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腺病毒介导人血管内皮细胞生长因子基因感染NIH3T3细胞的实验研究
被引量：
3
1
作者
韩焱福
刘军
+3 位作者
宋建星
潘银根
黄盛东
龚德军
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第8期929-933,共5页
目的:探讨腺病毒介导人血管内皮细胞生长因子(hVEGF)基因感染NIH3T3细胞后目的基因表达情况及其对细胞增殖分化的影响,并观察体内移植后的表达情况及其血管生成效应。方法:构建含hVEGF基因重组腺病毒Ad.hVEGF,体外感染NIH3T3细胞,采用...
目的:探讨腺病毒介导人血管内皮细胞生长因子(hVEGF)基因感染NIH3T3细胞后目的基因表达情况及其对细胞增殖分化的影响,并观察体内移植后的表达情况及其血管生成效应。方法:构建含hVEGF基因重组腺病毒Ad.hVEGF,体外感染NIH3T3细胞,采用荧光显微镜和流式细胞术检测其转染效果和转染率,采用免疫组化、RT-PCR和ELISA法分别检测转染后的NIH3T3细胞VEGF的表达情况。将转染后的NIH3T3细胞移植于小鼠背部皮肤缺损模型上,1周后取创面覆盖的脱细胞真皮组织标本,免疫组化检测组织VEGF的表达,并行组织新生血管计数。结果:携带hVEGF基因的重组腺病毒对于NIH3T3细胞具有较高的转染效率,转染效率与病毒感染复制数(multiplicities of infection,MOI)具有量效关系。MOI为100倍时,转染效率达95%。RT-PCR和免疫组化检测到,Ad.hVEGF感染NIH3T3细胞24 h后即可在基因和蛋白质水平表达,ELISA法检测到VEGF第3日表达分泌较高,7 d时达到表达高峰(1052 pg/ml),13 d后仍可检测到VEGF的表达。2周内MTT法动态检测D值,转染组细胞与未转染组细胞比较无显著性差异(P>0.05)。转染细胞体内种植后在组织中亦可明显表达VEGF,实验组新生血管数显著高于对照组(P<0.01)。结论:腺病毒介导的VEGF基因可有效转染NIH3T3细胞,体内外均可有效表达目的基因,并可促进移植组织血管新生。
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关键词
血管内皮细胞生长因子
NIH3T3细胞
腺病毒
细胞增殖
细胞分化
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职称材料
题名
腺病毒介导人血管内皮细胞生长因子基因感染NIH3T3细胞的实验研究
被引量：
3
1
作者
韩焱福
刘军
宋建星
潘银根
黄盛东
龚德军
机构
第二军医大学长海
医院
整形外
科
江苏省启东市人民医院烧伤科
第二军医大学长海
医院
胸心外
科
出处
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第8期929-933,共5页
基金
上海市卫生局青年科研基金(2006Y41)~~
文摘
目的:探讨腺病毒介导人血管内皮细胞生长因子(hVEGF)基因感染NIH3T3细胞后目的基因表达情况及其对细胞增殖分化的影响,并观察体内移植后的表达情况及其血管生成效应。方法:构建含hVEGF基因重组腺病毒Ad.hVEGF,体外感染NIH3T3细胞,采用荧光显微镜和流式细胞术检测其转染效果和转染率,采用免疫组化、RT-PCR和ELISA法分别检测转染后的NIH3T3细胞VEGF的表达情况。将转染后的NIH3T3细胞移植于小鼠背部皮肤缺损模型上,1周后取创面覆盖的脱细胞真皮组织标本,免疫组化检测组织VEGF的表达,并行组织新生血管计数。结果:携带hVEGF基因的重组腺病毒对于NIH3T3细胞具有较高的转染效率,转染效率与病毒感染复制数(multiplicities of infection,MOI)具有量效关系。MOI为100倍时,转染效率达95%。RT-PCR和免疫组化检测到,Ad.hVEGF感染NIH3T3细胞24 h后即可在基因和蛋白质水平表达,ELISA法检测到VEGF第3日表达分泌较高,7 d时达到表达高峰(1052 pg/ml),13 d后仍可检测到VEGF的表达。2周内MTT法动态检测D值,转染组细胞与未转染组细胞比较无显著性差异(P>0.05)。转染细胞体内种植后在组织中亦可明显表达VEGF,实验组新生血管数显著高于对照组(P<0.01)。结论:腺病毒介导的VEGF基因可有效转染NIH3T3细胞,体内外均可有效表达目的基因,并可促进移植组织血管新生。
关键词
血管内皮细胞生长因子
NIH3T3细胞
腺病毒
细胞增殖
细胞分化
Keywords
vascular endothelial growth factor
NIH3T3 cells
adenovirus
cell proliferation
cell differentiation
分类号
R329.2 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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题名
作者
出处
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被引量
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1
腺病毒介导人血管内皮细胞生长因子基因感染NIH3T3细胞的实验研究
韩焱福
刘军
宋建星
潘银根
黄盛东
龚德军
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008
3
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