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人源性抗SARS-CoV-2单链抗体文库的构建及广谱中和抗体的筛选与鉴定
1
作者
尹慧敏
吕海
+3 位作者
迟莹
刘静娴
焦永军
卫平民
《细胞与分子免疫学杂志》
北大核心
2025年第2期154-160,共7页
目的构建人源性抗严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)单链可变片段(scFv)抗体文库,并筛选具有广谱中和活性的抗体,为诊断和治疗制剂的开发提供候选分子。方法从新型冠状病毒感染康复者外周血中分离单个核淋巴细胞(PBMC),提取总RNA...
目的构建人源性抗严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)单链可变片段(scFv)抗体文库,并筛选具有广谱中和活性的抗体,为诊断和治疗制剂的开发提供候选分子。方法从新型冠状病毒感染康复者外周血中分离单个核淋巴细胞(PBMC),提取总RNA,逆转录成cDNA,以此为模板构建人源性抗SARS-CoV-2 scFv抗体文库;利用噬菌体展示技术筛选对SARS-CoV-2 S蛋白具有特异性的scFv抗体。通过序列分析和人源IgG抗体表达,合成IgG全抗体,并评估其对SARS-CoV-2的结合能力及中和活性。结果成功构建了库容量为1.56×10^(7)CFU的SARS-CoV-2人源性scFv抗体文库,筛选出两种特异性scFv抗体;并将scFv抗体表达成IgG形式的全抗体(IgG-A10和IgG-G6),其中IgG-A10对SARS-CoV-2原始株(WT)和奥密克戎亚型变异毒株XBB(XBB)毒株均具有较好中和活性,对奥密克戎BA.2.86变异株的第二代亚分支JN.1(JN.1)毒株中和效果一般。结论本研究从康复者外周血中成功构建了人源性抗SARS-CoV-2 scFv抗体文库,并筛选表达出具有中和活性的抗SARS-CoV-2 IgG抗体,为SARS-CoV-2感染的预防、诊断和治疗奠定了基础。
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关键词
SARS-CoV-2
单链可变片段(scFv)
噬菌体展示技术
中和抗体
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职称材料
题名
人源性抗SARS-CoV-2单链抗体文库的构建及广谱中和抗体的筛选与鉴定
1
作者
尹慧敏
吕海
迟莹
刘静娴
焦永军
卫平民
机构
东南大学公共
卫生
学院环境医学工程教育部
重点
实验室
江苏省疾病预防控制中心卫生与健康委员会肠道病原微生物重点实验室
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
北大核心
2025年第2期154-160,共7页
基金
南京市重大科技专项(2021-11005)
江苏省基础研究计划自然科学基金面上项目(BK20221413)。
文摘
目的构建人源性抗严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)单链可变片段(scFv)抗体文库,并筛选具有广谱中和活性的抗体,为诊断和治疗制剂的开发提供候选分子。方法从新型冠状病毒感染康复者外周血中分离单个核淋巴细胞(PBMC),提取总RNA,逆转录成cDNA,以此为模板构建人源性抗SARS-CoV-2 scFv抗体文库;利用噬菌体展示技术筛选对SARS-CoV-2 S蛋白具有特异性的scFv抗体。通过序列分析和人源IgG抗体表达,合成IgG全抗体,并评估其对SARS-CoV-2的结合能力及中和活性。结果成功构建了库容量为1.56×10^(7)CFU的SARS-CoV-2人源性scFv抗体文库,筛选出两种特异性scFv抗体;并将scFv抗体表达成IgG形式的全抗体(IgG-A10和IgG-G6),其中IgG-A10对SARS-CoV-2原始株(WT)和奥密克戎亚型变异毒株XBB(XBB)毒株均具有较好中和活性,对奥密克戎BA.2.86变异株的第二代亚分支JN.1(JN.1)毒株中和效果一般。结论本研究从康复者外周血中成功构建了人源性抗SARS-CoV-2 scFv抗体文库,并筛选表达出具有中和活性的抗SARS-CoV-2 IgG抗体,为SARS-CoV-2感染的预防、诊断和治疗奠定了基础。
关键词
SARS-CoV-2
单链可变片段(scFv)
噬菌体展示技术
中和抗体
Keywords
SARS-CoV-2
single-chain variable fragment(scFv)
phage display technology
neutralizing antibody
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
R714.253 [医药卫生—妇产科学]
S852.43 [农业科学—基础兽医学]
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作者
出处
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1
人源性抗SARS-CoV-2单链抗体文库的构建及广谱中和抗体的筛选与鉴定
尹慧敏
吕海
迟莹
刘静娴
焦永军
卫平民
《细胞与分子免疫学杂志》
北大核心
2025
0
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