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金黄色葡萄球菌核酸酶A在温控双表达载体中的表达及其活性分析 被引量:3
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作者 付立霞 张磊 +4 位作者 李欣容 韩先干 高波 张晓君 魏文志 《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期34-37,共4页
菌蜕制备时,金黄色葡萄球菌核酸酶A(Staphylococcal nuclease A,SNA)在温控单表达系统中表达时,对宿主菌的灭活效率比其在双表达系统中与基因E共表达时的灭活效率高近一个数量级。为探究导致这种差异的可能机制,将SNA克隆至一温控双表... 菌蜕制备时,金黄色葡萄球菌核酸酶A(Staphylococcal nuclease A,SNA)在温控单表达系统中表达时,对宿主菌的灭活效率比其在双表达系统中与基因E共表达时的灭活效率高近一个数量级。为探究导致这种差异的可能机制,将SNA克隆至一温控双表达载体进行诱导表达并对其活性进行综合分析。结果显示,胞内和胞外产物均具有核酸酶活性,分别在升温诱导30 min和90 min后被检出,对宿主菌的4 h灭活率为99.7%,宿主基因组亦被成功降解。这表明,SNA在温控双表达载体中的表达仍能如在单表达载体中一样有效灭活细菌,裂解基因E和SNA的共表达可能才是造成上述差异的主要原因。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌核酸酶A 菌蜕 裂解基因E
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水温、pH值和光照对斑马鱼受精卵孵化率的影响 被引量:8
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作者 陈楠 高雯 +4 位作者 张磊 董罗涛 沈泽恩 魏文志 付立霞 《水产养殖》 CAS 2016年第7期27-31,共5页
分别通过单因素实验和正交实验探究水温、pH值和光照对斑马鱼受精卵孵化率的影响。依次进行的单因素实验显示,水温28℃,pH值7.5,光照强度100 lx,光周期10L∶14D时孵化率最高。正交实验结果表明上述因素对斑马鱼受精卵孵化率的影响为:水... 分别通过单因素实验和正交实验探究水温、pH值和光照对斑马鱼受精卵孵化率的影响。依次进行的单因素实验显示,水温28℃,pH值7.5,光照强度100 lx,光周期10L∶14D时孵化率最高。正交实验结果表明上述因素对斑马鱼受精卵孵化率的影响为:水温>pH=光照强度>光照周期,理论最佳孵化条件为水温28℃,pH值8.0,光照强度100l x,光周期12L∶12D。在孵化过程中,受精卵孵化时间随着孵化温度的提高而缩短,且在发育过程中存在不同步现象。 展开更多
关键词 斑马鱼 孵化率 水温 PH值 光照
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实时定量PCR测定爱德华氏菌隐蔽质粒的拷贝数 被引量:3
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作者 付立霞 高雯 +4 位作者 韩先干 高波 张晓君 刘晓丹 曾令兵 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2018年第4期63-70,共8页
为测定爱德华氏菌(Edwardsiella ictaluri)隐蔽质粒的拷贝数,并探究不同基因组制备方式及定量策略对质粒拷贝数测定的影响,分别采用试剂盒和水煮法制备爱德华氏菌基因组,通过绝对定量和相对定量PCR测定两种不同总DNA制备方式下的隐蔽质... 为测定爱德华氏菌(Edwardsiella ictaluri)隐蔽质粒的拷贝数,并探究不同基因组制备方式及定量策略对质粒拷贝数测定的影响,分别采用试剂盒和水煮法制备爱德华氏菌基因组,通过绝对定量和相对定量PCR测定两种不同总DNA制备方式下的隐蔽质粒拷贝数,同时测定试剂盒对染色体DNA和质粒DNA的回收率。结果显示,以试剂盒提取的总DNA测得的pEI1和p EI2拷贝数绝对定量和相对定量分别为3.63±0.30、5.04±0.18和4.22±0.15、5.13±0.50,显著低于以水煮法测得的pEI1和p EI2拷贝数的绝对定量11.84±0.80、11.70±0.25和相对定量13.85±1.64、11.90±0.97。回收率结果显示,试剂盒对染色体DNA的回收率(45.8±4.1)%,显著高于对质粒pEII的回收率(25.1±0.5)%和pEI2的回收率(31.3±1.7)%。结果表明:通过实时定量PCR测定爱德华氏菌隐蔽质粒的拷贝数时,基因组的制备以水煮法为宜,爱德华氏菌隐蔽质粒pEI1和pEI2均属于中拷贝质粒。 展开更多
关键词 鮰爱德华氏菌(Edwardsiella ictaluri) 隐蔽质粒 质粒拷贝数 实时定量PCR
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噬菌体源天然抑菌剂在中央厨房食品安全控制中的应用 被引量:2
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作者 张元嵩 金昌海 杨振泉 《美食研究》 北大核心 2021年第3期67-74,共8页
食源性病原菌污染引发的食品安全问题是当前餐饮食品生产、流通以及公共卫生领域面临的重要问题。当前中央厨房食品集中生产加工,统一配送已经成为新型餐饮发展趋势,但由于加工环节多、标准化程度低,制作与配送过程极易导致食源性致病... 食源性病原菌污染引发的食品安全问题是当前餐饮食品生产、流通以及公共卫生领域面临的重要问题。当前中央厨房食品集中生产加工,统一配送已经成为新型餐饮发展趋势,但由于加工环节多、标准化程度低,制作与配送过程极易导致食源性致病菌污染和繁殖。噬菌体作为自然界广泛分布的天然抑菌剂,对于控制中央厨房食品及生产环境中的病原菌具有高效、廉价、安全等优势。近年来,新型噬菌体抑菌剂研发已受到广泛关注,世界各国在噬菌体资源、生物学特性以及在各种基质中的控菌方面开展了大量研究,在部分国家已经形成商品化生物抑菌剂。本研究结合中央厨房生产特点,对原料、成品、生产环境中食源性病原菌的噬菌体控制研究和前景进行综述,旨在为研发新型噬菌体源制剂及其在中央厨房安全控制中应用提供依据。 展开更多
关键词 噬菌体 中央厨房 生物控制 食源性病原菌 食品安全
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Clade2.3.2.1c H5N1亚型禽流感疫苗候选株的构建
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作者 刘开拓 高如一 +7 位作者 孙文强 李娟 刘东 胡娇 顾敏 王晓泉 刘晓文 刘秀梵 《中国家禽》 北大核心 2017年第4期17-21,共5页
近年来clade2.3.2.1c中的H5N1亚型禽流感病毒的抗原性发生了很大变化,Re-6疫苗并不能对其提供有效保护。为对该分支毒株进行有效防控,研究以A/Puerto Rico/8/34(H1N1,PR8)毒株为内部基因供体,以clade2.3.2.1c的H5N1亚型毒株A/chicken/Ji... 近年来clade2.3.2.1c中的H5N1亚型禽流感病毒的抗原性发生了很大变化,Re-6疫苗并不能对其提供有效保护。为对该分支毒株进行有效防控,研究以A/Puerto Rico/8/34(H1N1,PR8)毒株为内部基因供体,以clade2.3.2.1c的H5N1亚型毒株A/chicken/Jiangsu/YB7/2015(YB7)的HA和NA基因作外部供体,并删除YB7株HA中裂解位点处的多个碱性氨基酸,通过反向遗传方法成功拯救出1株重组病毒r YB7。r YB7株病毒在鸡胚和MDCK细胞上均有较好的繁殖性能,对SPF鸡胚和鸡均无致病性。本实验室在对毒株抗原性研究的基础上研发的疫苗候选株为防控变异的clade2.3.2.1c的禽流感病毒提供了良好的疫苗备选。 展开更多
关键词 H5N1 clade2.3.2.1c 反向遗传
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