猪支原体肺炎活疫苗(168株)生产工艺关键技术研究 被引量：1

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作者 丁美娟 苏国东 +4 位作者 周勇岐 刘茂军 尹秀凤 邵国青 张小飞 《中国兽药杂志》 2012年第7期38-40,共3页

肺炎支原体的培养和保存条件非常苛刻,是疫苗规模化生产的工艺难题。本文针对猪支原体肺炎活疫苗(168株)生产工艺关键技术进行研究。通过培养试验筛选四种培养基配方表明该疫苗株在低血清改良培养基中生长良好;优化发酵培养工艺,使其在... 肺炎支原体的培养和保存条件非常苛刻,是疫苗规模化生产的工艺难题。本文针对猪支原体肺炎活疫苗(168株)生产工艺关键技术进行研究。通过培养试验筛选四种培养基配方表明该疫苗株在低血清改良培养基中生长良好;优化发酵培养工艺,使其在发酵罐培养60～70 h的峰值可达到1010CCU/mL;设计筛选该疫苗耐热保护剂和冻干工艺,37℃下保存10 d的耐老化试验结果显示,下降滴度小于100.5CCU/mL。本研究为提供高效、安全和稳定的猪肺炎支原体疫苗产品奠定基础。 展开更多

关键词 猪肺炎支原体 活疫苗 改良培养基 发酵工艺 耐热保护剂

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支原体对细胞培养污染的研究概况 被引量：19

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作者 武昱孜 张旭 +2 位作者 华利忠 刘茂军 邵国青 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2013年第9期112-117,共6页

支原体是自然界中存在的最小、最简单的原核生物,大小介于细菌和病毒之间,可通过滤菌器,对许多抗生素有抗性,是细胞培养污染中一种常见的微生物。被支原体污染后的细胞培养物,引起细胞形态学和功能的改变,导致用细胞基质制备的生物制品... 支原体是自然界中存在的最小、最简单的原核生物,大小介于细菌和病毒之间,可通过滤菌器,对许多抗生素有抗性,是细胞培养污染中一种常见的微生物。被支原体污染后的细胞培养物,引起细胞形态学和功能的改变,导致用细胞基质制备的生物制品报废,且很难清除。一旦发生污染,就意味着试验的失败,造成巨大的人力、物力、财力的浪费。从支原体对细胞培养物污染后造成的危害及对支原体污染的预防、检测、清除等的研究进展进行论述,为细胞支原体污染的防控提供依据和手段。 展开更多

关键词 细胞培养 支原体污染 检测技术 清除

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猪肺炎支原体不同蛋白抗原检测疫苗诱导IgG产生规律的研究 被引量：5

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作者 杜改梅 刘茂军 +3 位作者 韦艳娜 甘源 马庆红 邵国青 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期925-930,共6页

为了筛选出特异性好和敏感性高的ELISA用猪肺炎支原体抗原蛋白,作者分别将猪肺炎支原体灭活疫苗和168株菌活疫苗分别经肌肉和肺内注射途径免疫猪,免疫后7、15、30和56d采集分离血清。以P97R1、P36、P46、DnaK单个蛋白和混合蛋白为猪支... 为了筛选出特异性好和敏感性高的ELISA用猪肺炎支原体抗原蛋白,作者分别将猪肺炎支原体灭活疫苗和168株菌活疫苗分别经肌肉和肺内注射途径免疫猪,免疫后7、15、30和56d采集分离血清。以P97R1、P36、P46、DnaK单个蛋白和混合蛋白为猪支原体肺炎血清抗体ELISA用特异性蛋白抗原,与猪肺炎支原体IDEXX抗体检测试剂盒比较检测免疫后抗体的发生规律,并对检测结果进行对比。结果表明,P36和P97R1能够检测出比较高的母源抗体水平;DnaK和P46检测的抗体滴度变化趋势相一致,且检测的抗体高滴度维持时间较长;与其它抗原相比,混和蛋白在56d时检测到较高的抗体水平。混合抗原的检测结果与IDEXX具有较高的符合率,但检测敏感性比IDEXX高,且较IDEXX符合抗体变化规律。结果表明混合蛋白具有较高的检测敏感性,可以更加准确地监测该病的感染或免疫状态。 展开更多

关键词 猪肺炎支原体 IGG 疫苗 P97R1 P36 P46 DNAK

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猪肺炎支原体P216基因片段的表达及黏附活性研究 被引量：4

4

作者 杜海霞 刘茂军 +4 位作者 冯志新 熊祺琰 白方方 王海燕 邵国青 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期1324-1329,共6页

本研究旨在研究猪肺炎支原体P216蛋白的黏附活性并初步建立猪肺炎支原体蛋白黏附模型。根据软件分析和文献报道从P216全基因中选取亲水性、抗原性、黏附性较好的目的片段,利用PCR从Mhp NJ株扩增P216基因片段,克隆到表达载体pET-32a(+)中... 本研究旨在研究猪肺炎支原体P216蛋白的黏附活性并初步建立猪肺炎支原体蛋白黏附模型。根据软件分析和文献报道从P216全基因中选取亲水性、抗原性、黏附性较好的目的片段,利用PCR从Mhp NJ株扩增P216基因片段,克隆到表达载体pET-32a(+)中,获得重组质粒pET-32a(+)/P216,经IPTG诱导获得重组蛋白,通过Western blot和间接免疫荧光试验检测重组蛋白的免疫原性及黏附活性。结果表明,PCR扩增的目的基因大小为l 636bp;SDS-PAGE检测重组蛋白相对分子质量为80.1ku;Western blot检测表明重组蛋白能与Mhp阳性血清发生特异性反应;间接免疫荧光试验表明该蛋白对猪肺炎支原体黏附SJPL细胞产生占位抑制作用。结果提示,P216蛋白具有良好的黏附活性,能黏附SJPL细胞,从而为猪肺炎支原体其他黏附因子的研究奠定基础。 展开更多

关键词 猪肺炎支原体 P216基因片段 黏附活性

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猪肺炎支原体感染早期诱导猪呼吸道产生多种特异性IgA抗体分泌规律研究 被引量：3

5

作者 姚景霆 冯志新 +7 位作者 刘茂军 熊祺琰 白方方 华利忠 王海燕 甘源 韦艳娜 邵国青 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期767-771,共5页

为了研究猪感染猪肺炎支原体早期,呼吸道针对病原不同功能蛋白分泌特异性IgA抗体的差异与规律,本研究通过已建立的猪肺炎支原体各蛋白的特异性IgA间接ELISA方法,分别检测7头试验猪在感染后第1、2、4、6、8、12、16和21天鼻拭子中抗P36、... 为了研究猪感染猪肺炎支原体早期,呼吸道针对病原不同功能蛋白分泌特异性IgA抗体的差异与规律,本研究通过已建立的猪肺炎支原体各蛋白的特异性IgA间接ELISA方法,分别检测7头试验猪在感染后第1、2、4、6、8、12、16和21天鼻拭子中抗P36、P46、P97R1的特异性IgA抗体滴度,并经过样品总蛋白浓度校准后,比较3种特异性IgA抗体在感染后21d内的分泌规律。结果显示,在感染后第6天,呼吸道中抗猪肺炎支原体P36、P46、P97R1的3种特异性IgA抗体分泌量均开始上升,于感染后第12天达到高峰,并可持续到第21天,且同1d内3种特异性IgA抗体之间的分泌量差异不显著(P>0.05)。本研究说明在猪肺炎支原体感染的早期阶段,P36、P46、P97R1蛋白均可诱发猪呼吸道产生特异性IgA抗体,且分泌量与分泌规律较为相似,差异不显著。 展开更多

关键词 猪肺炎支原体 呼吸道 IGA 分泌规律

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猪肺炎支原体黏附猪肾细胞模型建立及体外黏附特性研究 被引量：3

6

作者 张旭 冯志新 +6 位作者 武昱孜 车巧林 刘茂军 熊祺琰 华利忠 李彬 邵国青 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期772-777,共6页

为了建立猪肺炎支原体全菌体外黏附细胞模型及初步探讨其对不同细胞系的黏附特性,选取实验室保存的Mhp野毒分离株(XLW-1、XLW-2、XLW-3、WX株)、国际标准株232、弱毒疫苗168株感染猪肾传代细胞系(PK15),同时利用本实验室已建立的Mhp间... 为了建立猪肺炎支原体全菌体外黏附细胞模型及初步探讨其对不同细胞系的黏附特性,选取实验室保存的Mhp野毒分离株(XLW-1、XLW-2、XLW-3、WX株)、国际标准株232、弱毒疫苗168株感染猪肾传代细胞系(PK15),同时利用本实验室已建立的Mhp间接免疫荧光检测方法检测各菌株对PK15的黏附特性。结果发现,不同Mhp株全菌均可黏附PK15细胞,但不同菌株黏附能力存在差异。其黏附能力强弱依次为野毒株XLW-1株、WX株、疫苗168株、国际标准株232、野毒株XLW-2、XLW-3株。选取黏附能力较强的XLW-1株,继续探讨其对猪原代气管上皮细胞、猪肺泡上皮细胞(SJPL)、猪肺泡巨噬细胞(3D4/31)、恒河猴肾细胞(Marc145)的黏附性。XLW-1株能在体外黏附不同的细胞系,但对不同细胞的黏附能力存在差异,其中对猪源的原代分离的猪气管上皮细胞、SJPL细胞系、3D4/31细胞系黏附性均较强,而对非猪源的Marc145细胞系的黏附性较弱。本研究结果表明,Mhp全菌体可在多种细胞系上建立黏附感染模型,不同Mhp菌株的黏附能力存在着差异,且同一菌株对不同细胞系的黏附特性也存在差异。 展开更多

关键词 猪肺炎支原体 体外感染模型 黏附特性

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猪支原体肺炎活疫苗(168株)的安全性研究 被引量：6

7

作者 刘茂军 苏国东 +4 位作者 周勇岐 冯志新 王海燕 朱晓玮 邵国青 《中国兽药杂志》 2012年第7期1-4,共4页

用健康易感仔猪进行同群感染试验和连续五代返强试验对猪肺炎支原体活疫苗(168株)进行安全性试验,同时也进行了该活疫苗单剂量、单剂量重复和大剂量试验及5批次疫苗免疫商品猪的临床试验。结果发现,猪支原体肺炎活疫苗(168株)免疫猪后,... 用健康易感仔猪进行同群感染试验和连续五代返强试验对猪肺炎支原体活疫苗(168株)进行安全性试验,同时也进行了该活疫苗单剂量、单剂量重复和大剂量试验及5批次疫苗免疫商品猪的临床试验。结果发现,猪支原体肺炎活疫苗(168株)免疫猪后,免疫猪和同群感染猪均未观察到典型的临床症状和病理变化;连续五代返强试验,试验猪均未观察到典型的临床症状和病理变化,说明该疫苗株未出现返强。单剂量、单剂量重复和大剂量试验及5批次疫苗的临床试验也未观察到不良反应。这说明受试批次猪支原体肺炎活疫苗(168株)具有良好的安全性。 展开更多

关键词 猪支原体肺炎活疫苗 安全性 毒力返强

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以疫苗免疫为核心的猪气喘病控制与净化技术 被引量：25

8

作者 华利忠 邵国青 周勇岐 《中国兽药杂志》 2012年第7期50-53,共4页

猪气喘病的控制和净化已成为养猪产业急需解决的难题,本文简述了国外的研究动态,提出控制和净化技术须从种猪、环境、疫苗和药物四个层次依次着手,介绍了常用的药物组合和用药策略,肯定了灭活疫苗的明显效果,报告了活疫苗(168株)在突破... 猪气喘病的控制和净化已成为养猪产业急需解决的难题,本文简述了国外的研究动态,提出控制和净化技术须从种猪、环境、疫苗和药物四个层次依次着手,介绍了常用的药物组合和用药策略,肯定了灭活疫苗的明显效果,报告了活疫苗(168株)在突破母源抗体,占位效应和刺激粘膜免疫和细胞免疫的显著作用,提出我国从龙头企业核心种猪场实施净化猪气喘病的可行思路,并提出具体的建议措施。 展开更多

关键词 猪气喘病 疫苗免疫 净化

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应用噬菌体展示技术筛选兔出血症病毒抗原模拟表位 被引量：9

9

作者 杨廷亚 王芳 +4 位作者 姜平 胡波 范志宇 魏后军 薛家宾 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期1281-1286,共6页

以抗兔出血症病毒(RHDV)的单克隆抗体A3c作为靶物质,应用噬菌体展示技术筛选RHDV抗原表位。将纯化的单抗A3c包被固相载体,经3轮亲和筛选后,挑取25株噬菌体单克隆并扩增,用ELISA测定后,提取阳性克隆单链DNA并测序,用阳性噬菌体克隆免疫... 以抗兔出血症病毒(RHDV)的单克隆抗体A3c作为靶物质,应用噬菌体展示技术筛选RHDV抗原表位。将纯化的单抗A3c包被固相载体,经3轮亲和筛选后,挑取25株噬菌体单克隆并扩增,用ELISA测定后,提取阳性克隆单链DNA并测序,用阳性噬菌体克隆免疫小鼠制备高免血清,检测筛选抗原表位的免疫原性。结果表明:3轮亲和筛选后,特异性噬菌体克隆得到了有效富集,25株噬菌体单克隆中有19株为阳性克隆;测序结果表明,获得了与抗原高度同源的序列GTDDMDPGTTAA,即抗原的模拟表位,其中,氨基酸基序DXXDP为表位中的核心氨基酸;制备的小鼠高免血清与抗原具有较好的反应性,阳性噬菌体克隆与兔RHDV高免血清也具有较好的反应性。因此,该表位具有良好的免疫原性和反应原性。该研究为RHDV抗原表位的研究和新型疫苗的探索积累了资料。 展开更多

关键词 兔出血症病毒 单克隆抗体 噬菌体展示技术 模拟表位

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山羊源副流感病毒3型的分离与分子鉴定 被引量：15

10

作者 李文良 毛立 +5 位作者 程素平 王秋生 黄加春 张纹纹 杨蕾蕾 江杰元 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期344-348,共5页

2013年下半年至2014年3月,江苏多地育肥羊出现呼吸道症状为主的疾病。采集不同发病场鼻拭子和血清样品,检测呼吸道相关病原,在大部分样品中检测到副流感病毒3型。将阳性病料接种于MDBK细胞,连续传代5代,经RT-PCR和血凝试验检测证实分离... 2013年下半年至2014年3月,江苏多地育肥羊出现呼吸道症状为主的疾病。采集不同发病场鼻拭子和血清样品,检测呼吸道相关病原,在大部分样品中检测到副流感病毒3型。将阳性病料接种于MDBK细胞,连续传代5代,经RT-PCR和血凝试验检测证实分离到病毒,命名为JS2013。扩增完整的M基因,进行进化分析表明该毒株不同于牛和人副流感病毒3型,具有独特的基因特征。这是国内外首次报道山羊源副流感病毒3型的分离鉴定。 展开更多

关键词 副流感病毒3型 山羊 呼吸道疾病 M基因 进化分析

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兔出血症病毒胶体金免疫层析试纸条诊断方法的建立及初步应用 被引量：18

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作者 蔡少平 王芳 +6 位作者 贾华敏 张海彬 李超美 范志宇 胡波 熊富强 魏后军 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1795-1801,共7页

为了建立一种快速、简便的兔出血症病毒(RHDV)的检测方法,用胶体金标记纯化的RHDV多克隆抗体,以杆状病毒表达系统表达的重组RHDV VP60蛋白为免疫原制备RHDV的单克隆抗体(McAb,简称单抗)A3C,将RHDV McAb和羊抗兔IgG抗体包被在硝酸纤维素... 为了建立一种快速、简便的兔出血症病毒(RHDV)的检测方法,用胶体金标记纯化的RHDV多克隆抗体,以杆状病毒表达系统表达的重组RHDV VP60蛋白为免疫原制备RHDV的单克隆抗体(McAb,简称单抗)A3C,将RHDV McAb和羊抗兔IgG抗体包被在硝酸纤维素膜上,分别作为检测线和质控线,经条件优化研制成RHDV免疫胶体金试纸条。该试纸条可以检出红细胞凝集试验(HA)效价为1∶10的RHDV悬液,即HA检测为阴性的样品,该试纸条检测为阳性,其敏感性高于HA;特异性试验结果显示,该试纸条不与家兔其他常见病菌发生交叉反应。应用该试纸条对127份疑似兔出血症家兔肝脏样品进行初步检测,同时用HA做平行试验,阳性符合率为100%。因此,该试纸条是一种快速、灵敏、特异的兔出血症病毒检测方法,为兔出血症的现场诊断提供了有效的方法,显示出很好的临床应用前景。 展开更多

关键词 兔出血症病毒 VP60蛋白 单克隆抗体 胶体金免疫层析试验 红细胞凝集试验

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不同水性及水包油型佐剂对猪支原体肺炎灭活疫苗的免疫增强作用 被引量：12

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作者 解海东 熊祺琰 +4 位作者 刘茂军 韦艳娜 王佳 宁官保 邵国青 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期2028-2033,共6页

旨在为猪支原体肺炎灭活疫苗研发水性的或水包油型佐剂,降低疫苗的副作用。利用小鼠为模型动物评价几种不同佐剂配合猪支原体肺炎灭活疫苗免疫动物时对细胞免疫和体液免疫应答的增强作用。将不同佐剂与灭活疫苗配合肌肉注射免疫小鼠,检... 旨在为猪支原体肺炎灭活疫苗研发水性的或水包油型佐剂,降低疫苗的副作用。利用小鼠为模型动物评价几种不同佐剂配合猪支原体肺炎灭活疫苗免疫动物时对细胞免疫和体液免疫应答的增强作用。将不同佐剂与灭活疫苗配合肌肉注射免疫小鼠,检测脾淋巴细胞对猪肺炎支原体抗原的增殖应答情况及特异性的血清IgG抗体水平。试验分两批次进行,共评价11种佐剂。结果表明,卡波姆974+免疫刺激复合物基质混合物佐剂和壳聚糖+左旋咪唑混合物佐剂强烈地诱导产生高水平细胞免疫和体液免疫应答(P<0.01);卡波姆974+左旋咪唑混合物佐剂、卡波姆974+左旋咪唑+黄芪多糖混合物佐剂和ISA 11R VG佐剂次之(P<0.05);β-葡聚糖+左旋咪唑混合物佐剂、DEAE-dextran+左旋咪唑+黄芪多糖混合物佐剂和β-葡聚糖+左旋咪唑+黄芪多糖混合物佐剂在细胞免疫应答方面作用显著(P<0.01),但体液免疫应答作用稍弱;而GEL 01ST佐剂在体液免疫应答方面作用显著(P<0.01),细胞免疫应答作用稍弱。通过分析认为卡波姆974+免疫刺激复合物基质混合物佐剂、壳聚糖+左旋咪唑混合物佐剂的效果最好,可同时显著增加细胞及体液免疫应答,本试验结果将为猪支原体肺炎灭活疫苗的佐剂研发提供数据基础。 展开更多

关键词 水性佐剂 水包油佐剂 猪支原体肺炎灭活疫苗 细胞免疫 体液免疫

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不同猪支原体肺炎活疫苗菌株P46和P97基因序列差异性分析 被引量：8

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作者 武昱孜 邢宪平 +3 位作者 韦艳娜 熊祺琰 冯志新 邵国青 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期2365-2373,共9页

对我国用于生产的3种猪支原体肺炎活疫苗菌株(168株、RM48株、Z株)进行P46和P97R1R2基因序列分析,考察其保守性和差异。提取来源于四家猪支原体肺炎活疫苗生产企业的疫苗株基因组DNA,以其为模板进行PCR扩增、测序;利用DNAStar序列分析... 对我国用于生产的3种猪支原体肺炎活疫苗菌株(168株、RM48株、Z株)进行P46和P97R1R2基因序列分析,考察其保守性和差异。提取来源于四家猪支原体肺炎活疫苗生产企业的疫苗株基因组DNA,以其为模板进行PCR扩增、测序;利用DNAStar序列分析软件对测序结果和国际标准株J株、232株、7448株、7422株一起进行比对,分析3种疫苗菌株和4个标准株之间核苷酸及氨基酸差异。结果发现,疫苗株Z株、RM48株、168株的P46基因序列相似性为100%,与J株、232株相似性为99.1%,与7422株、7448株相似性为98.9%。疫苗株RM48株和Z株的P97R1R2基因序列相似性为100%;而与疫苗株168株相似性为97.5%;三个疫苗株与J株、232株、7448株、7422株的P97R1R2基因相似性仅为90.1%~93.6%,差异主要发生在R1区重复序列的次数上。本研究为临床猪支原体肺炎活疫苗菌株的检测及不同菌株之间的差异鉴定研究奠定了基础。 展开更多

关键词 猪支原体肺炎 猪肺炎支原体 疫苗株 P46基因 P97基因

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猪肺炎支原体P65基因原核表达及免疫原性分析 被引量：5

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作者 刘茂军 张悦 +4 位作者 杜改梅 白昀 王海燕 姜平 邵国青 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期262-267,共6页

P65蛋白是猪肺炎支原体的主要免疫优势蛋白,与其他支原体无交叉反应,常作为猪肺炎支原体检测的靶蛋白。本研究通过基因合成获得P65基因中含有3个稀有密码子的前922bp,利用PCR从Mhp168株扩增获得P65基因后段,然后通过重叠延伸PCR(SOE-PCR... P65蛋白是猪肺炎支原体的主要免疫优势蛋白,与其他支原体无交叉反应,常作为猪肺炎支原体检测的靶蛋白。本研究通过基因合成获得P65基因中含有3个稀有密码子的前922bp,利用PCR从Mhp168株扩增获得P65基因后段,然后通过重叠延伸PCR(SOE-PCR)将前后段连接后,克隆入pET-32a(+)中,获得重组质粒pET-32a(+)/mhp P65,经IPTG诱导获得87ku的重组融合蛋白,Western blot分析表明其与Mhp血清呈强阳性反应。将该重组蛋白免疫小鼠获得了高滴度的特异性抗体,表明该蛋白具有良好的免疫原性。本研究成功表达了可溶性的Mhp P65融合蛋白,其具有较好的免疫原性,这为猪肺炎支原体P65蛋白的功能研究以及诊断学方法的建立和亚单位疫苗的研制提供了帮助。 展开更多

关键词 猪肺炎支原体 P65基因 原核表达 免疫原性

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1株绵羊边界病病毒的分离鉴定与序列分析 被引量：3

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作者 刘霞 毛立 +4 位作者 李文良 杨蕾蕾 张纹纹 魏建忠 江杰元 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期434-442,共9页

对华东地区某羊场采集定点监测的绵羊血液样品进行边界病的感染情况调查。通过RT-PCR方法检测瘟病毒5′-UTR基因,发现1只绵羊的血清样品在不同时间检测均为阳性,证实其为边界病病毒(BDV)持续性感染。将该阳性血清样品接种MDBK细胞,进行... 对华东地区某羊场采集定点监测的绵羊血液样品进行边界病的感染情况调查。通过RT-PCR方法检测瘟病毒5′-UTR基因,发现1只绵羊的血清样品在不同时间检测均为阳性,证实其为边界病病毒(BDV)持续性感染。将该阳性血清样品接种MDBK细胞,进行病毒分离鉴定。通过Npro基因RT-PCR扩增、电镜观察、病毒全基因组序列分析,并对分离毒株5′-UTR和Npro基因进行遗传进化分析。结果显示,该毒株在MDBK细胞上盲传至第8代,不发生细胞病变。RT-PCR扩增获得Npro基因预期大小片段,电镜观察以及测序分析表明成功分离出1株BDV,将其命名为JSLS12-01。设计覆盖BDV全基因组的6对引物,RT-PCR扩增并测序,该分离株全基因组序列大小为12 227bp(GenBank登录号为KC963426)。序列比对结果显示,该毒株基因组序列和氨基酸序列与已有BDV分离株之间相似性分别为72.3%~80.4%和80.1%~89.7%。5′-UTR和Npro基因系统进化分析显示,该分离株与BDV 3参考毒株亲缘关系最近,相似性最高分别为87.7%和75.8%。结果证实从绵羊血液样品中鉴定并分离到1株ncp型BDV分离株,经序列分析表明该毒株属于BDV 3亚型。 展开更多

关键词 边界病病毒 分离 鉴定 序列分析

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规模猪场PRRS风险因素分析 被引量：8

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作者 谭业平 胡肄农 +1 位作者 臧一天 陆昌华 《中国动物检疫》 CAS 2011年第12期54-59,共6页

猪繁殖与呼吸综合征造成养猪产业巨大经济损失,预防和消除该病已成为世界性难题。本文根据猪繁殖与呼吸综合征流行病学特性,结合规模化猪场生产管理实际,采用风险列举法对规模猪场PRRS传入和场内传播流行的风险因素进行了系统分析。提... 猪繁殖与呼吸综合征造成养猪产业巨大经济损失,预防和消除该病已成为世界性难题。本文根据猪繁殖与呼吸综合征流行病学特性,结合规模化猪场生产管理实际,采用风险列举法对规模猪场PRRS传入和场内传播流行的风险因素进行了系统分析。提出规模猪场PRRS风险因素主要包括猪场选址、用品和工具进入、员工和访客进入、活猪运输、饲料运输、死猪处理、粪便管理、猪舍条件、生物传播媒介、引种等外部风险因素和PRRSV状态、管理措施、猪只流动、设施条件、协同病原、猪舍布局等内部风险因素。这为进一步开展规模猪场PRRS风险评估研究,制订科学有效的PRRS风险管理措施奠定了良好基础。 展开更多

关键词 规模猪场 猪繁殖与呼吸综合征 风险因素

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不同毒力猪肺炎支原体侵入宿主细胞的观察 被引量：2

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作者 车巧林 刘蓓蓓 +2 位作者 刘茂军 熊祺琰 邵国青 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期981-988,共8页

旨在研究不同毒力猪肺炎支原体对宿主细胞的侵入以及侵入后在宿主细胞内的分布位置。首先用猪肺炎支原体野毒株XLW-1感染PK15细胞不同时间后,间接免疫荧光染色,激光扫描共聚焦显微镜对PK15细胞进行断层扫描,以观察XLW-1能否侵入细胞以... 旨在研究不同毒力猪肺炎支原体对宿主细胞的侵入以及侵入后在宿主细胞内的分布位置。首先用猪肺炎支原体野毒株XLW-1感染PK15细胞不同时间后,间接免疫荧光染色,激光扫描共聚焦显微镜对PK15细胞进行断层扫描,以观察XLW-1能否侵入细胞以及感染时间对XLW-1侵入细胞的影响。然后,在能侵入细胞的基础上,用不同毒力的猪肺炎支原体感染宿主细胞STEC、PK15、SJPL和3D4/21,观察它们对宿主细胞的侵入情况。结果表明,猪肺炎支原体野毒株XLW-1与PK15细胞作用8h时不能侵入PK15,作用10h以上时可以侵入PK15,并且随着作用时间的延长侵入的猪肺炎支原体也在增加。研究还表明猪肺炎支原体野毒株XLW-1、168致弱株和168疫苗株均能侵入STEC、PK15、SJPL和3D4/21。并且,STEC中3个菌株均随机分布在细胞质中;PK15中3个菌株均主要分布在靠近细胞膜和细胞两端狭长的细胞质中;SJPL中XLW-1和168疫苗株主要分布在贴近细胞膜内侧的细胞质中,168致弱株则散布在细胞质中;3D4/21中XLW-1和168致弱株主要分布在贴近细胞膜内侧的细胞质中,168疫苗株则在整个细胞质中分布较多。结果提示不同毒力的猪肺炎支原体均能侵入宿主细胞STEC、PK15、SJPL和3D4/21。 展开更多

关键词 猪肺炎支原体 不同毒力 宿主细胞 侵入

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一例猪鼻支原体引起保育猪关节炎的诊治 被引量：3

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作者 华利忠 刘永哲 +2 位作者 马庆红 张旭 邵国青 《养猪》 2012年第6期119-120,共2页

猪关节炎是猪场常见到的疾病，主要有3种原因：外伤、风寒和感染。其中病原微生物的感染较为常见，损失也较大，尤其是猪链球菌（SS）、副猪嗜血杆菌（HPS）和猪鼻支原体（Mycoplasma hyorhinis，Mhr）的感染，临床上较难防治。

关键词 保育猪 关节炎 支原体 诊治 副猪嗜血杆菌 鼻 病原微生物 猪链球菌

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猪瘟病毒阳性血清的猪瘟抗体检测与分析 被引量：4

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作者 孙华伟 张敬峰 +1 位作者 赵永前 茅爱华 《养猪》 2015年第3期113-114,共2页

为掌握猪瘟病毒阳性血清的猪瘟抗体水平分布情况,应用美国IDEXX公司的猪瘟病毒抗体检测试剂盒对江苏省农业科学院动物疫病诊断检测中心临床门诊近期收集的经PCR检测为猪瘟病毒阳性的26份血清进行猪瘟抗体水平的检测,以期为猪场猪瘟的有... 为掌握猪瘟病毒阳性血清的猪瘟抗体水平分布情况,应用美国IDEXX公司的猪瘟病毒抗体检测试剂盒对江苏省农业科学院动物疫病诊断检测中心临床门诊近期收集的经PCR检测为猪瘟病毒阳性的26份血清进行猪瘟抗体水平的检测,以期为猪场猪瘟的有效防控提供科学数据参考。结果显示:猪瘟抗体阳性率为26.9%,阴性率为57.7%,可疑率为15.4%,抗体阻断率平均值为28.0%,且78.6%的猪瘟抗体阴性血清阻断率小于10%,即不同猪瘟抗体水平的血清均可检出猪瘟病毒,但猪瘟抗体阻断率小于10%的血清所占比例最大,达42.3%。因此,猪场在日常的猪瘟抗体检测中,如果发现猪瘟抗体阻断率小于10%的猪只所占比例越大,则预示着猪群中猪瘟带毒的比例越高。 展开更多

关键词 猪瘟病毒 阳性血清 猪瘟抗体 检测 分析

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一起肥育猪沙门氏菌病被误诊为蓝耳病的反思 被引量：3

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作者 孙华伟 张敬峰 +2 位作者 赵永前 茅爱华 张晓曦 《养猪》 2015年第5期115-116,共2页

2015年7月江苏省南京市周边某猪场发生一起肥育猪沙门氏菌病被误诊为蓝耳病的病例,通过对发病肥育猪进行分子生物学诊断和细菌的分离鉴定,最终确诊为猪沙门氏菌病。对所有猪只肌肉注射中敏药物头孢吡肟20 mg/kg体重,每天2次,连用3 d;同... 2015年7月江苏省南京市周边某猪场发生一起肥育猪沙门氏菌病被误诊为蓝耳病的病例,通过对发病肥育猪进行分子生物学诊断和细菌的分离鉴定,最终确诊为猪沙门氏菌病。对所有猪只肌肉注射中敏药物头孢吡肟20 mg/kg体重,每天2次,连用3 d;同时在饮水中添加2倍剂量的高质量黄芪多糖和电解质多维;停喂剩菜剩饭等,最终成功控制了死亡,后续再无新发病例。同时反映出基层散养户普遍存在一个误区,即只要猪耳朵出现发绀就怀疑是蓝耳病;猪沙门氏菌病作为老病和二类传染病不被重视,这对基层养猪业的健康发展是相当不利的。 展开更多

关键词 沙门氏菌病 蓝耳病 误诊 诊治

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