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我国抗ALS类除草剂油菜种质创制与研究进展被引量：10: 1; 作者胡茂龙浦惠明张洁夫《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期679-686,共8页; 化学除草是控制田间草害的有效手段,但我国油菜化学除草面积非常有限。创制对特定除草剂具有选择抗性的油菜新种质,选育抗性品种是实现我国油菜化学除草的有效途径。乙酰乳酸合酶(acetolactate synthase,ALS)类除草剂具有高效低量、选... 展开更多; 关键词油菜化学除草 ALS类除草剂靶酶突变种质创制抗性品种; 在线阅读下载PDF 职称材料

油菜乙酰乳酸合酶突变体S638N的酶学特性及其对ALS类除草剂的抗性被引量：6: 2; 作者胡茂龙浦惠明 +4 位作者龙卫华高建芹戚存扣张洁夫陈松《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1353-1360,共8页; 在对油菜抗咪唑啉酮类除草剂基因Bn ALS1R克隆与功能验证基础上,为比较抗性基因编码的乙酰乳酸合酶突变体S638N酶学特性及其对ALS类除草剂抗性与野生型的差异,构建基因原核表达载体,在大肠杆菌中表达S638N和野生型的重组融合蛋白。SDS-P... 展开更多; 关键词油菜咪唑啉酮类除草剂乙酰乳酸合酶 S638N 除草剂抗性; 在线阅读下载PDF 职称材料

油菜乙酰乳酸合酶基因BnALS3的亚细胞定位、原核表达及其酶活分析被引量：3: 3; 作者胡茂龙龙卫华 +6 位作者高建芹陈锋周晓婴张维陈松张洁夫浦惠明《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期309-317,共9页; 为了研究油菜乙酰乳酸合酶基因BnALS3的亚细胞定位与酶学特性,以甘蓝型油菜(Brassica napus L.)品系N131为材料,采用RT-PCR法克隆到BnALS3的c DNA序列。该序列含有一个长度为1 959bp的开放阅读框,编码蛋白为652个氨基酸,在N端含有一个... 展开更多; 关键词油菜乙酰乳酸合酶叶绿体信号肽亚细胞定位融合蛋白原核表达酶活; 在线阅读下载PDF 职称材料

油菜乙酰羟基酸合酶基因BnAHAS1的克隆及其重组蛋白质的原核表达被引量：3: 4; 作者胡茂龙孔令娜 +5 位作者龙卫华高建芹浦惠明戚存扣张洁夫陈松《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2014年第5期986-991,共6页; 利用RT-PCR技术从甘蓝型油菜宁油16号(Brassica napus L.)中克隆到乙酰羟基酸合酶基因BnAHAS1的cDNA序列,该序列含有1个1 968 bp的开放阅读框,编码蛋白质655个氨基酸,分子量约为7.1×104,预测等电点为6.16。将该基因克隆到原核表达... 展开更多; 关键词乙酰羟基酸合酶除草剂油菜基因克隆原核表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

M342抗除草剂基因CAPS标记的开发与应用被引量：6: 5; 作者程丽胡茂龙 +7 位作者浦惠明龙卫华高建芹陈锋周晓婴张维陈松张洁夫《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2019年第2期241-247,共7页; M342是利用EMS诱变定向选育获得的甘蓝型油菜抗磺酰脲类除草剂新种质。通过M342抗性基因与敏感型油菜的ALS基因序列分析结果表明,M342的BnALS3基因存在1处SNP突变,导致编码的蛋白质第556位色氨酸突变为亮氨酸,该突变导致基因序列对BsrD ... 展开更多; 关键词油菜磺酰脲类除草剂乙酰乳酸合酶酶切扩增多态性序列(CAPS)标记; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名我国抗ALS类除草剂油菜种质创制与研究进展被引量：10: 1; 作者胡茂龙浦惠明张洁夫; 机构江苏省农业科学院经济作物研究所/农业部长江下游棉花与油菜重点实验室/国家油料作物改良中心南京分中心/江苏省现代作物生产协同创新中心; 出处《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期679-686,共8页; 基金国家重点研发计划(2016YFD0101300) 国家自然科学基金(31671731) +1 种基金江苏省自然科学基金(BK20151369); 文摘化学除草是控制田间草害的有效手段,但我国油菜化学除草面积非常有限。创制对特定除草剂具有选择抗性的油菜新种质,选育抗性品种是实现我国油菜化学除草的有效途径。乙酰乳酸合酶(acetolactate synthase,ALS)类除草剂具有高效低量、选择性强、杀草谱广等优点,在生产上得到广泛应用。本文简述了ALS基因及其突变产生抗性的机制,着重介绍我国基于ALS靶酶突变的抗除草剂油菜种质创制、抗性生理生化和分子机理等方面的研究进展,并探讨了抗除草剂新种质在油菜抗性新品种选育、杂交油菜制种及抗性基因在转基因工程中的应用。; 关键词油菜化学除草 ALS类除草剂靶酶突变种质创制抗性品种; Keywords rapeseed chemical control of weed ALS-inhibiting herbicides target enzyme mutation development of rapeseed germplasms herbicide-resistant cultivars; 分类号 S565.4 [农业科学—作物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名油菜乙酰乳酸合酶突变体S638N的酶学特性及其对ALS类除草剂的抗性被引量：6: 2; 作者胡茂龙浦惠明龙卫华高建芹戚存扣张洁夫陈松; 机构江苏省农业科学院经济作物研究所/农业部长江下游棉花与油菜重点实验室/国家油料作物改良中心南京分中心; 出处《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1353-1360,共8页; 基金国家高技术研究发展计划(863计划)项目(2011AA10A10403) 国家自然科学基金项目(31101174) 江苏省农业科学院基本科研业务专项[ZX(15)1004]资助; 文摘在对油菜抗咪唑啉酮类除草剂基因Bn ALS1R克隆与功能验证基础上,为比较抗性基因编码的乙酰乳酸合酶突变体S638N酶学特性及其对ALS类除草剂抗性与野生型的差异,构建基因原核表达载体,在大肠杆菌中表达S638N和野生型的重组融合蛋白。SDS-PAGE和Western blot分析表明,S638N和野生型均能表达出约74 k D的特异性重组蛋白。纯化目的蛋白,在不同温度和pH条件下,测定S638N和野生型的酶活性。结果显示,温度和pH对突变酶活性的影响与野生型相同,表现为先升后降,在37℃、pH 7.0条件下催化活性均最高。同时,该突变酶的酶学动力学参数Km和Vmax与野生型没有显著差异,其对3个辅助因子的响应曲线也与野生型类似,缺少其中任何一个辅助因子均使突变酶S638N基本都没有活性。然而,突变酶S638N对IMI类除草剂抗性显著高于野生型,而对Su类除草剂敏感性和野生型相同。因此,突变酶S638N具有对IMI类除草剂的专一抗性,但未改变酶学反应特征。; 关键词油菜咪唑啉酮类除草剂乙酰乳酸合酶 S638N 除草剂抗性; Keywords Rapeseed （Brassica napus L.） Imidazolinone herbicides Acetolactate synthase $638N Herbicide-resistance; 分类号 Q943.2 [生物学—植物学] S565.4 [农业科学—作物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名油菜乙酰乳酸合酶基因BnALS3的亚细胞定位、原核表达及其酶活分析被引量：3: 3; 作者胡茂龙龙卫华高建芹陈锋周晓婴张维陈松张洁夫浦惠明; 机构江苏省农业科学院经济作物研究所/农业部长江下游棉花与油菜重点实验室/国家油料作物改良中心南京分中心; 出处《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期309-317,共9页; 基金国家自然科学基金(31671731) 国家重点研发计划(2016YFD0101300) +2 种基金江苏省自然科学基金(BK20151369) 江苏省农业科学院基本科研业务专项[ZX(15)1004]; 文摘为了研究油菜乙酰乳酸合酶基因BnALS3的亚细胞定位与酶学特性,以甘蓝型油菜(Brassica napus L.)品系N131为材料,采用RT-PCR法克隆到BnALS3的c DNA序列。该序列含有一个长度为1 959bp的开放阅读框,编码蛋白为652个氨基酸,在N端含有一个由49个氨基酸残基组成的叶绿体信号肽序列。将该信号肽序列构建至植物表达载体35S::BnALS3-GFP,利用拟南芥原生质体细胞进行瞬时表达,结果显示BnALS3蛋白定位在叶绿体中。构建去除叶绿体信号肽序列的BnALS3原核表达载体p Czn1-BnALS3,转入大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达。SDS-PAGE和Western Blot检测显示,在11℃条件下以终浓度为0.2mmol·L^(-1)的IPTG诱导8h后,p Czn1-BnALS3基因在大肠杆菌中成功表达,融合蛋白His-BnALS3呈部分可溶性,分子量约为67k D。酶活分析表明,原核表达的His-BnALS3最适反应p H值为7.0,最佳反应温度为37℃,酶学常数Km值和Vmax值分别为6.55mmol·L^(-1)和6.40μmol·mg^(-1)·h^(-1)。; 关键词油菜乙酰乳酸合酶叶绿体信号肽亚细胞定位融合蛋白原核表达酶活; Keywords rapeseed acetolactate synthase chloroplast transit peptide subcellular localization fusion protein prokaryotic expression enzymatic activity; 分类号 S565.4 [农业科学—作物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名油菜乙酰羟基酸合酶基因BnAHAS1的克隆及其重组蛋白质的原核表达被引量：3: 4; 作者胡茂龙孔令娜龙卫华高建芹浦惠明戚存扣张洁夫陈松; 机构江苏省农业科学院经济作物研究所/农业部长江下游棉花与油菜重点实验室/国家油料作物改良中心南京分中心南京农业大学植物生产国家级实验教学中心; 出处《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2014年第5期986-991,共6页; 基金国家自然科学基金项目(31101174) 国家高技术研究发展计划项目(2011AA10A10403) +2 种基金南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室开放基金项目(ZW2011006); 文摘利用RT-PCR技术从甘蓝型油菜宁油16号(Brassica napus L.)中克隆到乙酰羟基酸合酶基因BnAHAS1的cDNA序列,该序列含有1个1 968 bp的开放阅读框,编码蛋白质655个氨基酸,分子量约为7.1×104,预测等电点为6.16。将该基因克隆到原核表达载体pCold II中,经酶切和测序鉴定后,将正确的重组质粒pCold IIBnAHAS1导入大肠杆菌BL21(DE3)。在15℃下以终浓度为1 mmol/L的IPTG诱导12 h后,获得预期大小的重组蛋白质His-BnAHAS1,并用Western blot确定此重组蛋白质为目的蛋白质。; 关键词乙酰羟基酸合酶除草剂油菜基因克隆原核表达; Keywords acetohydroxyacid synthase herbi-cide rapeseed gene cloning prokaryotic expression; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名M342抗除草剂基因CAPS标记的开发与应用被引量：6: 5; 作者程丽胡茂龙浦惠明龙卫华高建芹陈锋周晓婴张维陈松张洁夫; 机构江苏省农业科学院经济作物研究所/农业部长江下游棉花与油菜重点实验室/国家油料作物改良中心南京分中心/江苏省现代作物生产协同创新中心; 出处《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2019年第2期241-247,共7页; 基金国家重点研发计划项目(2016YFD0101300) 国家自然科学基金项目(31671731) +1 种基金江苏省自然科学基金项目(BK20151369); 文摘 M342是利用EMS诱变定向选育获得的甘蓝型油菜抗磺酰脲类除草剂新种质。通过M342抗性基因与敏感型油菜的ALS基因序列分析结果表明,M342的BnALS3基因存在1处SNP突变,导致编码的蛋白质第556位色氨酸突变为亮氨酸,该突变导致基因序列对BsrD I内切酶消化的差异。为此设计了8条引物,从中筛选到引物对SU54F/SU58R在不同油菜品种中可以特异性扩增出目的片段,该片段经BsrD I酶切分型正确,从而开发了检测M342中抗性基因BnALS3R的CAPS标记。运用该标记对除草剂敏感型油菜、纯合抗性油菜及杂合抗性油菜BnALS3的基因型进行验证,并应用该标记对F_2、BC_1分离群体进行检测。结果表明,该标记验证的基因型结果与测序结果一致。F_2分离群体有Als3Als3、Als3als3、als3als3 3种基因型,BC_1分离群体有Als3als3、als3als3 2种基因型,与表型鉴定结果一致,遵循单基因遗传分离规律,表明该标记可以应用于抗性基因的检测。CAPS标记的获得为抗除草剂油菜的分子标记辅助选择育种奠定了基础。; 关键词油菜磺酰脲类除草剂乙酰乳酸合酶酶切扩增多态性序列(CAPS)标记; Keywords rapeseed ( Brassica napus L.) sulfonylurea herbicides acetolactate synthase cleaved amplified polymorphic sequence (CAPS) marker; 分类号 Q789 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	我国抗ALS类除草剂油菜种质创制与研究进展	胡茂龙浦惠明张洁夫	《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心	2018	10	在线阅读下载PDF 职称材料
2	油菜乙酰乳酸合酶突变体S638N的酶学特性及其对ALS类除草剂的抗性	胡茂龙浦惠明龙卫华高建芹戚存扣张洁夫陈松	《作物学报》 CAS CSCD 北大核心	2015	6	在线阅读下载PDF 职称材料
3	油菜乙酰乳酸合酶基因BnALS3的亚细胞定位、原核表达及其酶活分析	胡茂龙龙卫华高建芹陈锋周晓婴张维陈松张洁夫浦惠明	《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心	2018	3	在线阅读下载PDF 职称材料
4	油菜乙酰羟基酸合酶基因BnAHAS1的克隆及其重组蛋白质的原核表达	胡茂龙孔令娜龙卫华高建芹浦惠明戚存扣张洁夫陈松	《江苏农业学报》 CSCD 北大核心	2014	3	在线阅读下载PDF 职称材料
5	M342抗除草剂基因CAPS标记的开发与应用	程丽胡茂龙浦惠明龙卫华高建芹陈锋周晓婴张维陈松张洁夫	《江苏农业学报》 CSCD 北大核心	2019	6	在线阅读下载PDF 职称材料