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miR-518a-5p/HDAC6轴参与卵巢癌SKOV3细胞DNA氧化损伤的作用机制
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作者 朱玲 蔡伟莉 +3 位作者 刘超 许国莹 张苗 叶耘峰 《中国比较医学杂志》 北大核心 2025年第3期71-81,共11页
目的 探讨miR-518a-5p/组蛋白去乙酰酶6(histone deacetylase 6,HDAC6)轴参与卵巢癌(ovarian cancer, OC)SKOV3细胞DNA氧化损伤的作用机制。方法 实时荧光定量逆转录PCR(qRT-PCR)检测OC组织和不同癌细胞(A2780、SKOV3、CAOV3)中miR-518a... 目的 探讨miR-518a-5p/组蛋白去乙酰酶6(histone deacetylase 6,HDAC6)轴参与卵巢癌(ovarian cancer, OC)SKOV3细胞DNA氧化损伤的作用机制。方法 实时荧光定量逆转录PCR(qRT-PCR)检测OC组织和不同癌细胞(A2780、SKOV3、CAOV3)中miR-518a-5p、HDAC6 mRNA表达,将SKOV3细胞分为Control组、miR-NC组、miR-518a-5p mimics组、miR-518a-5p mimics+pcDNA-NC组、miR-518a-5p mimics+pc-HDAC6组。利用平板克隆与Hoechst33258染色分析细胞增殖与凋亡情况;免疫荧光法检测磷酸化组蛋白H2AX(phosphorylated histone H2AX,γ-H2AX)表达;流式细胞仪分析活性氧(reactive oxygen species, ROS)水平;Western blot法分析HDAC6、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein, Bax)、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)表达;双荧光素酶分析miR-518a-5p与HDAC6的调节关系。通过异种移植肿瘤模型研究miR-518a-5p对OC细胞DNA氧化损伤的影响及机制。结果 OC组织和A2780、SKOV3、CAOV3细胞中miR-518a-5p表达降低,HDAC6表达升高(P<0.001);SKOV3细胞中miR-518a-5p表达最低,HDAC6表达最高,故选择SKOV3细胞进行后续实验。与miR-NC组比较,miR-518a-5p mimics组miR-518a-5p表达、细胞凋亡率、γ-H2AX阳性细胞数、ROS相对荧光强度、Bax表达升高,HDAC6 mRNA及蛋白表达、Bcl-2表达、集落形成数降低(P<0.001);与miR-518a-5p mimics+pcDNA-NC组比较,miR-518a-5p mimics+pc-HDAC6组HDAC6 mRNA及蛋白表达、集落形成数、Bcl-2表达升高,细胞凋亡率、γ-H2AX阳性细胞数、ROS相对荧光强度、Bax表达降低(P<0.001);HDAC6与miR-518a-5p存在靶向调控关系。体内实验结果显示,过表达miR-518a-5p降低移植瘤体积、重量及肿瘤组织HDAC6蛋白表达,增高γ-H2AX阳性表达(P<0.001);在过表达miR-518a-5p的基础上上调HDAC6表达后,移植瘤体积、重量及HDAC6蛋白表达升高,γ-H2AX阳性表达下降(P<0.05)。结论 OC组织和细胞中miR-518a-5p表达降低,HDAC6表达升高,过表达miR-518a-5p可通过抑制HDAC6表达,诱导SKOV3细胞DNA氧化损伤,进而抑制细胞增殖,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 miR-518a-5p 组蛋白去乙酰酶6 卵巢癌 DNA氧化损伤 细胞凋亡
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化工专业大学生创业就业与创新意识的培养 被引量:1
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作者 温长胜 张胜玉 张自强 《塑料工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期178-179,共2页
随着环境保护和可持续发展理念的深入人心,化工产业面临绿色化、智能化转型,对应的教育体系也迫切需要变革,以期培养出既具备深厚专业知识又能灵活应对行业变化、勇于创新创业的人才。化工专业课程体系作为培养行业未来科技人才的核心,... 随着环境保护和可持续发展理念的深入人心,化工产业面临绿色化、智能化转型,对应的教育体系也迫切需要变革,以期培养出既具备深厚专业知识又能灵活应对行业变化、勇于创新创业的人才。化工专业课程体系作为培养行业未来科技人才的核心,历来强调理论知识与工程实践的结合,旨在为学生提供坚实的学科基础和技能训练。随着工业发展和技术进步,这一课程体系也在不断演化与更新,紧跟化工行业的技术革新趋势。学生通过对这些课程内容的学习,不仅掌握化学反应原理、工程技术操作等基本技能,还能够理解新材料的开发、能源的合理利用、环境保护等现代化工领域的关键问题。此外,随着企业对高素质化工专业人才需求的增长,课程体系亦在加强学生团队合作能力、项目管理经验、以及技术经济分析等实践技能的培养,为化工专业大学生未来的就业创业奠定坚实基础。 展开更多
关键词 化学反应原理 化工产业 工程技术 团队合作能力 科技人才 就业创业 项目管理经验 课程体系
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木聚糖酶重组毕赤酵母合成培养基的Plackett-Burman法优化 被引量:2
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作者 朱新术 赵文慧 +4 位作者 张晓蕾 林波 刘超 张苗 陈菲 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2020年第7期109-114,共6页
目的:筛选合成培养基中影响重组毕赤酵母高效表达木聚糖酶的关键成分。方法:首先通过单因素实验和t检验筛选重组毕赤酵母表达木聚糖酶的最佳初始诱导培养基,其次利用Plackett-Burman设计及逐步回归建立培养基成分和响应值间的多元线性... 目的:筛选合成培养基中影响重组毕赤酵母高效表达木聚糖酶的关键成分。方法:首先通过单因素实验和t检验筛选重组毕赤酵母表达木聚糖酶的最佳初始诱导培养基,其次利用Plackett-Burman设计及逐步回归建立培养基成分和响应值间的多元线性回归模型,并筛选出关键培养基成分,最后利用相关系数分析,对非关键成分含量的选取做出合理的取舍。结果:筛选出甘油磷酸钠、硫酸钙、PTM1和硫酸铵是影响重组酵母表达木聚糖酶的关键培养基成分,且当培养基组合为甘油磷酸钠20 g/L,(NH4)2 SO42.0 g/L,CaSO4·2H2O 2.0 g/L,K2 SO420.0 g/L,MgSO4·7H2O 6.0 g/L,PTM18.0 mL/L,甲醇10.0 mL/L,吐温802.0 g/L时,木聚糖酶的酶活力和比酶活分别达到2298.4 U/mL和9926.3 U/mg,分别是优化前的3.055倍和3.889倍。结论:Plackett-Burman设计不仅可以显著提升培养基优化目标,还能筛选出关键培养基成分,从而为进一步优化奠定了基础。 展开更多
关键词 重组毕赤酵母 木聚糖酶 诱导合成培养基 PLACKETT-BURMAN设计
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基于均匀设计和逐步回归的热纤梭菌发酵产糖的培养基优化研究
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作者 朱新术 赵文慧 +3 位作者 张苗 杨学艺 陈曦 胡秀秀 《中国动物保健》 2019年第11期42-44,共3页
以滤纸为主要原料,以葡萄糖和可溶性总糖为优化目标,利用均匀设计和逐步回归法对培养基中重要成分影响热纤梭菌发酵产糖的规律进行了研究。结果表明当实验水平分别取滤纸20.0 g/L,酵母粉3.50 g/L,氯化镁2.0 g/L,半胱氨酸0.788 g/L,磷酸... 以滤纸为主要原料,以葡萄糖和可溶性总糖为优化目标,利用均匀设计和逐步回归法对培养基中重要成分影响热纤梭菌发酵产糖的规律进行了研究。结果表明当实验水平分别取滤纸20.0 g/L,酵母粉3.50 g/L,氯化镁2.0 g/L,半胱氨酸0.788 g/L,磷酸氢二钾8.0 g/L,磷酸二氢钾1.4 g/L,尿素4.0 g/L和氯化钙0.05g/L和滤纸20 g/L,酵母粉5.74 g/L,氯化镁0.424 g/L,半胱氨酸0.996 g/L,磷酸氢二钾7.99 g/L,磷酸二氢钾4.99 g/L,尿素1.17 g/L和氯化钙0.072 g/L时,可溶性总糖和葡萄糖的得率分别为77.26%和45%,浓度分别可达15.452 g/L和8.996 g/L,分别比优化前的浓度提高35.75%和58.0%。 展开更多
关键词 热纤梭菌 纤维寡糖 均匀设计 逐步回归
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