4443可以靶向调控TIMP2的表达。
关键词
hsa-miR-4443
TIMP2
双荧光素酶报告系统
Keywords
hsa miR-4443
TIMP2
dual-luciferase reporter system
分类号
R3411 [医药卫生—基础医学]
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出处
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被引量
操作
1
双荧光素酶报告系统鉴定hsa-miR-4443对TIMP2基因的调控作用
马腾飞
王金焱
侯俊宸
王丹丹
赵建华
钟山亮
《华中科技大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2018
1
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