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家兔β干扰素启动子质粒的构建及其启动子活性鉴定
被引量：
2
1
作者
陈萌萌
范志宇
+6 位作者
胡波
宋艳华
魏后军
仇汝龙
朱伟峰
徐为中
王芳
《江苏农业科学》
2019年第23期78-81,共4页
通过家兔体内感染兔出血症病毒(RHDV)后发现体内干扰素-β(Interferon-β,IFN-β)基因表达水平明显降低。为体外研究RHDV感染宿主后IFN-β启动子的调控机制,首先以家兔肝细胞总cDNA为模板,利用PCR扩增IFN-β基因启动子区的序列,经测序...
通过家兔体内感染兔出血症病毒(RHDV)后发现体内干扰素-β(Interferon-β,IFN-β)基因表达水平明显降低。为体外研究RHDV感染宿主后IFN-β启动子的调控机制,首先以家兔肝细胞总cDNA为模板,利用PCR扩增IFN-β基因启动子区的序列,经测序确定全长为550bp;预测软件分析,与人源IFN-β基因启动子的转录上调区域(positive regulation domain,PRD)高度同源;随后将启动子全长和一系列转录元件克隆至pGL6-Basic荧光素酶表达载体中,成功构建重组体报告基因质粒后,瞬转RK-13细胞,利用试剂盒检测荧光素酶的相对活性。结果显示,克隆的IFN-β基因启动子区和AP-1、IRF3、NF-κB和IRF7等转录元件具有显著的活性,为研究兔出血症病毒对宿主IFN-β基因的转录调控机制提供了有效的工具。
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关键词
家兔
兔出血症病毒
IFN-β基因
启动子
荧光素酶
转录调控
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职称材料
题名
家兔β干扰素启动子质粒的构建及其启动子活性鉴定
被引量：
2
1
作者
陈萌萌
范志宇
胡波
宋艳华
魏后军
仇汝龙
朱伟峰
徐为中
王芳
机构
江苏省农业科学院兽医研究所/农业农村部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心
出处
《江苏农业科学》
2019年第23期78-81,共4页
基金
国家自然科学基金(编号:31702274)
现代农业产业技术体系建设专项资金(编号:CARS-43-C-1)
文摘
通过家兔体内感染兔出血症病毒(RHDV)后发现体内干扰素-β(Interferon-β,IFN-β)基因表达水平明显降低。为体外研究RHDV感染宿主后IFN-β启动子的调控机制,首先以家兔肝细胞总cDNA为模板,利用PCR扩增IFN-β基因启动子区的序列,经测序确定全长为550bp;预测软件分析,与人源IFN-β基因启动子的转录上调区域(positive regulation domain,PRD)高度同源;随后将启动子全长和一系列转录元件克隆至pGL6-Basic荧光素酶表达载体中,成功构建重组体报告基因质粒后,瞬转RK-13细胞,利用试剂盒检测荧光素酶的相对活性。结果显示,克隆的IFN-β基因启动子区和AP-1、IRF3、NF-κB和IRF7等转录元件具有显著的活性,为研究兔出血症病毒对宿主IFN-β基因的转录调控机制提供了有效的工具。
关键词
家兔
兔出血症病毒
IFN-β基因
启动子
荧光素酶
转录调控
分类号
S858.291 [农业科学—临床兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
家兔β干扰素启动子质粒的构建及其启动子活性鉴定
陈萌萌
范志宇
胡波
宋艳华
魏后军
仇汝龙
朱伟峰
徐为中
王芳
《江苏农业科学》
2019
2
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