动物源性人兽共患细菌病防控生物新制剂的研究Ⅰ．分泌抗大肠杆菌O157：H7单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立 被引量：9

1

作者 夏兴霞 刘洁 +4 位作者 王永山 诸玉梅 欧阳伟 何孔旺 张雪寒 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2009年第2期291-295,共5页

将E．coli O157：H7（EHEC—O157：H7）用甲醛灭活、超声破碎，免疫BALB／c小鼠，制备免疫脾细胞；与SP2／0骨髓瘤细胞融合后，获得7株分泌抗E．coli O157：H7单克隆抗体（mAbs）的杂交瘤细胞株，分别命名为F5、B8、E7、G9、G11、F1和C3... 将E．coli O157：H7（EHEC—O157：H7）用甲醛灭活、超声破碎，免疫BALB／c小鼠，制备免疫脾细胞；与SP2／0骨髓瘤细胞融合后，获得7株分泌抗E．coli O157：H7单克隆抗体（mAbs）的杂交瘤细胞株，分别命名为F5、B8、E7、G9、G11、F1和C3，Ig亚类分别是IgG2ak、IgG2aK、IgG1K、IgMK、IgMh、IgMK和IgG2aK。用间接ELISA检测，E7和F1细胞培养上清液的效价为1．6×10^3，腹水效价均为1×10^11；C3、F5、B8、G9和G11细胞培养上清液的效价为1×10～2×10^2，腹水效价均为1×10^3。相加ELISA结果显示，F1、G9和G113株mAbs对应相同的抗原表位，而其它4株对应不同的抗原表位。用间接ELISA分析特异性，7株mAbs与某些其他血清型的大肠杆菌有交叉反应。Westernblotting表明，c3、E7和F13株mAbs在蛋白分子量28×10^3处有特异性条带，而其它4株mAbs则未显示蛋白带。 展开更多

关键词 肠出血性大肠杆菌O157∶H7 单克隆抗体(mAb) 生物制剂 人兽共患病

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几种佐剂对肌肉注射猪支原体肺炎活疫苗免疫刺激能力的增强作用研究 被引量：12

2

作者 熊祺琰 范志鹏 +4 位作者 甘源 孔猛 冯志新 刘茂军 邵国青 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第10期163-168,共6页

为增强现有猪支原体肺炎活疫苗的免疫刺激能力以实现肌肉注射免疫,向现有活疫苗中添加几种不同佐剂,考察其经肌肉免疫后机体的免疫应答情况。结果表明,免疫刺激复合物基质佐剂和左旋咪唑+壳聚糖混合佐剂能有效激发细胞免疫应答和体液免... 为增强现有猪支原体肺炎活疫苗的免疫刺激能力以实现肌肉注射免疫,向现有活疫苗中添加几种不同佐剂,考察其经肌肉免疫后机体的免疫应答情况。结果表明,免疫刺激复合物基质佐剂和左旋咪唑+壳聚糖混合佐剂能有效激发细胞免疫应答和体液免疫应答;左旋咪唑+黄芪多糖混合佐剂能增强疫苗的细胞免疫刺激能力,而对体液免疫无作用;皂角素佐剂未显示明显的免疫增强效果。本试验结果为肌肉注射猪支原体肺炎活疫苗的开发奠定了数据基础。 展开更多

关键词 佐剂 活疫苗 猪支原体肺炎

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鸡毒支原体和大肠杆菌混合感染病例的实验室诊断 被引量：3

3

作者 赵冬敏 李银 +2 位作者 刘宇卓 张敬峰 黄欣梅 《江西农业学报》 CAS 2011年第10期17-19,共3页

报道了一例鸡毒支原体和大肠杆菌混合感染病例的实验室诊断。应用细菌学方法无菌取肝脏和关节肿疱液接种鲜血琼脂培养基进行细菌分离,挑取鲜血琼脂培养基上均一生长的菌落划线接种于麦康凯斜面用于细菌鉴定,将分离的大肠杆菌涂布鲜血琼... 报道了一例鸡毒支原体和大肠杆菌混合感染病例的实验室诊断。应用细菌学方法无菌取肝脏和关节肿疱液接种鲜血琼脂培养基进行细菌分离,挑取鲜血琼脂培养基上均一生长的菌落划线接种于麦康凯斜面用于细菌鉴定,将分离的大肠杆菌涂布鲜血琼脂培养基进行药敏试验。取关节肿疱液接种KM2液体培养基,取关节肿疱液及其不同代次的KM2培养物进行支原体PCR检测。结果从发病鸡肝脏中分离到大肠杆菌,该菌株对丙氟哌酸、氟苯尼考等药物敏感;从关节肿疱液及其1～3代KM2培养物中均扩增出鸡毒支原体的基因片段;说明该群病鸡发生了鸡毒支原体和大肠杆菌的混合感染。 展开更多

关键词 鸡毒支原体 大肠杆菌 混合感染 药敏试验 PCR检测

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嵌合双串联OVA T细胞表位的RHDV VP60蛋白免疫特性研究

4

作者 宋艳华 张燕 +7 位作者 胡波 范志宇 魏后军 刘星 黄兵 薛家宾 徐为中 王芳 《安徽农业科学》 CAS 2015年第32期89-92,共4页

为研究RHDV VP60作为载体容纳外源片段以及递呈外源T细胞表位的能力,将双串联卵清蛋白T细胞表位插入N端、C端以及替代N端氨基酸的方式获得3种嵌合蛋白,进行免疫试验。3种嵌合蛋白分别命名为DN1、DN2和DC,将蛋白进行浓缩、纯化及定量,利... 为研究RHDV VP60作为载体容纳外源片段以及递呈外源T细胞表位的能力,将双串联卵清蛋白T细胞表位插入N端、C端以及替代N端氨基酸的方式获得3种嵌合蛋白,进行免疫试验。3种嵌合蛋白分别命名为DN1、DN2和DC,将蛋白进行浓缩、纯化及定量,利用透射电镜观察VLPs的形成,发现均可形成形态大小与VP60相似的VLPs。将3种嵌合蛋白分别腹腔注射C57BL/6雌性小鼠,利用间接ELISA检测首免后0、4和6周小鼠血清样品中VP60特异性抗体,结果表明嵌合蛋白组与VP60组均能够诱导产生较高水平的抗VP60特异性抗体,2组间无显著差异。首免后6周,利用合成的OVA多肽刺激脾淋巴细胞,ELISPOT检测特异性IFN-γ的分泌水平,结果表明3种嵌合蛋白均能诱导特异性IFN-γ的分泌。该研究扩展了VP60作为载体可携带的外源片段的耐受性及有效递呈T细胞表位的能力,为VP60-VLPs展示系统的研究提供了理论依据。 展开更多

关键词 RHDV 衣壳蛋白 OVA T细胞表位 嵌合蛋白 免疫原性研究

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PCR-SSCP技术在微生物检测中的应用 被引量：7

5

作者 顾真庆 冯志新 +4 位作者 王占伟 刘茂军 王海燕 白昀 邵国青 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期70-74,共5页

聚合酶链式反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)是一种能够检测DNA突变的分子生物学分析技术,具有快速、简便、灵敏与适于大样本筛选的特点,近年来被广泛应用于生命科学领域的研究。对PCR-SSCP技术在微生物检测研究领域的应用和发展作简要的... 聚合酶链式反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)是一种能够检测DNA突变的分子生物学分析技术,具有快速、简便、灵敏与适于大样本筛选的特点,近年来被广泛应用于生命科学领域的研究。对PCR-SSCP技术在微生物检测研究领域的应用和发展作简要的介绍。 展开更多

关键词 PCR-SSCP 微生物 检测

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猪肺炎支原体基因组学研究进展 被引量：6

6

作者 祝永琴 刘茂军 邵国青 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2010年第4期63-65,共3页

关键词 基因组学 猪肺炎支原体 DNA序列 基因组结构 基因组比较 遗传信息 基因功能 蛋白质

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动物抗血清及其制备技术要点与应用进展 被引量：9

7

作者 王占伟 邵国青 陈笑娟 《江西农业学报》 CAS 2009年第7期149-152,共4页

抗血清对于控制动物疫病具有很重要的作用。综述了动物抗血清的发展历程、产品技术现状、制备技术要点与最新研究应用进展以及面临的问题和解决方案等。

关键词 抗血清 产品 制备 制备技术

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6日龄雏鸡混合感染坦布苏病毒和多杀性巴氏杆菌的病原学研究 被引量：2

8

作者 刘宇卓 宋子梁 +4 位作者 李银 黄欣梅 赵冬敏 韩凯凯 杨婧 《江西农业学报》 CAS 2015年第4期81-84,共4页

对一例疑似坦布苏病毒和多杀性巴氏杆菌混合感染的6日龄鸡进行病原的分离鉴定。用套氏RT-PCR方法和常规细菌分离鉴定方法进行病毒、细菌的分离、鉴定,并对其病原的主要生物学特性进行了研究。结果表明:病毒经鉴定为坦布苏病毒,与鹅源坦... 对一例疑似坦布苏病毒和多杀性巴氏杆菌混合感染的6日龄鸡进行病原的分离鉴定。用套氏RT-PCR方法和常规细菌分离鉴定方法进行病毒、细菌的分离、鉴定,并对其病原的主要生物学特性进行了研究。结果表明:病毒经鉴定为坦布苏病毒,与鹅源坦布苏病毒JS804株核苷酸同源性达99%;分离到的细菌为多杀性巴氏杆菌。细菌对鸡的回归试验显示,0.1mL的菌液可致20周龄SPF鸡死亡;对6周龄Balb/c小鼠的致病性试验结果表明,含约10 CFU的毒液即可在24h内致其4/4死亡。 展开更多

关键词 雏鸡 坦布苏病毒 多杀性巴氏杆菌

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家禽支原体的防控现状及研究新进展 被引量：11

9

作者 邵国青 《中国家禽》 北大核心 2009年第11期5-10,共6页

支原体在我国被列为二类传染病,是进出口畜产品中必检的疫病之一。禽支原体在世界范围内流行,给我国的家禽养殖业造成了极大的危害。本文就我国家禽支原体感染的现状和防控中存在的问题、研究现状以及防控措施等方面进行概述。

关键词 家禽支原体 流行现状 防控措施

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重大动物疫病防治数字化监控与风险评估及预警的构建 被引量：10

10

作者 陆昌华 《中国动物检疫》 CAS 2009年第10期24-26,共3页

本文在阐述国外重大动物疫病防治数字化监控与预警体系规划研究的概况,国内应用研究现状及对策的同时,指出动物疫病预警研究是公共卫生应急及城市预警应急系统的重要组成部分。风险预警是风险分析的重要内容,风险分析是WTO等协定的构成... 本文在阐述国外重大动物疫病防治数字化监控与预警体系规划研究的概况,国内应用研究现状及对策的同时,指出动物疫病预警研究是公共卫生应急及城市预警应急系统的重要组成部分。风险预警是风险分析的重要内容,风险分析是WTO等协定的构成部分,是技术性贸易措施的重要内容之一,是WTO各成员方检验检疫决策的主要技术支持。风险分析可保持检验检疫的正当技术壁垒作用,充分发挥检验检疫的保护功能,能强化检验检疫贸易的促进作用。针对重大动物疫病严重影响中国畜禽生产产业发展,由于疫病控制不及时,造成重大经济损失。同时,也影响中国畜禽(生猪、牛、禽)活体和胴体出口。为此,研究重大动物疫病风险评估及预警体系的框架构建,形成风险评估及预警决策模型;以及采用基于GIS的数字化监控系统,将流行病学数据库、地理图形、非空间应用模型和空间应用模型有机地结合,实现图形和数据资源共享。系统可及时跟踪疾病的蔓延,通过动物疫病流行病学图分析,可提出适宜的防治措施,达到重大动物疫病的预警预报目的。借鉴国外成功经验,提出适合国情的风险预警的研究内容,指出GIS系统与风险分析在预警体系中应用的注意点,为开展风险评估工作提供更多的素材,奠定风险管理基础。 展开更多

关键词 动物 疫病 监控 风险评估 预警

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大肠杆菌O157:H7抗体胶体金免疫层析检测试纸条的研制 被引量：9

11

作者 刘洁 夏兴霞 +3 位作者 王永山 张雪寒 费荣梅 何孔旺 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期375-378,共4页

为建立快速检测鼠感染大肠杆菌O157∶H7后的抗体,本研究采用颗粒为20nm的胶体金溶液标记纯化的羊抗鼠IgG,制备金标探针,喷涂于玻璃纤维膜上;将大肠杆菌O157∶H7抗原和抗大肠杆菌O157∶H7单克隆抗体F1分别包被于硝酸纤维素膜上作为检测... 为建立快速检测鼠感染大肠杆菌O157∶H7后的抗体,本研究采用颗粒为20nm的胶体金溶液标记纯化的羊抗鼠IgG,制备金标探针,喷涂于玻璃纤维膜上;将大肠杆菌O157∶H7抗原和抗大肠杆菌O157∶H7单克隆抗体F1分别包被于硝酸纤维素膜上作为检测线和质控线,组装成鼠血清O157∶H7抗体胶体金免疫层析检测试纸条。实验结果表明,该试纸条仅与O157∶H7阳性鼠血清发生特异性反应,用该试纸条与常规间接ELISA平行比较检测O157∶H7免疫鼠血清,抗体效价分别为1×106和1×105,两者的敏感度相当。该试纸条操作简便,10min可出结果,适用于调查与追溯鼠O157∶H7感染状况时的现场检测。 展开更多

关键词 肠出血性大肠杆菌O157∶H7 胶体金 免疫层析试纸条 鼠

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重组表达口蹄疫病毒T细胞表位猪细小病毒病毒样颗粒的制备 被引量：6

12

作者 潘群兴 王永山 +4 位作者 何孔旺 欧阳伟 王晓丽 诸玉梅 夏兴霞 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期844-848,共5页

为增强表位疫苗的免疫原性,本研究将O型口蹄疫病毒(FMDV)VP1中编码T细胞表位肽(aa 21～aa 40)序列连接于猪细小病毒(PPV)VP2的5'端,并插入到杆状病毒供体质粒pFastBac HTA中,构建成重组转座载体pFastBac-FMDV-VP1-PPV-VP2,转化含有... 为增强表位疫苗的免疫原性,本研究将O型口蹄疫病毒(FMDV)VP1中编码T细胞表位肽(aa 21～aa 40)序列连接于猪细小病毒(PPV)VP2的5'端,并插入到杆状病毒供体质粒pFastBac HTA中,构建成重组转座载体pFastBac-FMDV-VP1-PPV-VP2,转化含有穿梭载体Bacmid的E.coli DH10Bac中,经蓝白菌落筛选获得重组杆状病毒表达质粒rBac-FMDV-VP1-PPV-VP2,转染昆虫草地夜蛾(Sf9)细胞,并在Sf9中进行了表达。电镜观察显示,表达的重组蛋白能够自我组装成病毒样颗粒rPPV∶VLP(FMDV)。用间接免疫荧光试验(IFA)、western blot分析表明,表达产物具有与PPV VP2天然蛋白相似的免疫原性。小鼠免疫实验证实,在低浓度FMDV抗原下能够产生特异性T淋巴细胞增殖反应;而且该病毒样颗粒能诱导机体产生抗FMDV特异性细胞免疫反应。 展开更多

关键词 猪细小病毒 病毒样颗粒 O型口蹄疫病毒 T细胞表位

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大肠杆菌O157∶H7单克隆抗体胶体金免疫层析检测试纸条的研制 被引量：9

13

作者 夏兴霞 王永山 +3 位作者 孟祥升 朱国强 张雪寒 何孔旺 《中国动物传染病学报》 CAS 2010年第4期47-53,共7页

用E.coliO157∶H7菌体免疫BALB/c鼠,制备免疫脾细胞,与SP2/0骨髓瘤细胞融合,获得了16株分泌单克隆抗体（mAb）的杂交瘤细胞株。其中,1D3、2E7和2H7三株为O157∶H7特异单克隆抗体,Ig亚类分别为IgMκ、IgG2bκ和IgG2bκ,腹水抗体ELISA效... 用E.coliO157∶H7菌体免疫BALB/c鼠,制备免疫脾细胞,与SP2/0骨髓瘤细胞融合,获得了16株分泌单克隆抗体（mAb）的杂交瘤细胞株。其中,1D3、2E7和2H7三株为O157∶H7特异单克隆抗体,Ig亚类分别为IgMκ、IgG2bκ和IgG2bκ,腹水抗体ELISA效价分别为103、105和106。用纯化的单克隆抗体2E7标记胶体金,制备金标抗体玻璃纤维素膜;将纯化的2H7和羊抗鼠IgG分别作为检测和对照捕捉抗体包被于硝酸纤维素膜（NC）上;组装成双抗夹心法O157∶H7胶体金免疫层析检测试纸条。用该试纸条可特异检测O157∶H7,敏感度为106CFU/mL,与相同单克隆抗体2H7和2E7建立的O157∶H7夹心ELISA检测方法的敏感度相当,试纸条简便快速,在1~5 min内可得出检测结果,便于O157∶H7的临床快速诊断与现场检测样品的快速筛查。 展开更多

关键词 大肠杆菌O157∶H7 单克隆抗体 胶体金 免疫层析试纸条 人兽共患病

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规模化猪场疫病传入的外部风险因素指标体系的初探 被引量：10

14

作者 臧一天 谭业平 +1 位作者 胡肄农 陆昌华 《中国动物检疫》 CAS 2012年第3期49-52,共4页

据实际调查,运用层次分析法,将疫病传入的各外界风险因素指标划分为目标层、准则层和分准则层三个层次。采用EXCEL软件进行数据统计,依次编辑各层次结构模型,构建各层次的判断矩阵和一致性检验。结果表明:猪场的管理措施、生物安全、场... 据实际调查,运用层次分析法,将疫病传入的各外界风险因素指标划分为目标层、准则层和分准则层三个层次。采用EXCEL软件进行数据统计,依次编辑各层次结构模型,构建各层次的判断矩阵和一致性检验。结果表明:猪场的管理措施、生物安全、场址是疫病传入的主要风险因素。据此确立了Ⅰ级指标和Ⅱ级指标,从而构建疫病传入的风险因素指标体系。 展开更多

关键词 猪场 疫病 风险因素 指标体系

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鸭疫里氏杆菌RA JS01菌株的PCR鉴定及生物学特性 被引量：1

15

作者 张敬峰 李银 +2 位作者 刘宇卓 黄欣梅 赵冬敏 《江西农业学报》 CAS 2011年第6期111-112,115,共3页

在临床疑似鸭传染性浆膜炎的病鸭组织中分离了1株RA JS01菌株,通过形态观察、生化试验和PCR鉴定,确定该菌株为鸭疫里氏杆菌,结果表明:该菌株对多数抗生素都具有耐药性和较强的致病性;经静脉和足底接种的鸭在接种后24 h时开始死亡,接种9... 在临床疑似鸭传染性浆膜炎的病鸭组织中分离了1株RA JS01菌株,通过形态观察、生化试验和PCR鉴定,确定该菌株为鸭疫里氏杆菌,结果表明:该菌株对多数抗生素都具有耐药性和较强的致病性;经静脉和足底接种的鸭在接种后24 h时开始死亡,接种96 h时全部死亡;连续传至22代时菌株的生物学特性均未发生变化。 展开更多

关键词 鸭疫里氏杆菌 PCR鉴定 生物学特性

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鹅细小病毒PCR诊断方法的初步建立 被引量：1

16

作者 刘宇卓 李银 +1 位作者 魏雪涛 张敬峰 《江西农业学报》 CAS 2011年第3期156-158,164,共4页

根据GeneBank上已发表的鹅细小病毒(GPV)基因序列,设计合成1对引物,以GPV阳性毒株鹅胚尿囊液及攻毒后死亡的雏鹅组织,提取DNA并进行PCR,结果产物扩增出的片段与预期片段440 bp大小相符,测定序列与GeneBank上GPV B株同源性达99%。试验结... 根据GeneBank上已发表的鹅细小病毒(GPV)基因序列,设计合成1对引物,以GPV阳性毒株鹅胚尿囊液及攻毒后死亡的雏鹅组织,提取DNA并进行PCR,结果产物扩增出的片段与预期片段440 bp大小相符,测定序列与GeneBank上GPV B株同源性达99%。试验结果显示用该方法可以特异性地诊断出GPV,比琼脂扩散试验(AGP)敏感性高,可检测最低浓度为102.5GELD50/0.2mL;检测攻毒后死亡的雏鹅组织,在脑、肝、肺、肾、肠等组织中均有GPV的存在,可以用于临床可疑病毒的分离鉴定。所建立的PCR方法具有高度的特异性、敏感性和可重复性。 展开更多

关键词 鹅 鹅细小病毒 PCR 琼脂扩散试验

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兔出血症病毒杆状病毒载体灭活疫苗临床免疫效力试验 被引量：1

17

作者 范志宇 王芳 +3 位作者 胡波 魏后军 薛家宾 姜平 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2019年第7期30-33,I0003,I0004,共6页

为了评估兔出血症病毒杆状病毒载体灭活疫苗在临床使用中的保护效力,试验选择3批次中试产品,分别在6家临床试验兔场对不同品种、不同日龄家兔进行免疫效力评价。结果显示,6家临床试验兔场试验期间均没有发生兔出血症;免疫持续期攻毒试... 为了评估兔出血症病毒杆状病毒载体灭活疫苗在临床使用中的保护效力,试验选择3批次中试产品,分别在6家临床试验兔场对不同品种、不同日龄家兔进行免疫效力评价。结果显示,6家临床试验兔场试验期间均没有发生兔出血症;免疫持续期攻毒试验结果显示,疫苗对肉兔、獭兔、毛兔免疫期均可以达到7个月。结果表明,兔出血症病毒杆状病毒载体灭活疫苗(BAC-VP60株)临床效力检验合格,免疫期为7个月。 展开更多

关键词 兔出血症病毒杆状病毒载体灭活疫苗 效力检验 免疫期

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兔源多杀性巴氏杆菌C_(51-17)株ompA基因表达与免疫原性鉴定

18

作者 徐为中 王芳 +6 位作者 胡波 范志宇 魏后军 宋艳华 薛家宾 仇汝龙 刘星 《安徽农业科学》 CAS 2015年第35期227-228,237,共3页

[目的]研究兔源多杀性巴氏杆菌C_(51-17)株omp A基因表达与蛋白免疫原性鉴定。[方法]根据Gen Bank公布的多杀性巴氏杆菌序列AE004439设计引物,经PCR扩增出兔源多杀性巴氏杆菌外膜蛋白omp A基因,开放阅读框包含1 062 bp碱基,插入到p GEX-... [目的]研究兔源多杀性巴氏杆菌C_(51-17)株omp A基因表达与蛋白免疫原性鉴定。[方法]根据Gen Bank公布的多杀性巴氏杆菌序列AE004439设计引物,经PCR扩增出兔源多杀性巴氏杆菌外膜蛋白omp A基因,开放阅读框包含1 062 bp碱基,插入到p GEX-6p-1质粒,构建成功重组表达载体p GEX-domp A,转入大肠杆菌BL21,经IPTG诱导高效表达出多杀性巴氏杆菌成熟重组外膜蛋白omp A。[结果]表达产物经SDS-PAGE分析,重组多杀性巴氏杆菌外膜蛋白omp A分子量在63 ku,Western blot分析显示,重组蛋白能与兔抗多杀性巴氏杆菌高免血清呈现免疫反应,表明表达的重组蛋白具有较好的免疫活性。[结论]获得的重组蛋白为家兔多杀性巴氏杆菌病诊断试剂盒和疫苗的进一步研究奠定基础。 展开更多

关键词 兔多杀性巴氏杆菌 OMPA 原核表达

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鹅副粘病毒HN蛋白的原核表达与免疫学鉴定 被引量：2

19

作者 李彤彤 李银 +5 位作者 黄欣梅 赵冬敏 刘宇卓 张敬峰 刘飞 李祥瑞 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2012年第2期217-220,共4页

以GenBank登录的鹅源副粘病毒GPMV ZJI株基因组全序列为模板,在HN基因开放阅读框上下游设计一对特异性引物,利用RT-PCR方法扩增得到HN基因,将目的基因克隆至pET32a表达载体上,转化至BL21中,通过SDS-PAGE和Western-blot鉴定目的蛋白的表... 以GenBank登录的鹅源副粘病毒GPMV ZJI株基因组全序列为模板,在HN基因开放阅读框上下游设计一对特异性引物,利用RT-PCR方法扩增得到HN基因,将目的基因克隆至pET32a表达载体上,转化至BL21中,通过SDS-PAGE和Western-blot鉴定目的蛋白的表达。由结果可知,通过RT-PCR法扩增出HN基因,大小与预期一致。SDS-PAGE和Western-blot均得到预期条带,说明pET32a表达载体在BL21中成功表达了HN蛋白,为后续相关免疫学研究奠定基础。 展开更多

关键词 鹅副粘病毒 HN基因 原核表达

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中草药饲料添加剂对三黄肉鸡生产性能和肉品质的影响 被引量：26

20

作者 杜改梅 刘茂军 +3 位作者 蒋加进 陈钟鸣 戴鼎震 方光远 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2010年第1期126-129,共4页

为探明不同组方中草药对鸡生长性能、脂肪代谢和胴体品质的影响。选用90羽14日龄的健康三黄鸡,随机分为3组,分别为对照组、试验组A和试验组B。每组30羽(15羽公鸡和15羽母鸡)。设计中草药配方Ⅰ和Ⅱ,分别以1%剂量在试验组A和试验组B的基... 为探明不同组方中草药对鸡生长性能、脂肪代谢和胴体品质的影响。选用90羽14日龄的健康三黄鸡,随机分为3组,分别为对照组、试验组A和试验组B。每组30羽(15羽公鸡和15羽母鸡)。设计中草药配方Ⅰ和Ⅱ,分别以1%剂量在试验组A和试验组B的基础日粮中添加中草药配方Ⅰ和Ⅱ。试验期间,自由采食和饮水,按常规程序进行免疫。试验期21 d。结果表明:①与对照组相比,试验组A和B的饲料转化率分别提高1.98%和0.92%;日采食量分别降低6.73%(P<0.05)和4.87%(P<0.05);②试验组A和试验组B中鸡的屠宰率分别比对照组提高5.01%和7.78%(P<0.05);半净膛率分别提高1.07%和8.22%(P<0.05);全净膛率分别提高3.92%和9.64%(P<0.05);试验组B中鸡的胸肌率比对照组提高10.09%;与对照组相比,试验组A和试验组B中鸡的腿肌率分别提高11.31%(P<0.05)和8.92%;试验组A中鸡的腹脂率比对照组下降30.91%(P<0.05),而试验组B鸡的腹脂率没有发生显著变化;添加中草药配方Ⅰ和Ⅱ对肌肉pH值没有显著影响。 展开更多

关键词 中草药 饲料添加剂 三黄鸡 生产性能 鸡肉品质

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