目的:建立一种新的杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)基因分型方法。方法:利用16对KIR序列特异性引物和两对内参照引物及荧光染料SYBR Green I进行实时聚合酶链反应(real-time PCR),分析各扩增产物的熔解曲线,确定各个KIR基因熔解温度和特...目的:建立一种新的杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)基因分型方法。方法:利用16对KIR序列特异性引物和两对内参照引物及荧光染料SYBR Green I进行实时聚合酶链反应(real-time PCR),分析各扩增产物的熔解曲线,确定各个KIR基因熔解温度和特征,并以此为依据判断16种KIR基因的出现或缺失。对样本DNA进行不同倍数稀释检测该方法的敏感性。结果:分析熔解曲线能有效地进行KIR基因分型。该方法甚至可以对0.1 ng DNA的样本成功进行KIR分型。利用该方法成功地对10例外周血基因组DNA和10例宫颈细胞基因组DNA进行了KIR分型。结论:SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR应用于KIR基因分型,具有简单、快速、敏感、实时和环保的特点,为实现KIR分型的自动化提供可能性。展开更多
目的:探讨S期激酶相关蛋白2(S-phase kinase-associated protein 2,Skp2)在肺癌患者外周血中微转移中的诊断价值。方法:选取40例在本院就诊经病理组织学检查确诊为非小细胞肺癌(NSCLC)的患者作为肺癌组,选择同期诊断为肺部良性疾病的20...目的:探讨S期激酶相关蛋白2(S-phase kinase-associated protein 2,Skp2)在肺癌患者外周血中微转移中的诊断价值。方法:选取40例在本院就诊经病理组织学检查确诊为非小细胞肺癌(NSCLC)的患者作为肺癌组,选择同期诊断为肺部良性疾病的20例患者为肺部良性疾病组。未进行任何治疗前收集各研究对象的外周血,实时荧光定量PCR方法检测血Skp2mRNA并进行评价分析。结果:(1)肺癌组外周血中Skp2mRNA相对表达量明显高于肺部良性疾病组,差异具有统计学意义(P=0.006);(2)肺癌组外周血中Skp2mRNA的阳性表达率分别为77.5%,肺部良性疾病组阳性表达率为8%,明显低于肺癌组,差异具有统计学意义(P<0.01);(3)肺癌组外周血中Skp2mRNA的表达与患者肿瘤的TNM分期显著相关(P=0.004),与年龄、性别、吸烟、肿瘤的组织学类型及分化程度无明显相关性。结论:外周血Skp2mRNA表达可作为肺癌细胞的分子标记物用于NSCLC临床诊断。展开更多
文摘目的:建立一种新的杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)基因分型方法。方法:利用16对KIR序列特异性引物和两对内参照引物及荧光染料SYBR Green I进行实时聚合酶链反应(real-time PCR),分析各扩增产物的熔解曲线,确定各个KIR基因熔解温度和特征,并以此为依据判断16种KIR基因的出现或缺失。对样本DNA进行不同倍数稀释检测该方法的敏感性。结果:分析熔解曲线能有效地进行KIR基因分型。该方法甚至可以对0.1 ng DNA的样本成功进行KIR分型。利用该方法成功地对10例外周血基因组DNA和10例宫颈细胞基因组DNA进行了KIR分型。结论:SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR应用于KIR基因分型,具有简单、快速、敏感、实时和环保的特点,为实现KIR分型的自动化提供可能性。
文摘目的:探讨S期激酶相关蛋白2(S-phase kinase-associated protein 2,Skp2)在肺癌患者外周血中微转移中的诊断价值。方法:选取40例在本院就诊经病理组织学检查确诊为非小细胞肺癌(NSCLC)的患者作为肺癌组,选择同期诊断为肺部良性疾病的20例患者为肺部良性疾病组。未进行任何治疗前收集各研究对象的外周血,实时荧光定量PCR方法检测血Skp2mRNA并进行评价分析。结果:(1)肺癌组外周血中Skp2mRNA相对表达量明显高于肺部良性疾病组,差异具有统计学意义(P=0.006);(2)肺癌组外周血中Skp2mRNA的阳性表达率分别为77.5%,肺部良性疾病组阳性表达率为8%,明显低于肺癌组,差异具有统计学意义(P<0.01);(3)肺癌组外周血中Skp2mRNA的表达与患者肿瘤的TNM分期显著相关(P=0.004),与年龄、性别、吸烟、肿瘤的组织学类型及分化程度无明显相关性。结论:外周血Skp2mRNA表达可作为肺癌细胞的分子标记物用于NSCLC临床诊断。
