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U87细胞来源的脑胶质瘤干细胞样细胞B7-H6表达上调且与其生物学特性相关
被引量：
1
1
作者
陈翰卿
时正朋
+2 位作者
高兵
傅丰庆
张学光
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第9期1168-1173,共6页
目的探讨B7家族分子B7-H6在脑胶质瘤干细胞样细胞(GSLC)中的表达及其意义。方法使用亚克隆的方法并利用GSLC在体外形成神经细胞球的特性,从U87细胞株中筛选得到脑GSLC;通过实时定量PCR和流式细胞术检测干细胞标志分子c-myc、性别决定区...
目的探讨B7家族分子B7-H6在脑胶质瘤干细胞样细胞(GSLC)中的表达及其意义。方法使用亚克隆的方法并利用GSLC在体外形成神经细胞球的特性,从U87细胞株中筛选得到脑GSLC;通过实时定量PCR和流式细胞术检测干细胞标志分子c-myc、性别决定区基因Y盒2(Sox2)、CD133、神经上皮干细胞蛋白(nestin)、CXC趋化因子受体4(CXCR4)的表达;通过化疗药物多柔比星、顺铂、卡铂杀伤鉴定其是否具有耐药特性;通过实时定量PCR及流式细胞术获得脑GSLC中B7家族的表达;采用小干涉RNA(si RNA)干扰下调B7-H6表达,CCK-8法检测细胞增殖的变化。结果使用亚克隆方法分离获得的脑GSLC能在体外形成神经细胞球,上调表达多种干细胞标志分子CD133、nestin、CXCR4,具有显著的耐药特性。B7家族分子B7-H1、B7-H3、B7-H4和B7-H6在得到脑GSLC中均表达,与原代U87细胞相比,细胞膜上的B7-H6的表达发生显著上调,使用si RNA干扰B7-H6表达后,细胞的增殖受到抑制,且c-myc基因的表达也下调。结论 U87细胞来源的脑GSLCB7-H6表达上调,并且与GSLC生物学特性相关。
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关键词
脑胶质瘤
胶质瘤干细胞样细胞(GSLC)
B7-H6
细胞增殖
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职称材料
一株特异性识别B7-H3杂交瘤单克隆抗体Y4F11的分析和鉴定
2
作者
时正朋
胡玉敏
+2 位作者
陈翰卿
傅丰庆
张学光
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第10期1402-1406,1411,共6页
目的研制小鼠抗人恶性胸水细胞表面分子的单克隆抗体(m Ab),并对其中Y4F11识别的抗原进行鉴定和验证。方法以胸水细胞为免疫原,常规免疫BALB/c小鼠、采用杂交瘤技术进行细胞融合和筛选阳性杂交瘤克隆;选取Y4F11为实验对象,采用流式细胞...
目的研制小鼠抗人恶性胸水细胞表面分子的单克隆抗体(m Ab),并对其中Y4F11识别的抗原进行鉴定和验证。方法以胸水细胞为免疫原,常规免疫BALB/c小鼠、采用杂交瘤技术进行细胞融合和筛选阳性杂交瘤克隆;选取Y4F11为实验对象,采用流式细胞术分析其在初始和活化免疫细胞(T细胞、B细胞、NK细胞和单核细胞)上的结合情况;通过免疫共沉淀法获得与Y4F11特异性结合的条带、割胶、蛋白质谱测序后拼接出肽段,并进行BLAST分析比对;采用Western blot法、Dot-blot法及流式细胞术验证Y4F11与B7同源物3(B7-H3)的抗体抗原关系。结果获得78株能持续分泌识别恶性胸水细胞表面表达分子的抗体的杂交瘤细胞株,其中Y4F11与胸水细胞结合最高;Y4F11特异识别的条带相对分子质量(Mr)大小约为50 000,质谱结果经BLAST比对为B7-H3分子;继而的结合实验显示,Y4F11可以与B7-H3的转基因细胞结合,也可以与B7-H3融合蛋白有效地结合,B7-H3在免疫细胞表面表达的模式与Y4F11抗体在这些细胞上的结合一致,表明Y4F11识别的抗原分子为B7-H3。结论成功获得1株持续表达B7-H3 m Ab的杂交瘤细胞株Y4F11,为进一步研究分析B7-H3的生物学功能提供了物质基础。
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关键词
恶性胸水
B7-H3
单克隆抗体
质谱测序
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职称材料
题名
U87细胞来源的脑胶质瘤干细胞样细胞B7-H6表达上调且与其生物学特性相关
被引量：
1
1
作者
陈翰卿
时正朋
高兵
傅丰庆
张学光
机构
苏州大学医学部基础医学
与生物
科学学院
苏州大学附属第一医院临床免疫研究所
江苏省干细胞与生物医用材料重点实验室
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第9期1168-1173,共6页
基金
国家自然科学基金(31170834)
文摘
目的探讨B7家族分子B7-H6在脑胶质瘤干细胞样细胞(GSLC)中的表达及其意义。方法使用亚克隆的方法并利用GSLC在体外形成神经细胞球的特性,从U87细胞株中筛选得到脑GSLC;通过实时定量PCR和流式细胞术检测干细胞标志分子c-myc、性别决定区基因Y盒2(Sox2)、CD133、神经上皮干细胞蛋白(nestin)、CXC趋化因子受体4(CXCR4)的表达;通过化疗药物多柔比星、顺铂、卡铂杀伤鉴定其是否具有耐药特性;通过实时定量PCR及流式细胞术获得脑GSLC中B7家族的表达;采用小干涉RNA(si RNA)干扰下调B7-H6表达,CCK-8法检测细胞增殖的变化。结果使用亚克隆方法分离获得的脑GSLC能在体外形成神经细胞球,上调表达多种干细胞标志分子CD133、nestin、CXCR4,具有显著的耐药特性。B7家族分子B7-H1、B7-H3、B7-H4和B7-H6在得到脑GSLC中均表达,与原代U87细胞相比,细胞膜上的B7-H6的表达发生显著上调,使用si RNA干扰B7-H6表达后,细胞的增殖受到抑制,且c-myc基因的表达也下调。结论 U87细胞来源的脑GSLCB7-H6表达上调,并且与GSLC生物学特性相关。
关键词
脑胶质瘤
胶质瘤干细胞样细胞(GSLC)
B7-H6
细胞增殖
Keywords
glioma
glioma stem like cells （GSLCs）
BT-H6
cell proliferation
分类号
R392.12 [医药卫生—免疫学]
Q279 [生物学—细胞生物学]
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职称材料
题名
一株特异性识别B7-H3杂交瘤单克隆抗体Y4F11的分析和鉴定
2
作者
时正朋
胡玉敏
陈翰卿
傅丰庆
张学光
机构
苏州大学基础医学
与生物
科学学院
苏州大学附属第一医院
江苏省
临床免疫研究所
江苏省干细胞与生物医用材料重点实验室
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第10期1402-1406,1411,共6页
基金
国家自然科学基金(31170834)
文摘
目的研制小鼠抗人恶性胸水细胞表面分子的单克隆抗体(m Ab),并对其中Y4F11识别的抗原进行鉴定和验证。方法以胸水细胞为免疫原,常规免疫BALB/c小鼠、采用杂交瘤技术进行细胞融合和筛选阳性杂交瘤克隆;选取Y4F11为实验对象,采用流式细胞术分析其在初始和活化免疫细胞(T细胞、B细胞、NK细胞和单核细胞)上的结合情况;通过免疫共沉淀法获得与Y4F11特异性结合的条带、割胶、蛋白质谱测序后拼接出肽段,并进行BLAST分析比对;采用Western blot法、Dot-blot法及流式细胞术验证Y4F11与B7同源物3(B7-H3)的抗体抗原关系。结果获得78株能持续分泌识别恶性胸水细胞表面表达分子的抗体的杂交瘤细胞株,其中Y4F11与胸水细胞结合最高;Y4F11特异识别的条带相对分子质量(Mr)大小约为50 000,质谱结果经BLAST比对为B7-H3分子;继而的结合实验显示,Y4F11可以与B7-H3的转基因细胞结合,也可以与B7-H3融合蛋白有效地结合,B7-H3在免疫细胞表面表达的模式与Y4F11抗体在这些细胞上的结合一致,表明Y4F11识别的抗原分子为B7-H3。结论成功获得1株持续表达B7-H3 m Ab的杂交瘤细胞株Y4F11,为进一步研究分析B7-H3的生物学功能提供了物质基础。
关键词
恶性胸水
B7-H3
单克隆抗体
质谱测序
Keywords
malignant pleural effusions
B7-H3
monoclonal antibody
mass spectrometry sequencing
分类号
Q813.2 [生物学—生物工程]
R392.11 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
U87细胞来源的脑胶质瘤干细胞样细胞B7-H6表达上调且与其生物学特性相关
陈翰卿
时正朋
高兵
傅丰庆
张学光
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
一株特异性识别B7-H3杂交瘤单克隆抗体Y4F11的分析和鉴定
时正朋
胡玉敏
陈翰卿
傅丰庆
张学光
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016
0
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