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叶面喷施抗坏血酸钙对水培生菜生长和采后品质的影响被引量：2: 1; 作者何鑫刘贤金 +3 位作者孙晓明梁颖卢海燕丁莹《食品科学技术学报》 CAS 2017年第5期78-83,共6页; 考察了叶面喷施1,3,5 mg/L抗坏血酸钙对水培生菜矿物质吸收及采后抗坏血酸、亚硝酸盐质量分数的影响。结果表明,叶面喷施抗坏血酸钙初期可显著增加生菜叶片中抗坏血酸质量分数,但随着栽培时间的延长各处理组与对照组的差异不显著。随着... 展开更多; 关键词抗坏血酸钙水培生菜采后品质矿物质元素; 在线阅读下载PDF 职称材料

间接竞争时间分辨荧光免疫分析法检测稻米中Cry1C毒素被引量：6: 2; 作者徐重新杨晶祎 +6 位作者陆梦晓仲建峰张存政张霄何鑫刘媛刘贤金《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期44-48,共5页; 利用免疫新西兰大白兔制备Cry1C毒素多克隆抗体,建立间接竞争时间分辨荧光免疫分析（CI-TRFIA）方法,用于稻米中Cry1C毒素的残留检测。通过4次免疫,采集Cry1C毒素多克隆抗体血清,并用饱和硫酸铵沉淀和Protein A柱纯化,测定抗体效价;以制... 展开更多; 关键词 Cry1C毒素多克隆抗体稻米时间分辨荧光免疫分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

磁珠筛选抗Cry2Aa人源化单链抗体及检测方法的建立被引量：2: 3; 作者武爱华王耘 +2 位作者刘媛胡晓丹刘贤金《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2017年第4期945-950,共6页; 为了建立转基因成分的快速检测方法,利用亲和磁珠偶联Cry2Aa毒素蛋白从人源化噬菌体抗体库Tomlinson I中液相淘选特异性单链抗体(sc Fv)。通过4轮"扩增-吸附-洗脱",从洗脱产物计数板上随机挑取单克隆进行初步鉴定。选取相对... 展开更多; 关键词 Cry2Aa毒素单链抗体磁珠间接竞争ELISA; 在线阅读下载PDF 职称材料

人源化抗Cry1B毒素蛋白单链抗体的原核表达及生物学活性测定被引量：5: 4; 作者徐重新张存政 +3 位作者张霄刘媛黄鹰刘贤金《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期47-52,共6页; 利用含有重组噬菌粒的噬菌体直接侵染大肠杆菌(Escherichia coli)HB2151,原核分泌表达了抗苏云金芽孢杆菌(Ba-cillus thuringiensis,Bt)Cry1B毒素蛋白的单链抗体(single chain-variable fragment,scFv),经纯化、鉴定抗原结合活性后,建立... 展开更多; 关键词 Cry1B毒素蛋白单链抗体可溶性表达抗原结合活性; 在线阅读下载PDF 职称材料

含水量、储存条件对储存期小麦中DON、NIV毒素含量变化的影响被引量：9: 5; 作者姚振宇殷宪超 +4 位作者俞明正董飞祭芳徐剑宏史建荣《江苏农业科学》北大核心 2016年第12期300-303,共4页; 研究含水量分别为11.5%、12.8%、15.7%的小麦在4℃冷库、25℃恒温室、常温库、地下仓库4种环境下储藏0～90d镰刀菌毒素DON、NIV含量的变化情况,并对不同储存环境下小麦含水量变化情况进行分析.结果表明：90d内,3种含水量的小麦在4℃冷库... 展开更多; 关键词小麦脱氧雪腐镰刀菌烯醇雪腐镰刀菌烯醇储藏镰刀菌毒素; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名叶面喷施抗坏血酸钙对水培生菜生长和采后品质的影响被引量：2: 1; 作者何鑫刘贤金孙晓明梁颖卢海燕丁莹; 机构江苏省农业科学院食品质量安全检测研究所/江苏省食品质量安全重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地; 出处《食品科学技术学报》 CAS 2017年第5期78-83,共6页; 基金江苏省自主创新项目(CX(15)1016); 文摘考察了叶面喷施1,3,5 mg/L抗坏血酸钙对水培生菜矿物质吸收及采后抗坏血酸、亚硝酸盐质量分数的影响。结果表明,叶面喷施抗坏血酸钙初期可显著增加生菜叶片中抗坏血酸质量分数,但随着栽培时间的延长各处理组与对照组的差异不显著。随着处理时间的延长,可溶性蛋白、叶绿素、硝酸盐质量分数升高。叶面喷施抗坏血酸钙可增加叶片数、叶面积、生菜地上部分含水量,影响生菜对矿物质元素的吸收。随着抗坏血酸钙处理浓度升高,钾质量分数逐渐升高,钙质量分数均有不同程度的升高,氮、锌质量分数逐渐下降。栽培期喷施抗坏血酸钙可降低采后抗坏血酸及亚硝酸盐的产生。叶面喷施适当浓度抗坏血酸钙可强化水培生菜钙元素和部分微量元素质量分数,增加营养品质,延长货架期。; 关键词抗坏血酸钙水培生菜采后品质矿物质元素; Keywords ascorbic acid calcium hydroponic lettuce post-harvest quality mineral element; 分类号 TS255.2 [轻工技术与工程—农产品加工及贮藏工程] TS255.3 [轻工技术与工程—农产品加工及贮藏工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名间接竞争时间分辨荧光免疫分析法检测稻米中Cry1C毒素被引量：6: 2; 作者徐重新杨晶祎陆梦晓仲建峰张存政张霄何鑫刘媛刘贤金; 机构江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所/江苏省食品质量安全重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地/农业部农产品质量安全控制技术与标准重点实验室; 出处《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期44-48,共5页; 基金国家973计划项目(2012CB722505) 国家自然科学基金项目(31371778 31201535); 文摘利用免疫新西兰大白兔制备Cry1C毒素多克隆抗体,建立间接竞争时间分辨荧光免疫分析（CI-TRFIA）方法,用于稻米中Cry1C毒素的残留检测。通过4次免疫,采集Cry1C毒素多克隆抗体血清,并用饱和硫酸铵沉淀和Protein A柱纯化,测定抗体效价;以制备Eu-N1标记的羊抗兔IgG作为检测抗体,建立Cry1C毒素的CI-TRFIA检测方法,并进行抗原类似物的特异性分析和Cry1C毒素在稻米中的添加回收试验。结果表明：获得的多克隆抗体质量浓度为3.86 mg·mL^-1,效价为1∶48 000;建立的CI-TRFIA检测方法,其灵敏度（IC10）为0.074 ng·mL^-1,中抑制浓度（IC50）为60.16 ng·mL^-1,线性检测范围（IC20~IC80）为0.96~1 633.60 ng·mL^-1;对Cry1B、Cry1Ab和Cry1Ac均有一定的交叉反应;添加回收试验的批内、批间回收率为84.53%~107.12%,变异系数为6.05%~11.24%。结论：该检测方法稳定性和重复性较好,可以满足Cry1C毒素的检测要求。; 关键词 Cry1C毒素多克隆抗体稻米时间分辨荧光免疫分析; Keywords Cry1C toxin polyclonal antibody rice time-resolved fluorescence immunoassay（TRFIA）; 分类号 Q936 [生物学—微生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名磁珠筛选抗Cry2Aa人源化单链抗体及检测方法的建立被引量：2: 3; 作者武爱华王耘刘媛胡晓丹刘贤金; 机构江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所/江苏省食品质量安全重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地/农业部农产品质量安全控制技术与标准重点实验室金陵科技学院园艺学院; 出处《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2017年第4期945-950,共6页; 基金国家自然科学基金项目(3111343 31201535) +2 种基金金陵科技学院博士启动项目(jit-6-201518); 文摘为了建立转基因成分的快速检测方法,利用亲和磁珠偶联Cry2Aa毒素蛋白从人源化噬菌体抗体库Tomlinson I中液相淘选特异性单链抗体(sc Fv)。通过4轮"扩增-吸附-洗脱",从洗脱产物计数板上随机挑取单克隆进行初步鉴定。选取相对结合活性最好的阳性克隆建立间接竞争ELISA,确定其检测范围。筛选后第4轮相对产出率较第1轮提高了4.07×106倍;单克隆ELISA鉴定出8个含有完整外源基因片段的阳性克隆,测序后获得3个不同序列的阳性克隆。D5克隆的噬菌体上清对Cry2Aa的检测灵敏度(IC10)为6.632 ng/ml,线性范围为0.016~2.881μg/ml。该克隆对Cry2Aa具有良好的特异性和板内板间重现性。; 关键词 Cry2Aa毒素单链抗体磁珠间接竞争ELISA; Keywords Cry2Aa toxin specific single chain antibody fragments (scFv) magnetic bead indirect-competitive ELISA; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人源化抗Cry1B毒素蛋白单链抗体的原核表达及生物学活性测定被引量：5: 4; 作者徐重新张存政张霄刘媛黄鹰刘贤金; 机构江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所/江苏省食品质量安全重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地/农业部农产品质量安全控制技术与标准重点实验室南京师范大学生命科学学院/江苏省微生物与功能基因组学重点实验室; 出处《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期47-52,共6页; 基金国家973计划项目(2012CB722505) 国家自然科学基金项目(31272109 31201535); 文摘利用含有重组噬菌粒的噬菌体直接侵染大肠杆菌(Escherichia coli)HB2151,原核分泌表达了抗苏云金芽孢杆菌(Ba-cillus thuringiensis,Bt)Cry1B毒素蛋白的单链抗体(single chain-variable fragment,scFv),经纯化、鉴定抗原结合活性后,建立了Cry1B毒素蛋白的ELISA检测方法。方法以展示scFv抗体的重组噬菌体感染E.coli HB2151,经PCR和基因测序检测克隆scFv基因片段的完整性,用SDS-PAGE方法检测scFv在E.coli HB2151宿主菌中的表达水平,用ELISA测定法检测scFv的抗原结合活性,通过时间梯度优化获得可溶性表达蛋白的最佳培养时间。结果表明:经PCR、DNA电泳及基因测序等,均证实重组噬菌体对E.coli HB2151宿主菌侵染成功,SDS-PAGE电泳结果表明scFv抗体表达成功,纯化后的蛋白质量浓度为132μg.mL-1。以纯化的scFv蛋白为基础建立了对Cry1B毒素蛋白的间接竞争ELISA法,方法的抑制中质量浓度(IC50)为1.398μg.mL-1,最低检测限(IC10)为0.025 7μg.mL-1,线性检测范围为0.5～5.0μg.mL-1,scFv对Cry1C的交叉反应率为7.51%;与Cry1Ab、Cry1Ac的交叉反应率均小于0.1%;在培养温度30℃,1 mmol.L-1IPTG诱导条件下,scFv在E.coliHB2151宿主中的最佳诱导表达时间为12 h。本研究成功地将抗Cry1B毒素蛋白的scFv在E.coli HB2151中进行了可溶性表达,获得了具有抗原结合活性的scFv融合型抗体,为实际生产应用与试剂盒研发提供了基础。; 关键词 Cry1B毒素蛋白单链抗体可溶性表达抗原结合活性; Keywords CrylB toxin single chain variable fragments（scFv） soluble expression antigen binding activity; 分类号 Q936 [生物学—微生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名含水量、储存条件对储存期小麦中DON、NIV毒素含量变化的影响被引量：9: 5; 作者姚振宇殷宪超俞明正董飞祭芳徐剑宏史建荣; 机构江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所/江苏省食品质量安全重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地/农业部农产品质量安全风险评估实验室(南京)/江苏省现代粮食流通与安全协同创新中心; 出处《江苏农业科学》北大核心 2016年第12期300-303,共4页; 基金国家自然科学基金(编号:31601594) 国家农产品质量安全风险评估项目(编号:GJFP2016001003) +1 种基金江苏省农业科技自主创新资金[编号:CX(16)1059]; 文摘研究含水量分别为11.5%、12.8%、15.7%的小麦在4℃冷库、25℃恒温室、常温库、地下仓库4种环境下储藏0～90d镰刀菌毒素DON、NIV含量的变化情况,并对不同储存环境下小麦含水量变化情况进行分析.结果表明：90d内,3种含水量的小麦在4℃冷库和25℃恒温室条件下,DON、NIV毒素均未发生显著变化.储存在常温库和地下仓库2种不可控环境下的3种含水量小麦在60d后DON毒素含量降低,NIV毒素含量未发生显著变化.; 关键词小麦脱氧雪腐镰刀菌烯醇雪腐镰刀菌烯醇储藏镰刀菌毒素; 分类号 S339.32 [农业科学—作物遗传育种]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	叶面喷施抗坏血酸钙对水培生菜生长和采后品质的影响	何鑫刘贤金孙晓明梁颖卢海燕丁莹	《食品科学技术学报》 CAS	2017	2	在线阅读下载PDF 职称材料
2	间接竞争时间分辨荧光免疫分析法检测稻米中Cry1C毒素	徐重新杨晶祎陆梦晓仲建峰张存政张霄何鑫刘媛刘贤金	《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2014	6	在线阅读下载PDF 职称材料
3	磁珠筛选抗Cry2Aa人源化单链抗体及检测方法的建立	武爱华王耘刘媛胡晓丹刘贤金	《江苏农业学报》 CSCD 北大核心	2017	2	在线阅读下载PDF 职称材料
4	人源化抗Cry1B毒素蛋白单链抗体的原核表达及生物学活性测定	徐重新张存政张霄刘媛黄鹰刘贤金	《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2013	5	在线阅读下载PDF 职称材料
5	含水量、储存条件对储存期小麦中DON、NIV毒素含量变化的影响	姚振宇殷宪超俞明正董飞祭芳徐剑宏史建荣	《江苏农业科学》北大核心	2016	9	在线阅读下载PDF 职称材料