不同引物及数据分析方法对定量PCR结果的影响 被引量：18

1

作者 刘正霞 徐阳 +3 位作者 徐进梅 杨明夏 马磊 朱昌亮 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期1112-1117,共6页

目的:研究不同引物及数据分析方法对实时荧光定量PCR SYBR Green染料法检测基因表达差异结果分析的影响。方法:通过Primer Express 2.0软件对目的基因CCND1、C-JUN分别设计4对不同引物进行SYBR Green染料法定量PCR扩增,并分别使用2-△... 目的:研究不同引物及数据分析方法对实时荧光定量PCR SYBR Green染料法检测基因表达差异结果分析的影响。方法:通过Primer Express 2.0软件对目的基因CCND1、C-JUN分别设计4对不同引物进行SYBR Green染料法定量PCR扩增,并分别使用2-△△CT法、Pfaffl法及相对标准曲线法计算肺癌紫杉醇敏感细胞株及耐药细胞株间目的基因的表达差异,分析不同引物和数据计算方法对实验结果的影响。结果:统计学分析表明,引物的扩增效率对定量PCR结果分析有显著影响,不同引物特异性扩增得到的样本间表达倍数有显著差异(P<0.05)。3种计算方法中,Pfaffl法与相对标准曲线法无统计学差异(P>0.05),而2-△△CT法与其他2种方法均有显著差异(P<0.05)。结论:引物的选择对于定量PCR结果有显著影响;Pfaffl法是更准确,更合理的相对定量计算方法。 展开更多

关键词 实时荧光定量PCR 2^-△△CT法 Pfaffl法 相对标准曲线法 扩增效率

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白藜芦醇调控Th1和Th2应答抑制小鼠日本血吸虫病肝脏纤维化的研究 被引量：7

2

作者 张伟伟 朱继峰 +3 位作者 王任 高雅楠 张军峰 佟书娟 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1091-1097,共7页

目的探讨白藜芦醇对日本血吸虫病纤维化的作用,并分析其对Th1和Th2应答的影响。方法 45只C57BL/6小鼠感染日本血吸虫3周后,随机分为A、B、C 3组,A组为感染组,B组为灌胃白藜芦醇治疗组,C组为灌胃吡喹酮治疗组,另取15只正常C57BL/6小鼠为... 目的探讨白藜芦醇对日本血吸虫病纤维化的作用,并分析其对Th1和Th2应答的影响。方法 45只C57BL/6小鼠感染日本血吸虫3周后,随机分为A、B、C 3组,A组为感染组,B组为灌胃白藜芦醇治疗组,C组为灌胃吡喹酮治疗组,另取15只正常C57BL/6小鼠为健康对照D组。在感染第13周,取小鼠的肝脏,应用天狼猩红染色观察肝脏纤维化程度,并检测肝脏中IL-13、IFN-γ和TGF-β mRNA的表达情况。另取脾脏淋巴细胞,采用流式细胞术检测Th1和Th2细胞占总T淋巴细胞的比例。结果感染第13周,与A组相比,B组和C组小鼠肝脏纤维化程度明显减轻(P<0.01),B组小鼠的Th1细胞比例明显增高(P<0.05),Th2细胞比例明显降低(P<0.01),B组小鼠外周血清中的抗可溶性成虫抗原(SWA)的IgG2a明显增多(P<0.05),而抗可溶性虫卵抗原(SEA)的IgG1明显减少(P<0.01),B组小鼠肝脏中IFN-γ mRNA的表达量明显增高(P<0.05),而IL-13、TGF-β mRNA的表达水平明显降低(P<0.01)。结论白藜芦醇通过增强日本血吸虫感染小鼠的Th1应答,降低Th2应答,明显抑制日本血吸虫感染小鼠肝脏纤维化程度。 展开更多

关键词 日本血吸虫 白藜芦醇 吡喹酮 纤维化 TH1 TH2

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治疗自身免疫性疾病多肽药物的研究进展 被引量：4

3

作者 汪雪峰 董利阳 +2 位作者 王钧 倪鸿昌 苏川 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期732-735,共4页

近年来研究发现,靶向于特异表位的多肽药物治疗自身免疫病,可避免传统药物的非特异性免疫抑制,在自身免疫病动物模型及临床试验中显示出较好的治疗效果。该文从抑制自身免疫反应的候选多肽来源及其作用机制等方面,综述了近年来治疗自身... 近年来研究发现,靶向于特异表位的多肽药物治疗自身免疫病,可避免传统药物的非特异性免疫抑制,在自身免疫病动物模型及临床试验中显示出较好的治疗效果。该文从抑制自身免疫反应的候选多肽来源及其作用机制等方面,综述了近年来治疗自身免疫病多肽药物的研究进展和趋势,为全面深入了解自身免疫病免疫耐受机制及寻求新的治疗方法提供理论依据。 展开更多

关键词 自身免疫病 多肽 药物 治疗 研究进展 特异表位

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2008-2010年南京及周边地区儿童肺炎支原体感染情况分析 被引量：25

4

作者 王晓卫 钟天鹰 +2 位作者 岳玉林 陈晓军 苏川 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1463-1465,1537,共4页

目的:分析南京及周边地区儿童肺炎支原体(MP)感染的流行病学特征,为该病的预防和治疗提供帮助。方法:采用血清MP被动凝集法对2008年1月至2010年12月在南京医科大学附属南京儿童医院门诊就诊的急性呼吸道感染患儿进行MP-IgM抗体检测,并... 目的:分析南京及周边地区儿童肺炎支原体(MP)感染的流行病学特征,为该病的预防和治疗提供帮助。方法:采用血清MP被动凝集法对2008年1月至2010年12月在南京医科大学附属南京儿童医院门诊就诊的急性呼吸道感染患儿进行MP-IgM抗体检测,并结合病例资料进行分析。结果:三年间共检测血清标本31843例,总阳性率为41.35%;2008年阳性率最高,达45.08%;≤1岁、1-3岁、3-5岁、>5岁的患儿MP-IgM抗体阳性率分别为9.90%、32.48%、38.24%、57.57%;男性患儿为36.08%,女性患儿为48.16%;春、夏、秋、冬四季阳性率分别为39.56%、36.51%、42.11%、48.69%。结论:MP可能为南京地区儿童呼吸道感染的重要病原之一。MP感染全年均可发生,尤以冬季感染率为高;婴儿感染率较低,而学龄儿童感染率最高;女性患儿感染率高于男性患儿。本研究的结果初步揭示了南京及周边地区MP感染的流行病学特征,对该地区MP的预防和治疗有一定价值。 展开更多

关键词 肺炎支原体 儿童 呼吸道感染

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干扰素诱导蛋白10对结核性胸膜炎的诊断价值 被引量：7

5

作者 吴静 徐建 +1 位作者 张映铭 王彩英 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1432-1434,共3页

目的:研究胸水中干扰素诱导蛋白10(interferon-inducible protein 10,IP-10)水平对结核性胸膜炎的诊断价值。方法:用ELISA检测43例结核性胸膜炎和33例恶性胸腔积液患者胸水中IP-10水平;绘制受试者工作特征曲线(receiver operating chara... 目的:研究胸水中干扰素诱导蛋白10(interferon-inducible protein 10,IP-10)水平对结核性胸膜炎的诊断价值。方法:用ELISA检测43例结核性胸膜炎和33例恶性胸腔积液患者胸水中IP-10水平;绘制受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC曲线)确定其诊断结核性胸膜炎的临界值,并评价其敏感性、特异性和诊断效能。结果:结核性胸膜炎组胸水中IP-10含量为(1 095.67±556.29)pg/ml,显著高于恶性胸腔积液组(121.39±61.21)pg/ml,P<0.01。IP-10诊断结核性胸膜炎的临界值为194.5 pg/ml,敏感性和特异性分别为83.7%和97.0%;IP-10的诊断效能与γ-干扰素(IFN-γ)相近。结论:胸水中IP-10水平测定有助于结核性胸膜炎的诊断。 展开更多

关键词 结核性胸膜炎 丁扰素诱导蛋白10 Γ-干扰素

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MicroRNA-21在自身免疫性疾病中的调节作用与机制 被引量：2

6

作者 董利阳 汪雪峰 苏川 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期993-996,1000,共5页

MicroRNAs(miRNAs)是一类具有调控功能的小分子非编码RNA,其介导的基因表达对于维持正常细胞的增殖、分化、凋亡以及维持免疫系统的稳定有着重要作用。大量研究结果表明,miR-21通过Toll样受体(TLR)信号途径参与了固有免疫应答和炎症调节... MicroRNAs(miRNAs)是一类具有调控功能的小分子非编码RNA,其介导的基因表达对于维持正常细胞的增殖、分化、凋亡以及维持免疫系统的稳定有着重要作用。大量研究结果表明,miR-21通过Toll样受体(TLR)信号途径参与了固有免疫应答和炎症调节,而且它还可以通过多种方式对免疫细胞的生长、分化等产生影响。近年来,关于miR-21在自身免疫性疾病中的作用及其机制研究备受关注,本文对miR-21调节免疫反应及其对几种常见自身免疫性疾病的调节作用进行了综述。 展开更多

关键词 MICRORNA-21 自身免疫性疾病 调节作用

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淡色库蚊抗药性相关胰蛋白酶基因稳定转染细胞系的建立与表达鉴定 被引量：1

7

作者 公茂庆 顾燕 +4 位作者 胡小邦 孙艳 马磊 李秀兰 朱昌亮 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第6期454-457,共4页

目的为进一步研究胰蛋白酶基因与抗药性的关系。方法采用PCR方法,以淡色库蚊抗性品系cDNA文库为模板,扩增出抗药性品系高表达的胰蛋白酶(trypsin)基因编码区。T/A克隆测序鉴定后,亚克隆到昆虫细胞表达载体pIE13,构建重组昆虫细胞表达载... 目的为进一步研究胰蛋白酶基因与抗药性的关系。方法采用PCR方法,以淡色库蚊抗性品系cDNA文库为模板,扩增出抗药性品系高表达的胰蛋白酶(trypsin)基因编码区。T/A克隆测序鉴定后,亚克隆到昆虫细胞表达载体pIE13,构建重组昆虫细胞表达载体pIE13/try。经酶切和PCR鉴定后,与带有筛选标记的pIE1neo质粒共转染蚊虫细胞C6/36,通过G418选择培养,建立稳定转染细胞。用RTPCR、Westernblotting鉴定胰蛋白酶基因的转录表达。结果酶切和PCR鉴定表明,成功构建昆虫细胞表达载体pIE13/try;证实胰蛋白酶基因已转入C6/36细胞,并建立稳定转染细胞系,成功地表达目的基因。结论稳定转染细胞系的建立和基因表达为进一步研究胰蛋白酶与抗药性的关系提供了良好的实验基础。 展开更多

关键词 胰蛋白酶基因 昆虫细胞表达载体 抗药性 基因转染 C6/36细胞

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人乳头瘤病毒E7与人干扰素α-2b融合基因在中国仓鼠卵巢细胞中的表达 被引量：1

8

作者 相文忠 王飞 +4 位作者 王群 刘丰 张兆松 苏川 毕志刚 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期430-432,共3页

目的:构建人乳头瘤病毒(HPV)11-E7及人干扰素(IFN)α-2b的真核表达载体,并在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中表达。方法:同时用KpnⅠ、EcoRⅠ酶切pET-32a-IFNα-2b-linker-HPV11-E7及pcDNA3.1,将酶切产物纯化回收,两者的回收产物进行连接反应... 目的:构建人乳头瘤病毒(HPV)11-E7及人干扰素(IFN)α-2b的真核表达载体,并在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中表达。方法:同时用KpnⅠ、EcoRⅠ酶切pET-32a-IFNα-2b-linker-HPV11-E7及pcDNA3.1,将酶切产物纯化回收,两者的回收产物进行连接反应。连接产物转化大肠杆菌感受态细胞DH5α,随机挑选阳性克隆并提取质粒酶切鉴定;用脂质体法转染CHO细胞,用免疫荧光法检测融合基因的表达。结果:DNA测序结果显示,成功地将IFN-α-2b-linker-HPV11-E7装入pcDNA3.1的KpnⅠ、EcoRⅠ酶切位点之间,且其序列与设计完全一致;激光扫描共聚焦显微镜观察可见目的蛋白的表达。结论:成功地构建了HPV11-E7及IFNα-2b的真核表达载体,并在CHO细胞中表达,为提高DNA疫苗免疫效果的研究奠定了基础。 展开更多

关键词 人乳头瘤病毒 E7基因 干扰素Α-2B 融合基因

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H3N2流感病毒非结构蛋白-1真核表达载体的构建与表达及其对293T细胞增殖的影响

9

作者 迟莹 卞倩 +3 位作者 李燕 张文帅 温恬 焦永军 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期40-44,共5页

目的:构建甲型H3N2流感病毒非结构蛋白-1(nonstructal-1,NS1)真核表达载体并表达其编码蛋白;探讨NS1对细胞增殖的影响。方法 :从江苏省甲型H3N2流感病毒毒株提取病毒RNA,采用RT-PCR技术扩增NS1全长基因,将其克隆至pMD18-T Simple Vecto... 目的:构建甲型H3N2流感病毒非结构蛋白-1(nonstructal-1,NS1)真核表达载体并表达其编码蛋白;探讨NS1对细胞增殖的影响。方法 :从江苏省甲型H3N2流感病毒毒株提取病毒RNA,采用RT-PCR技术扩增NS1全长基因,将其克隆至pMD18-T Simple Vector中构建pMD18-T/NS1质粒,双酶切pMD18-T/NS1与pXJ40-HA后,构建真核表达载体pXJ40-HA-NS1,经酶切及测序鉴定后将质粒转染到293T细胞中,通过免疫印迹法鉴定NS1蛋白的表达。3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐[3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide,MTT]法检测NS1转染细胞后对细胞增殖的影响。结果:经双酶切、测序鉴定证实NS1基因的真核表达载体构建成功;免疫印迹法证实NS1蛋白的表达。MTT法证实转染NS1质粒后对细胞增殖有抑制作用。结论:成功克隆了NS1全长基因,构建了其真核表达载体,并初步验证了NS1蛋白过表达后能抑制细胞的增殖,该表达载体的构建为后期建立稳定表达NS1的细胞模型和NS1蛋白对细胞增殖和凋亡作用机制的进一步研究提供了基础。 展开更多

关键词 H3N2流感病毒 非结构蛋白-1基因 克隆 真核表达 细胞增殖

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白藜芦醇对鼠纤维肉瘤S180细胞周期影响及其机制研究 被引量：5

10

作者 陈加顺 陶方方 +2 位作者 侯敏 吴海玮 束永前 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期570-574,共5页

目的:研究白藜芦醇对鼠纤维肉瘤S180细胞的抗肿瘤作用,并探讨其分子机制。方法:用MTT法检测白藜芦醇对鼠纤维肉瘤细胞系S180增殖的影响;PI单标流式细胞术检测白藜芦醇对S180细胞周期分布的影响;Western blot方法检测白藜芦醇对S180细胞c... 目的:研究白藜芦醇对鼠纤维肉瘤S180细胞的抗肿瘤作用,并探讨其分子机制。方法:用MTT法检测白藜芦醇对鼠纤维肉瘤细胞系S180增殖的影响;PI单标流式细胞术检测白藜芦醇对S180细胞周期分布的影响;Western blot方法检测白藜芦醇对S180细胞cyclinD1,P21Cip1蛋白表达的影响。结果:白藜芦醇对S180细胞增殖呈双相作用:低浓度促进细胞增殖;高浓度抑制细胞增殖,其抑制作用呈时效和量效关系。白藜芦醇治疗组S180细胞周期发生变化,细胞周期被阻滞于G0/G1期。白藜芦醇以时间依赖方式下调周期蛋白cyclinD1的表达,上调白藜芦醇P21Cip1蛋白表达。结论:白藜芦醇低浓度促进S180细胞增殖,高浓度抑制细胞增殖。白藜芦醇可通过调节细胞周期蛋白cyclinD1,P21Cip1的表达调控细胞周期进程,抑制细胞增殖。 展开更多

关键词 白藜芦醇 S180细胞 细胞周期

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人端粒酶逆转录酶与热休克蛋白70融合表达载体的构建及原核表达 被引量：2

11

作者 唐鹿群 张蕾 +3 位作者 郭人花 刘丰 苏川 束永前 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期825-828,共4页

目的:构建热休克蛋白70(HSP70)与人端粒酶逆转录酶融合表达载体,在大肠杆菌进行表达。方法:利用PCR方法扩增hTERT基因片段(532aa～637aa),双酶切后插入原核表达载体pET32a的NcoⅠ和EcoRⅠ位点之间,形成pET32a-hTERT质粒。通过PCR方法扩... 目的:构建热休克蛋白70(HSP70)与人端粒酶逆转录酶融合表达载体,在大肠杆菌进行表达。方法:利用PCR方法扩增hTERT基因片段(532aa～637aa),双酶切后插入原核表达载体pET32a的NcoⅠ和EcoRⅠ位点之间,形成pET32a-hTERT质粒。通过PCR方法扩增人HSP70全长cDNA,双酶切后插入pET32a-hTERT的EcoRⅠ和HindⅢ位点之间,构建hTERT与HSP70的N端融合基因原核表达质粒pET32a-hTERT-HSP70。含有该质粒的大肠杆菌BL21经异丙醛-B-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。结果:成功的扩增了HSP70基因与hTERT基因片段;测序结果表明成功的构建了pET32a-hTERT-HSP70原核表达载体。含有该质粒的大肠杆菌BL21经诱导后表达约110 kD的蛋白。结论:HSP70与人端粒酶逆转录酶融合表达质粒构建成功,并成功获得了融合蛋白hTERT-HSP70。 展开更多

关键词 热休克蛋白70 人端粒酶逆转录酶 融合基因 原核表达

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大肠杆菌J2_5的全基因组测序及比较基因组分析 被引量：1

12

作者 支娅茹 张莹 +1 位作者 于鑫焱 刘晓秋 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期1065-1072,1079,共9页

目的:分析多耐药大肠杆菌J2_5的进化分群、耐药基因及毒力基因,为临床诊断及用药提供理论依据。方法:采用高通量测序法对J2_5进行全基因组测序,并使用多种生物信息学工具和数据库进行数据比对分析。结果:该菌的全基因组总长度为4.7 Mb,G... 目的:分析多耐药大肠杆菌J2_5的进化分群、耐药基因及毒力基因,为临床诊断及用药提供理论依据。方法:采用高通量测序法对J2_5进行全基因组测序,并使用多种生物信息学工具和数据库进行数据比对分析。结果:该菌的全基因组总长度为4.7 Mb,GC含量为50.78%。多位点序列分型(MLST)分析发现其ST型为ST2491,和大肠杆菌野生株MG1655分型ST10不同。系统发育树进一步分析表明J2_5与MG1655的亲缘关系较近。抗生素耐药性综合数据库(CARD)分析发现该菌有65个耐药基因,主要通过4类耐药机制(抗生素外排泵、抗生素失活、抗生素靶点改变、降低对抗生素的渗透性)产生耐药性。毒力因子数据库(VFDB)分析发现该菌有7类40个毒力基因,编码黏附素、侵袭、自主转运蛋白等毒素蛋白。使用Prophage Hunter网上工具发现J2_5基因组存在3个前噬菌体,并且前噬菌体上带有1个毒力基因。结论:全基因组测序结果表明J2_5携带更多的毒力基因及耐药基因,是其致病性强和具有多种抗生素耐药性的原因。 展开更多

关键词 大肠杆菌 全基因组 MLST 系统发育 耐药基因 毒力基因 原噬菌体

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感染多耐药大肠杆菌新噬菌体vB_EcoM_RZ的性质鉴定及基因组学研究 被引量：1

13

作者 张瑞阳 许靖 +1 位作者 于鑫焱 刘晓秋 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期1109-1114,1159,共7页

目的:分离鉴定新型毒性噬菌体并研究其生物学特性,为用于治疗临床多耐药菌感染提供备选方案。方法:从南京城区污水中收集废水样本,以临床分离的大肠杆菌多药耐药菌株为宿主,采用双层琼脂法分离纯化新噬菌体,然后采用电镜观察其形态,一... 目的:分离鉴定新型毒性噬菌体并研究其生物学特性,为用于治疗临床多耐药菌感染提供备选方案。方法:从南京城区污水中收集废水样本,以临床分离的大肠杆菌多药耐药菌株为宿主,采用双层琼脂法分离纯化新噬菌体,然后采用电镜观察其形态,一步生长曲线确定其潜伏期及爆发量,并通过全基因组测序及质谱分析结合生物信息学分析研究其基因组及编码蛋白。结果:成功分离出一种新型大肠杆菌毒性噬菌体命名为vBEcoMRZ,其能感染并裂解多株大肠杆菌临床耐药菌株;生物学性质分析表明该噬菌体裂解速度快、宿主范围广、温度稳定性良好;全基因组测序结果表明vBEcoMRZ不编码毒素或其他毒力因子基因,溶源周期相关基因及抗性基因;质谱分析发现vBEcoMRZ噬菌体颗粒含有43种已知蛋白和一些未知功能的假定蛋白;系统发育树分析表明vBEcoMRZ是一株新型噬菌体。结论:分离并鉴定出一株新型大肠杆菌毒性噬菌体vBEcoMRZ,性质优良,有进一步应用于治疗耐药菌引起感染的潜能。 展开更多

关键词 噬菌体 多耐药菌 基因组学

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外源性IL⁃25对日本血吸虫感染引起肠壁损伤的影响

14

作者 孙思宇 杨宇轩 +8 位作者 陈璐 倪杨玥 常浩 陈琳 侯敏 徐志鹏 熊春蓉 杨坤 季旻珺 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2023年第4期452-458,474,共8页

目的:探究外源性白细胞介素(interleukin,IL)⁃25对日本血吸虫感染所致小鼠肠壁损伤的影响。方法:24只雌性C57BL/6J小鼠随机分为正常组、正常+IL⁃25组、感染组、感染+IL⁃25组。感染组、感染+IL⁃25组中每只小鼠感染日本血吸虫尾蚴40条;感... 目的:探究外源性白细胞介素(interleukin,IL)⁃25对日本血吸虫感染所致小鼠肠壁损伤的影响。方法:24只雌性C57BL/6J小鼠随机分为正常组、正常+IL⁃25组、感染组、感染+IL⁃25组。感染组、感染+IL⁃25组中每只小鼠感染日本血吸虫尾蚴40条;感染+IL⁃25组、正常+IL⁃25组小鼠于感染后或实验开始后第4周开始腹腔注射IL⁃25(0.5μg/只,隔天注射1次,持续3周)。感染6周后剖杀小鼠,取肝脏和肠组织制作病理切片,苏木素伊红(hematoxylin⁃eosin,HE)染色后观察小鼠肝脏、结肠病理学变化,阿尔新蓝⁃过碘酸雪夫(Alcian blue⁃periodic acid⁃Schiff,AB⁃PAS)染色观察小鼠结直肠内杯状细胞数量变化;酶联免疫吸附试验(enzyme⁃linked immunosorbent assay,ELISA)、实时荧光定量试验(real⁃time polymerase chain reaction,real⁃time PCR)检测小鼠结肠部位炎症相关因子IL⁃10、IL⁃4、IL⁃13、肿瘤坏死因子⁃α(tumor necrosis factorα,TNF⁃α)、γ干扰素(interferonγ,IFN⁃γ)和IL⁃1β等的表达水平。结果:感染6周后的肠组织HE染色结果显示,日本血吸虫感染后,结直肠部位出现虫卵堆积,但是在经过IL⁃25注射之后,肠道损伤减轻,虫卵堆积减少;感染+IL⁃25组小鼠肠道单个肉芽肿面积显著低于感染组小鼠,但是感染组小鼠肝脏肉芽肿面积与感染+IL⁃25组小鼠无明显区别;AB⁃PAS结果显示IL⁃25能够显著增加日本血吸虫感染小鼠肠道杯状细胞数量;ELISA、real⁃time PCR结果显示感染日本血吸虫后小鼠结肠1型、2型细胞因子均有不同程度的升高,且在注射IL⁃25之后,呈现2型细胞因子表达量上升、1型细胞因子表达量下降的趋势。结论:IL⁃25可通过促进杯状细胞分化缓解日本血吸虫感染所致的肠壁损伤。 展开更多

关键词 日本血吸虫 肠壁损伤 IL⁃25

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白藜芦醇调控Th17/Treg抑制血吸虫病肝脏肉芽肿 被引量：3

15

作者 韩琴 朱继峰 +2 位作者 吕年银 佟书娟 张伟伟 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期132-138,共7页

目的探讨白藜芦醇对血吸虫病肝脏肉芽肿作用,分析其对Th17、Treg应答的影响。方法 45只C57BL/6小鼠感染日本血吸虫3周后,随机分为感染组、灌胃白藜芦醇治疗组、灌胃吡喹酮治疗组,另取15只正常小鼠为健康对照组。感染第9周,取肝脏HE染色... 目的探讨白藜芦醇对血吸虫病肝脏肉芽肿作用,分析其对Th17、Treg应答的影响。方法 45只C57BL/6小鼠感染日本血吸虫3周后,随机分为感染组、灌胃白藜芦醇治疗组、灌胃吡喹酮治疗组,另取15只正常小鼠为健康对照组。感染第9周,取肝脏HE染色观察虫卵肉芽肿,计数中性粒细胞;RT-PCR检测肝脏中IL-17A、Foxp3、CXCL1、CXCL2水平;流式细胞术检测脾脏中Th17、Treg应答。用PBS、SEA刺激正常小鼠脾脏细胞,分别加入白藜芦醇和吡喹酮,流式细胞术检测Th17、Treg应答。结果与感染组相比,白藜芦醇治疗组,肝脏肉芽肿减轻,肉芽肿中性粒细胞数量减少(P<0.01),Th17应答减弱(P<0.05),Treg应答增强(P<0.05),肝脏IL-17A、CXCL1、CXCL2表达均降低(P<0.05),Foxp3表达增高(P<0.01)。白藜芦醇促使SEA刺激的T细胞往Th17细胞分化减少(P<0.05),往Treg细胞分化增多(P<0.05)。结论白藜芦醇通过降低Th17应答,增强Treg应答,抑制血吸虫病肝脏肉芽肿。 展开更多

关键词 日本血吸虫 白藜芦醇 肉芽肿 Th17 TREG 吡喹酮

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华支睾吸虫排泄分泌抗原McAb的制备及双抗夹心ELISA的初步建立 被引量：1

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作者 朱慕春 刘劲峰 +1 位作者 陆忠奎 孔德龙 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期873-877,共5页

目的以华支睾吸虫排泄分泌抗原(ESA)免疫小鼠,采用杂交瘤细胞技术制备单克隆抗体,并建立一种可检测ESA的双抗体夹心酶联免疫吸附试验的方法。方法用ESA免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合,筛选杂交瘤细胞株,制备高效... 目的以华支睾吸虫排泄分泌抗原(ESA)免疫小鼠,采用杂交瘤细胞技术制备单克隆抗体,并建立一种可检测ESA的双抗体夹心酶联免疫吸附试验的方法。方法用ESA免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合,筛选杂交瘤细胞株,制备高效价单克隆抗体并鉴定;单抗经HRP标记和配对筛选,建立双抗夹心ELISA并分析其特异性及灵敏度。结果成功制备出抗华支睾吸虫ESA McAb:B7、F1;抗体类型均为IgG1,抗体滴度高,特异性好,以筛选到的两株单抗建立双抗夹心ELISA法,最佳线性范围为0.014~0.248μg/mL(R2=0.996 9),最低检出限为0.014μg/mL。结论初步建立了检测华支睾吸虫ESA的免疫诊断方法。 展开更多

关键词 华支睾吸虫 单克隆抗体 ELISA

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