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检测猪链球菌2型的溶菌酶释放蛋白(MRP)的PCR方法的建立 被引量:23
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作者 倪艳秀 何孔旺 +4 位作者 王继春 何家惠 还红华 陆承平 姚火春 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期20-22,共3页
根据猪链球菌 2型的mrp基因自行设计和合成了一对可扩增长度为 885bp目的片段的引物 ,成功地建立了检测溶菌酶释放蛋白 (MRP)的PCR方法。用XbaⅠ内切酶进行酶切 ,获得了与预期一致的 5 78bp和 30 7bp的 2个片段。并进行了PCR的特异性试... 根据猪链球菌 2型的mrp基因自行设计和合成了一对可扩增长度为 885bp目的片段的引物 ,成功地建立了检测溶菌酶释放蛋白 (MRP)的PCR方法。用XbaⅠ内切酶进行酶切 ,获得了与预期一致的 5 78bp和 30 7bp的 2个片段。并进行了PCR的特异性试验和敏感性试验。对马链球菌兽疫亚种、猪丹毒杆菌、猪肺疫巴氏杆菌和猪肺炎支原体的PCR检测结果均呈阴性 ;检测的敏感度可达 10 0个细菌。另外 ,对 9株从病猪体内分离的猪链球菌 2型菌株进行了检测 ,8株呈阳性 ;对 15份正常屠宰猪扁桃体分离物的检测结果是 1份为阳性。结果表明此法特异性和敏感性均很高 ,可作为MRP快速诊断和流行病学调查的手段。 展开更多
关键词 猪链球菌2型 溶菌酶释放蛋白 PCR 检测方法
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产肠毒素性大肠杆菌肠毒素的研究概况 被引量:17
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作者 张雪寒 何孔旺 张书霞 《动物医学进展》 CSCD 2003年第3期38-40,共3页
本文分析了大肠杆菌耐热肠毒素 (heat-stable,ST)和不耐热肠毒素 (heat- labile,LT)生物学特性、分子水平机制及其应用价值。一方面着重讲述 LT作为粘膜免疫佐剂的研究前景 ,利用体外定点突变方法构建不同的突变株并且均具有不同程度的... 本文分析了大肠杆菌耐热肠毒素 (heat-stable,ST)和不耐热肠毒素 (heat- labile,LT)生物学特性、分子水平机制及其应用价值。一方面着重讲述 LT作为粘膜免疫佐剂的研究前景 ,利用体外定点突变方法构建不同的突变株并且均具有不同程度的佐剂活性 ,是霍乱毒素 (Choleratoxin,CT)很有希望的替代品。另一方面讲述ETEC基因工程亚单位疫苗的研究概况。ETEC只有 LT、ST两类肠毒素 ,通过不同方式构建融合基因探讨对 ETEC性腹泻防治效果。目前 ,这两方面均卓有成效 。 展开更多
关键词 产肠 毒素性 大肠杆菌 肠毒素 分子生物学特性 免疫佐剂
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检测猪链球菌2型胞外因子(EF)的PCR方法的建立 被引量:10
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作者 倪艳秀 何孔旺 +4 位作者 王继春 何家惠 还红华 陆承平 姚火春 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2001年第4期57-59,共3页
根据猪链球菌 2型的ef基因和ef 基因合成了一对可扩增长度为 6 2 6bp目的片段的引物 ,成功地建立了检测胞外因子 (EF)的PCR方法。用HaeⅡ内切酶进行酶切 ,获得了与预期一致的 35 4bp和 2 72bp的两个片段。并进行了PCR的特异性试验和敏... 根据猪链球菌 2型的ef基因和ef 基因合成了一对可扩增长度为 6 2 6bp目的片段的引物 ,成功地建立了检测胞外因子 (EF)的PCR方法。用HaeⅡ内切酶进行酶切 ,获得了与预期一致的 35 4bp和 2 72bp的两个片段。并进行了PCR的特异性试验和敏感性试验。对马腺疫链球菌兽疫亚种、猪丹毒杆菌、猪肺疫巴氏杆菌和猪肺炎霉形体的PCR检测结果均呈阴性 ;检测的敏感度可达 10 0个细菌。另外 ,对 9株猪链球菌 2型菌株进行了检测 ,7株呈EF阳性 ,1株呈EF 阳性 ,1株呈EF阴性 ;对 15份正常屠宰猪扁桃体分离物的检测结果 1份为阳性。实验结果表明此法特异性和敏感性均很高 。 展开更多
关键词 猪链球菌2型 胞外因子 PCR
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鸡传染性法氏囊病分子流行病学研究
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作者 白文霞 鲍恩东 +1 位作者 侯继波 何孔旺 《动物科学与动物医学》 2004年第8期51-53,共3页
15个江苏省IBDV分离株,对其VP2高变区进行RT-PCR扩增、测序,得到约560bp长的片段。分析比较15个IBDV分离株与参考毒株的VP2高变区(AccI-SpeI)推断的氨基酸序列,构建进化树。氨基酸序列分析以及进化树分析表明,15个IBDV分离株是超强毒株... 15个江苏省IBDV分离株,对其VP2高变区进行RT-PCR扩增、测序,得到约560bp长的片段。分析比较15个IBDV分离株与参考毒株的VP2高变区(AccI-SpeI)推断的氨基酸序列,构建进化树。氨基酸序列分析以及进化树分析表明,15个IBDV分离株是超强毒株。而且目前vvIBDVs在亚洲各个国家流行,且与欧洲国家的vvIBDVs的进化关系很近。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病毒 VP2高变区 超强毒株 变异毒株 古典毒株 致弱毒株
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IBDV不同分离株VP2高变区的基因序列分析
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作者 白文霞 鲍恩东 +1 位作者 侯继波 何孔旺 《四川畜牧兽医》 2004年第12期26-27,共2页
对9个IBDV(传染性法氏囊病毒)分离株的VP2高变区进行RT-PCR扩增、测序,得到约560bp长的片段。分析比较9个IBDV分离株与参考毒株的VP2高变区(AccI~SpeI)的氨基酸序列,并构建进化树。结果表明,9个IBDV分离株是超强毒株,并且得出亚洲目前... 对9个IBDV(传染性法氏囊病毒)分离株的VP2高变区进行RT-PCR扩增、测序,得到约560bp长的片段。分析比较9个IBDV分离株与参考毒株的VP2高变区(AccI~SpeI)的氨基酸序列,并构建进化树。结果表明,9个IBDV分离株是超强毒株,并且得出亚洲目前流行的vvIBDVs与欧洲国家的vvIBDVs的进化关系很近。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病毒 变异毒株 致弱毒株 基因序列 进化
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