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江苏省宝应县异育银鲫鳃疱疹病毒病流行病学调查和研究 被引量:1
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作者 吴霆 丁正峰 +4 位作者 朱春燕 薛中仪 顾伟 孟庆国 王文 《科学养鱼》 北大核心 2014年第7期52-53,共2页
自2008年以来,宝应县养殖的异育银鲫发生不同类型和不同程度的疱疹病毒病害,其中2011-2013年发病点明显增多、连片发病面积不断扩大,死亡率急剧升高、经济损失惨重,病害发生形势不容乐观,因此我们对2008-2013年病害开展了流行病学调查... 自2008年以来,宝应县养殖的异育银鲫发生不同类型和不同程度的疱疹病毒病害,其中2011-2013年发病点明显增多、连片发病面积不断扩大,死亡率急剧升高、经济损失惨重,病害发生形势不容乐观,因此我们对2008-2013年病害开展了流行病学调查和研究,现将结果总结如下。 展开更多
关键词 流行病学调查 疱疹病毒病 异育银鲫 宝应县 江苏省 病毒病害 经济损失 病害发生
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江苏省中华绒螯蟹螺原体疫病的检测和普查 被引量:1
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作者 顾伟 张秋萍 +6 位作者 张莉 李菲 王文 陈辉 邹勇 吴霆 华伯仙 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2011年第1期293-295,共3页
2008—2009年就江苏省范围内的中华绒螯蟹螺原体疫病进行了普查及跟踪检测,结果显示螺原体疫病在全省普遍存在,尤其是苏南的水产养殖重点县(市、区),螺原体疫病连年暴发,普查的60个县(市、区)中,阳性率达22%,随后的跟踪检测阳性率更高,... 2008—2009年就江苏省范围内的中华绒螯蟹螺原体疫病进行了普查及跟踪检测,结果显示螺原体疫病在全省普遍存在,尤其是苏南的水产养殖重点县(市、区),螺原体疫病连年暴发,普查的60个县(市、区)中,阳性率达22%,随后的跟踪检测阳性率更高,达67%,必须引起高度重视。 展开更多
关键词 中华绒螯蟹 螺原体 疫病调查
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异育银鲫鳃出血病流行病学调查和研究 被引量:22
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作者 吴霆 丁正峰 +4 位作者 朱春艳 薛中仪 顾伟 孟庆国 王文 《水产科学》 CAS 北大核心 2014年第5期283-287,共5页
2011—2013年,江苏省局部地区发生新型异育银鲫鳃出血病,给养殖业造成较大经济损失。为查明病因,了解发病历史、发病季节、发病症状及危害对象,通过在江苏省宝应县开展水产流行病学调查,结合组织病理学、回归感染试验、分子生物学诊断... 2011—2013年,江苏省局部地区发生新型异育银鲫鳃出血病,给养殖业造成较大经济损失。为查明病因,了解发病历史、发病季节、发病症状及危害对象,通过在江苏省宝应县开展水产流行病学调查,结合组织病理学、回归感染试验、分子生物学诊断等研究方法,证实异育银鲫鳃出血病病原为鲤科疱疹病毒-Ⅱ型,由于该病害会导致异育银鲫养殖重大损失,因此需要引起国内相关养殖业主、科研工作者更多关注。 展开更多
关键词 异育银鲫 疱疹病毒 鳃出血 大红鳃 流行病学
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中华绒螯蟹螺原体类螺旋蛋白SLP25对中华绒螯蟹和RAW264.7细胞免疫反应的研究 被引量:3
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作者 孟庆国 陈静 +3 位作者 黄艳青 靳明建 顾伟 王文 《南京师大学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期78-83,90,共7页
中华绒螯蟹螺原体是一种引起中华绒螯蟹颤抖病的新型病原微生物,对中华绒螯蟹养殖业造成了很大的损失.本文研究了螺原体的一个特有蛋白——螺旋蛋白所引起的中华绒螯蟹和小鼠RAW264.7细胞的免疫反应.克隆和原核表达中华绒螯蟹螺原体类... 中华绒螯蟹螺原体是一种引起中华绒螯蟹颤抖病的新型病原微生物,对中华绒螯蟹养殖业造成了很大的损失.本文研究了螺原体的一个特有蛋白——螺旋蛋白所引起的中华绒螯蟹和小鼠RAW264.7细胞的免疫反应.克隆和原核表达中华绒螯蟹螺原体类螺旋蛋白SLP25后,用以感染中华绒螯蟹和小鼠巨噬细胞RAW264.7,用实时定量PCR和Western Blot的方法检测宿主免疫相关基因或蛋白表达量的变化.类螺旋蛋白SLP25刺激后,中华绒螯蟹的抗脂多糖因子、酚氧化酶原、消极素轻链和Peroxiredoxin 6等基因的mRNA表达量变化显著;RAW264.7细胞内的TNF-α、IL-1β和IL-10等基因的mRNA表达量变化显著,而TGF-β1和CD40的mRNA表达量变化不显著;同时RAW264.7细胞内P38和ERK蛋白的磷酸化水平变化显著,而JNK蛋白的磷酸化水平变化不显著.通过本文的研究表明类螺旋蛋白SLP25可以引起宿主广泛的免疫变化,进而证明其是重要的毒力相关因子. 展开更多
关键词 螺原体 中华绒螯蟹 螺旋蛋白 免疫反应
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红螯螯虾冷休克蛋白Y-box编码基因的克隆及表达分析 被引量:3
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作者 孟庆国 陈静 +3 位作者 黄艳青 靳明建 顾伟 王文 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2012年第6期14-20,共7页
采用RT-PCR和RACE技术,从红螯螯虾(Cherax quadricarinatus)血细胞中分离到冷休克蛋白Y-box编码基因的cDNA序列。结果显示,冷休克蛋白Y-box编码基因的长度为1 733 bp,其中包括82 bp的5'非翻译区、676 bp的3'非翻译区和975 bp的... 采用RT-PCR和RACE技术,从红螯螯虾(Cherax quadricarinatus)血细胞中分离到冷休克蛋白Y-box编码基因的cDNA序列。结果显示,冷休克蛋白Y-box编码基因的长度为1 733 bp,其中包括82 bp的5'非翻译区、676 bp的3'非翻译区和975 bp的编码序列,可编码324个氨基酸。理论相对分子质量和等电点分别为35 800和9.81。结构域分析和序列比对显示,红螯螯虾冷休克Y-box蛋白由3部分组成:富含丙氨酸或脯氨酸区域、冷休克结构域和带电荷区域,其中冷休克结构域高度保守。系统进化树分析表明,红螯螯虾冷休克Y-box蛋白与水蚤等节肢动物冷休克Y-box蛋白聚类,且三级结构非常相似。最适温度养殖条件下,冷休克蛋白Y-box的虾组织分布特异性研究表明,红螯螯虾神经组织的冷休克蛋白Y-box转录活性最强,而后依次为肝脏、血淋巴和鳃,在肠和心脏中也有活性,在肌肉组织中转录保持较低水平,揭示神经组织是重要的冷休克Y-box蛋白表达区。 展开更多
关键词 红螯螯虾(Cherax quadricarinatus) 冷休克Y—box蛋白 克隆 实时荧光定量PCR
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中华绒螯蟹螺原体对中华绒螯蟹和RAW264.7细胞免疫反应研究 被引量:2
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作者 孟庆国 黄艳青 +2 位作者 靳明建 顾伟 王文 《南京师大学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期77-82,88,共7页
中华绒螯蟹螺原体是一种引起中华绒螯蟹颤抖病的新型病原微生物,对中华绒螯蟹养殖业造成了很大的损失.虽然很多无脊椎动物免疫反应的研究已经报道,但是螺原体引起宿主免疫反应的研究目前还未见报道.中华绒螯蟹螺原体既可以感染中华绒螯... 中华绒螯蟹螺原体是一种引起中华绒螯蟹颤抖病的新型病原微生物,对中华绒螯蟹养殖业造成了很大的损失.虽然很多无脊椎动物免疫反应的研究已经报道,但是螺原体引起宿主免疫反应的研究目前还未见报道.中华绒螯蟹螺原体既可以感染中华绒螯蟹,也可以感染乳鼠.本文在动物个体水平上研究了中华绒螯蟹螺原体与中华绒螯蟹的免疫关系,中华绒螯蟹经螺原体刺激后,其体内抗脂多糖因子、酚氧化酶原、酚氧化酶原激活因子、消极素轻链等基因的mRNA的表达水平显著上升,而抗氧化蛋白Prx 6的表达量显著下降.本文还在细胞水平研究了中华绒螯蟹螺原体与小鼠巨噬细胞之间的免疫关系,中华绒螯蟹螺原体刺激后,细胞中CD40、IL-1β、IL-10基因的mRNA表达量显著下降,而TGF-β1和TNF-α等基因的表达量上升.本实验结果说明螺原体可以引起寄主很广泛的免疫反应. 展开更多
关键词 中华绒螯蟹 RAW264.7细胞 螺原体 免疫反应
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虾蟹新型病原螺原体的发现和研究 被引量:14
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作者 王文 《南京师大学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期1-13,共13页
螺原体是一种个体极小、形态多变、没有细胞壁的非常特殊细菌,它们20世纪70年代首次在植物和昆虫体内发现,有些是农作物(玉米、柑橘等)和有益昆虫(蜜蜂)的致病菌.从患有"颤抖病"的中华绒螯蟹(俗称河蟹)中分离到的螺原体是首... 螺原体是一种个体极小、形态多变、没有细胞壁的非常特殊细菌,它们20世纪70年代首次在植物和昆虫体内发现,有些是农作物(玉米、柑橘等)和有益昆虫(蜜蜂)的致病菌.从患有"颤抖病"的中华绒螯蟹(俗称河蟹)中分离到的螺原体是首次从水生甲壳动物中发现的新型病原,命名为中华绒螯蟹螺原体(Spiroplasma eriocheiris sp.Nov),它是"颤抖病"的致病菌.这一发现将人们对螺原体的分布由陆地扩大到水域.除河蟹外,螺原体对其他经济水生甲壳动物也具有广泛的侵染性,如克氏原螯虾(俗称小龙虾)、凡纳滨对虾(南美白对虾)、罗氏沼虾、日本沼虾(俗称青虾)中也相继发现了螺原体.经分子生物学、免疫学分析、交叉感染实验以及超微病理学特征比较等方面的研究,最终确定这些不同宿主来源的螺原体与引起河蟹"颤抖病"的螺原体为同一种类,表明该种螺原体可以在不同的水生甲壳动物物种之间进行交叉感染和传播.为了有效防控螺原体引起的虾蟹疫病,不仅需要开展病原的生物学特性和其致病机理的研究,而且需要建立一个从快速诊断到实时监控再到有效防治的综合防控技术,本综述对这一新型虾蟹病原的基础研究和应用技术方面的研究进行归纳总结. 展开更多
关键词 经济水生甲壳动物(虾蟹) 螺原体 致病菌 疫病防控
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红螯螯虾酚氧化酶原及其特性研究(英文) 被引量:1
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作者 顾伟 陈静 +3 位作者 黄艳青 靳明建 孟庆国 王文 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期117-125,共9页
采用同源克隆策略和RACE技术,从红螯螯虾Cherax quadricarinatus血细胞中克隆得到酚氧化酶原基因的全长c DNA序列,共2951 bp,开放读码框为1995 bp,编码665个氨基酸。预测的分子量和等电点分别为75.7 k D和6.23。酚氧化酶原含有两个推测... 采用同源克隆策略和RACE技术,从红螯螯虾Cherax quadricarinatus血细胞中克隆得到酚氧化酶原基因的全长c DNA序列,共2951 bp,开放读码框为1995 bp,编码665个氨基酸。预测的分子量和等电点分别为75.7 k D和6.23。酚氧化酶原含有两个推测的tyrosinase copper-binding motifs(带有六个组氨酸残基)和一个thiol-ester-like motif,这些特征和其他甲壳动物的酚氧化酶原特征相同。红螯螯虾酚氧化酶原氨基酸序列与通讯螯虾Pacifastacus leniusculus、欧洲龙虾Homarus gammarus、美洲龙虾Homarus americanus和克氏原螯虾Procambarus clarkii酚氧化酶原的相似率分别为68%、63%、63%和59%。酚氧化酶原基因双酶切后连接入p ET-28a原核表达载体,转化到大肠杆菌BL21后重组表达酚氧化酶原蛋白。在重组蛋白纯化后,免疫新西兰大耳兔制备得到的酚氧化酶原多克隆抗体,其效价大于1︰12800。红螯螯虾血淋巴、肝和鳃组织中的酚氧化酶原m RNA表达和酚氧化酶活性较高,而神经、心、肠和肌肉中较低。中华绒螯蟹螺原体和嗜水气单胞菌免疫红螯螯虾后,血淋巴细胞、肝和鳃组织中的酚氧化酶原和酚氧化酶活性在免疫后的不同时间均出现了显著性的增加,此结果表明酚氧化酶原和酚氧化酶在红螯螯虾对抗细菌感染的过程中起到重要的免疫作用。此结果为进一步深入研究酚氧化酶原基因和酚氧化酶的功能及其调控机理奠定基础。 展开更多
关键词 酚氧化酶原 中华绒螯蟹螺原体 嗜水气单胞菌 红螯螯虾
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沉水植物对罗氏沼虾养殖系统的水质调控效应 被引量:7
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作者 缪艳阳 高志宝 +4 位作者 李旭光 周军 许志强 徐宇 林海 《农业环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期652-661,共10页
为研究沉水植物对罗氏沼虾养殖系统的水质调控效应,比较了生态养殖组与传统养殖组的水质、浮游动植物和微生物群落结构特征,解析了浮游动植物、微生物优势种群与水环境因子之间的关系。结果表明:两组养殖水体水质与浮游生物群落结构均... 为研究沉水植物对罗氏沼虾养殖系统的水质调控效应,比较了生态养殖组与传统养殖组的水质、浮游动植物和微生物群落结构特征,解析了浮游动植物、微生物优势种群与水环境因子之间的关系。结果表明:两组养殖水体水质与浮游生物群落结构均存在显著差异。生态养殖组的总磷(TP)、总氮(TN)、化学需氧量(COD)和叶绿素a(Chl-a)浓度均低于传统养殖组。传统养殖组浮游植物与浮游动物生物量均高于生态养殖组,两组浮游植物与浮游动物多样性指数存在显著差异。微生物主要包括放线菌门、拟杆菌门、蓝细菌门和变形菌门,其中生态养殖组放线菌门的丰度最高,传统养殖组优势菌为蓝细菌门的微囊藻属、鱼腥藻属以及拟杆菌门的黄杆菌属。冗余分析结果表明TP、COD和溶解氧(DO)是影响水体浮游生物群落组成与分布的关键因子。综上所述,利用沉水植物开展罗氏沼虾养殖水环境的原位净化,可显著消减养殖水体氮、磷营养盐,降低浮游动植物生物量,提高水体微生物群落结构稳定性,改善养殖水环境。 展开更多
关键词 沉水植物 罗氏沼虾 水环境 原位净化
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中华绒螯蟹与长江华溪蟹胚胎发育相关miRNA识别与比较分析
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作者 孙宾 刘莹莹 +2 位作者 李鹏 严洁 周开亚 《南京师大学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期65-71,共7页
利用Illumina/Solexa高通量测序技术,开展了中华绒螯蟹和长江华溪蟹胚胎的小RNA深度测序.对测序结果进行生物信息学分析,分别筛选获得中华绒螯蟹的8 569 743条和长江华溪蟹的8 719 465条干净序列(Clean Unique Reads),长度分布在20 nt^2... 利用Illumina/Solexa高通量测序技术,开展了中华绒螯蟹和长江华溪蟹胚胎的小RNA深度测序.对测序结果进行生物信息学分析,分别筛选获得中华绒螯蟹的8 569 743条和长江华溪蟹的8 719 465条干净序列(Clean Unique Reads),长度分布在20 nt^22 nt区间内的分别占有30.47%(Ejs-OB:中华绒螯蟹胚胎测序文库)和30.38%(SY-OJC:长江华溪蟹胚胎测序文库).用SOAP程序将小RNA定位到基因组,结果 Ejs-OB中分析筛选出5 745 279个小RNA,其中13 472种小RNA与基因组的序列匹配;SY-OJC中分析筛选出4 397 509个小RNA,其中18 407种小RNA与基因组的序列匹配.分类注释的结果显示,中华绒螯蟹和长江华溪蟹分别有6 293 445(Ejs-OB)和5 596 614(SY-OJC)条miRNA候选序列,但未预测发现新miRNA.在表达水平的差异分析结果中发现miR-1183、miR-1357、miR-1591、miR-2382的表达水平上调且差异显著.在两文库中搜寻到一些共同miRNA*序列,其中miR-139*、miR-1419g*、miR-1798*、miR-202*、miR-2068*和miR-454*也是表达变异较大.这些结果表明,miRNA可能在调控与中华绒螯蟹和长江华溪蟹胚胎发育相关的基因表达中起重要作用. 展开更多
关键词 中华绒螯蟹 长江华溪蟹 小RNA MIRNA
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克氏原螯虾烂尾病病原的分离鉴定及其相关特性分析 被引量:9
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作者 刘张淮 吴霆 +3 位作者 王家军 朱春艳 张荧荧 孟庆国 《水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期102-109,共8页
为研究克氏原螯虾烂尾病病原种类及其相关特性,从患病虾尾部病灶分离出2种具有不同菌落形态和色泽的代表菌株,分别编号LW2047-1和LW2047-2,经人工感染试验确定病原菌为菌株LW2047-2。对菌株LW2047-2进行细菌学观察,分析形态特征和生理... 为研究克氏原螯虾烂尾病病原种类及其相关特性,从患病虾尾部病灶分离出2种具有不同菌落形态和色泽的代表菌株,分别编号LW2047-1和LW2047-2,经人工感染试验确定病原菌为菌株LW2047-2。对菌株LW2047-2进行细菌学观察,分析形态特征和生理生化特性,并对16S rRNA和gyrB基因测序分析,最终将其鉴定为弗氏柠檬酸杆菌。检测该菌株定居因子CFA基因和几丁质酶chi基因,分析其黏附性和几丁质分解特性。药物敏感性试验结果表明,菌株LW2047-2对恩诺沙星和硫酸新霉素2种抗菌药物高度敏感,对磺胺类药物均不敏感。 展开更多
关键词 克氏原螯虾 烂尾病 弗氏柠檬酸杆菌 分离鉴定 特性分析
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日本沼虾两种抗脂多糖因子的特性研究(英文)
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作者 王英慧 修云吉 +2 位作者 顾伟 孟庆国 王文 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期977-983,共7页
为了研究抗脂多糖因子ALFs在日本沼虾先天性免疫中的功能作用,研究从日本沼虾中克隆了2种抗脂多糖因子Mn ALF1、Mn ALF2。Mn ALF1 c DNA全长1008 bp,编码121个氨基酸;Mn ALF2 c DNA全长836 bp,编码124个氨基酸。这2种氨基酸均包含有一... 为了研究抗脂多糖因子ALFs在日本沼虾先天性免疫中的功能作用,研究从日本沼虾中克隆了2种抗脂多糖因子Mn ALF1、Mn ALF2。Mn ALF1 c DNA全长1008 bp,编码121个氨基酸;Mn ALF2 c DNA全长836 bp,编码124个氨基酸。这2种氨基酸均包含有一个信号肽序列和一个LPS结合位点,并且在结合位点的两端(N-端和C-端)都有2个保守的半胱氨酸残基。这2种Mn ALFs与之前发现的甲壳动物的ALFs是非常相似的。q RT-PCR结果显示Mn ALFs在所有被检测的组织中均有表达。其中Mn ALF1主要在心脏和小肠内表达,而Mn ALF2则主要在血细胞和肝胰脏中表达。在用嗜水气单胞菌刺激之后发现2种Mn ALFs在心脏、小肠、血细胞、肝胰脏中都呈现出明显的时间依赖表达模式(Mn ALF1在刺激之后呈现出先减少后增加的趋势,之后分别在不同组织的不同时间点达到最大值;然而,对于Mn ALF2,在心脏和小肠中先减少后增加,在血细胞和肝胰脏中呈现出先增加后减少,最后都在24h达到最大值)。结果提示这2种Mn ALF具有不同的组织特异性,并且在细菌侵染的免疫防御中起着重要的保护作用。 展开更多
关键词 日本沼虾 抗脂多糖因子 表达分析 嗜水气单胞菌
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低氧胁迫和螺原体感染对中华绒螯蟹存活和细胞凋亡的影响 被引量:4
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作者 汪雅琴 黄晨 +5 位作者 耿超 缪艳阳 陆银月 顾伟 王文 孟庆国 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期1249-1255,共7页
为了探究低氧胁迫对螺原体(Spiroplasma eriocheiris)感染中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)的影响,以中华绒螯蟹为研究对象,在低氧胁迫后,取中华绒螯蟹肝胰腺和鳃组织加入组织固定液,进行HE染色。在低氧条件下使螺原体感染中华绒螯蟹,计... 为了探究低氧胁迫对螺原体(Spiroplasma eriocheiris)感染中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)的影响,以中华绒螯蟹为研究对象,在低氧胁迫后,取中华绒螯蟹肝胰腺和鳃组织加入组织固定液,进行HE染色。在低氧条件下使螺原体感染中华绒螯蟹,计算螺原体拷贝数,并对血淋巴细胞进行细胞凋亡、细胞坏死和线粒体膜电位检测。结果显示,与对照组相比,处于长时间低氧胁迫状态下的中华绒螯蟹肝胰腺组织疏松,出现大量小空泡,鳃轴结构弥散,组织结构被破坏。此外,低氧组的中华绒螯蟹感染螺原体后的死亡速度相对于常氧组明显加快,血细胞内的螺原体数量、线粒体膜电位、血细胞凋亡率和坏死率相较于常氧组均显著升高。以上研究说明低氧胁迫可以加速螺原体的感染,使河蟹死亡速度变快,使血淋巴细胞凋亡和坏死更显著,不利于河蟹的生理生化。 展开更多
关键词 螺原体 低氧胁迫 血淋巴细胞 细胞凋亡 中华绒螯蟹
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鲤疱疹病毒Ⅱ型ORF72基因克隆、蛋白原核表达和抗体制备 被引量:4
14
作者 李双 向涛 +4 位作者 周海峰 吴霆 顾伟 王文 孟庆国 《江苏农业科学》 2019年第14期62-65,共4页
异育银鲫作为我国重要的淡水经济鱼类,其鳃出血病为主要病害,并造成重大经济损失,该病病原为鲤疱疹病毒Ⅱ型(cyprinid herpesvirus Ⅱ,CyHV-2).目前,研究主要在该病的检测和病理方面,对于免疫学检测方面研究较少.本研究根据CyHV-2ORF72... 异育银鲫作为我国重要的淡水经济鱼类,其鳃出血病为主要病害,并造成重大经济损失,该病病原为鲤疱疹病毒Ⅱ型(cyprinid herpesvirus Ⅱ,CyHV-2).目前,研究主要在该病的检测和病理方面,对于免疫学检测方面研究较少.本研究根据CyHV-2ORF72基因序列设计了1对特异性引物,利用患病异育银鲫肾脏DNA作为模板,通过PCR扩增得到CyHV-2ORF72基因全长,该基因序列全长为1113bp,可编码370个氨基酸的蛋白.该基因与pET-28a表达载体连接构建重组原核表达载体pET-ORF72转入大肠杆菌中,经IPTG诱导表达得到了分子量约为45ku的重组蛋白,与预测的蛋白大小基本一致.将纯化的重组蛋白皮下多点注射免疫新西兰大耳兔制备了ORF72的多克隆抗体,经Western Blotting检测抗体能与病毒粗提液有良好反应,特异性较好,本结果可为下一步建立疫苗和免疫检测方法奠定基础. 展开更多
关键词 异育银鲫 鲤疱疹病毒Ⅱ型 ORF72 多克隆抗体 WESTERN BLOTTING
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异育银鲫中鲤疱疹病毒Ⅱ型载量测定方法的建立 被引量:2
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作者 李双 吴霆 +2 位作者 顾伟 孟庆国 王文 《水产养殖》 CAS 2018年第4期21-25,30,共6页
异育银鲫是我国重要的淡水养殖品种,但是鲤疱疹病毒Ⅱ型对其造成了重大经济损失,该病毒致死率几乎可以达到100%。为了能够有效预防和控制该病毒,需要建立一种高效灵敏的定量方法。为此,本实验室根据CyHV-16基因序列设计引物,利用SYBR Gr... 异育银鲫是我国重要的淡水养殖品种,但是鲤疱疹病毒Ⅱ型对其造成了重大经济损失,该病毒致死率几乎可以达到100%。为了能够有效预防和控制该病毒,需要建立一种高效灵敏的定量方法。为此,本实验室根据CyHV-16基因序列设计引物,利用SYBR Green法建立了异育银鲫中鲤疱疹病毒Ⅱ型Realtime PCR方法,可以定量鲫鱼体内疱疹病毒载量,绘制了标准曲线,根据各个组织中病毒的拷贝数分析出该病毒在不同组织中的表达分布,其中脾、肾组织中表达量较高,鳃、肝、肠、肌肉等组织中表达量较低。这些数据为预防和控制异育银鲫Ⅱ型疱疹病毒奠定了实验和研究基础。 展开更多
关键词 异育银鲫 鲤疱疹病毒Ⅱ型 荧光定量PCR 病毒载量
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