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TGEV SHXB株组织毒对1月龄仔猪的致病性研究: 1; 作者肖丽张宝太 +8 位作者蔡旭航李思远朱雪蛟郭荣利查银河舒建洪主性李基棕李彬《中国动物传染病学报》北大核心 2025年第3期56-61,共6页; 猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)感染哺乳仔猪可出现剧烈呕吐、水样腹泻、脱水和死亡,随着仔猪日龄增加,发病则较为温和,但TGEV对1月龄仔猪是否有致病性尚无人报道。本试验旨在评估TGEV SHXB株组织毒对1月龄仔猪的致病性。将5头5日龄仔猪分为... 展开更多; 关键词 TGEV SHXB 组织毒致病性 1月龄仔猪; 在线阅读下载PDF 职称材料

河北省廊坊市牛主要病毒性腹泻病原感染状况检测及牛冠状病毒演化分析被引量：4: 2; 作者李思远付新成 +10 位作者袁雪松毛立蔡旭航孙心如黄金谢玲玲王府周华张琪李基棕李彬《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期649-659,共11页; 牛病毒性腹泻病原严重危害畜牧业生产,BVDV、BoAstV、BCoV、MRV、BKoV、BoNeV、BNoV、BRV、BToV被认为是引起牛群腹泻的病原,不仅如此,BVDV、BCoV和BToV除了能引起消化道症状外还能引起呼吸道症状,BVDV不仅能引起消化道和呼吸道症状,还... 展开更多; 关键词病毒性腹泻牛冠状病毒流行病学调查腹泻病原; 在线阅读下载PDF 职称材料

牛冠状病毒S1蛋白的真核表达及间接ELISA方法的建立与应用被引量：3: 3; 作者黄金李思远 +6 位作者毛立蔡旭航谢玲玲王府周华李基棕李彬《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期2050-2060,共11页; 为建立一种检测牛冠状病毒(BCoV)的抗体间接ELISA检测方法,本研究利用昆虫杆状病毒表达系统表达BCoV的S1蛋白,并作为包被抗原,建立BCoV的S1蛋白抗体间接ELISA检测方法,应用于临床样品检测。结果显示,S1蛋白大小约100 ku,可表达于昆虫Hi... 展开更多; 关键词牛冠状病毒昆虫杆状病毒表达系统 S1蛋白间接ELISA; 在线阅读下载PDF 职称材料

牛冠状病毒TaqMan荧光定量检测方法的建立及国内部分地区流行病学调查被引量：2: 4; 作者黄金李思远 +7 位作者谢玲玲周迪杨蓉王松周华蔡旭航李基棕李彬《江苏农业科学》北大核心 2023年第17期29-33,共5页; 牛冠状病毒(BCoV)在全球广泛存在,在临床上能引起牛腹泻以及呼吸道感染,给养殖业带来巨大经济损失。为快速批量检测临床样品、分析国内的BCoV隐性感染及流行情况,根据BCoV的N基因序列设计了引物和探针,建立了TaqMan荧光定量RT-PCR检测方... 展开更多; 关键词牛冠状病毒 TaqMan荧光定量样品检测隐性感染 RT-PCR; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名TGEV SHXB株组织毒对1月龄仔猪的致病性研究: 1; 作者肖丽张宝太蔡旭航李思远朱雪蛟郭荣利查银河舒建洪主性李基棕李彬; 机构江苏省农业科学院兽医研究所农业农村部兽用生物制品工程技术重点实验室南京农业大学动物医学院江苏大学生命科学学院食品与生物工程学院贵州大学动物科学学院浙江洪晟生物科技股份有限公司西北农林科技大学动物医学院; 出处《中国动物传染病学报》北大核心 2025年第3期56-61,共6页; 基金十四五国家重点研发计划(2022YFD1800601) 江苏省自然科学基金(BK20221432)。; 文摘猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)感染哺乳仔猪可出现剧烈呕吐、水样腹泻、脱水和死亡,随着仔猪日龄增加,发病则较为温和,但TGEV对1月龄仔猪是否有致病性尚无人报道。本试验旨在评估TGEV SHXB株组织毒对1月龄仔猪的致病性。将5头5日龄仔猪分为两组,第一组口服TGEV SHXB病毒液,攻毒剂量为2 mL×10^(5.0)TCID_(50)/头,第2组仔猪口服2 mL的DMEM。病毒载量最高时剖杀,取其肠道研磨获取组织毒。将8头1月龄仔猪分为两组,第一组1月龄仔猪口服TGEV SHXB组织毒,攻毒剂量为10 mL×10^(6.50)copies/mL,第二组口服10 mL的DMEM。攻毒后每天采集肛拭子样品,荧光定量检测试验猪排毒情况,并记录观察仔猪腹泻情况,7 d后全部剖杀,观察肠道及其他脏器变化情况,取十二指肠、空肠、回肠、盲肠、结肠和直肠做病理切片和免疫组化。结果显示TGEV SHXB对5日龄仔猪具有较高的致病性,且5日龄发病小猪的肠道内容物能感染1月龄仔猪,攻毒猪在3 DPC左右出现水样腹泻,检测到持续排毒,在4 DPC排毒量最高(约10^(8.0)copies/mL);剖检可见肠腔扩张、肠壁变薄充血和肠系膜充血等;攻毒猪组织病理学检查,可见小肠绒毛严重萎缩、脱落并伴有炎性细胞浸润。免疫组化结果显示,攻毒猪十二指肠、空肠和回肠绒毛上皮细胞胞中检测到TGEV阳性颗粒。本研究首次揭示了TGEV SHXB组织毒对1月龄仔猪具有较强的致病性,为TGEV的仔猪攻毒模型研究提供新的参考。; 关键词 TGEV SHXB 组织毒致病性 1月龄仔猪; Keywords TGEV SHXB intestinal virus contents pathogenicity 1-month-old piglets; 分类号 S858.28 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名河北省廊坊市牛主要病毒性腹泻病原感染状况检测及牛冠状病毒演化分析被引量：4: 2; 作者李思远付新成袁雪松毛立蔡旭航孙心如黄金谢玲玲王府周华张琪李基棕李彬; 机构西北农林科技大学动物医学院江苏省农业科学院兽医研究所南京农业大学动物医学院江苏大学生命科学学院食品与生物工程学院河北省廊坊市农业农村局贵州省种畜禽种质测定中心黔西市动物疫病预防控制中心; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期649-659,共11页; 基金 “十四五”国家重点研发计划(2021YFD1801101) 陕西省重点研发计划一般项目(2022NY-098) +1 种基金江苏省农业科技自主创新资金项目(CX(21)3137)。; 文摘牛病毒性腹泻病原严重危害畜牧业生产,BVDV、BoAstV、BCoV、MRV、BKoV、BoNeV、BNoV、BRV、BToV被认为是引起牛群腹泻的病原,不仅如此,BVDV、BCoV和BToV除了能引起消化道症状外还能引起呼吸道症状,BVDV不仅能引起消化道和呼吸道症状,还会导致母牛生殖功能异常,这些疾病对畜牧业造成巨大的经济损失。为了解牛主要病毒性腹泻病原流行情况,本次试验通过PCR检测方法对我国河北地区323份腹泻牛粪样品进行常见9种病毒性牛腹泻病原进行检测。结果显示,BVDV阳性检出率1.85%(6/323)、BCoV阳性检出率14.24%(46/323)、BRV阳性检出率57.89%(187/323)、BoAstV阳性检出率0.31%(1/323)、BoNeV阳性检出率10.84%(35/323)、BNoV阳性检出率4.33%(14/323)、MRV阳性检出率2.48%(8/323)、BToV阳性检出率4.64%(15/323)、BKoV阳性检出率11.76%(38/323)。混合感染共有76份,占比23.53%(76/323)。HBLF2302株的全基因序列、S、HE、N、M和E基因进行同源性和遗传进化分析发现,HBLF2302与BCoV/NMG1/2022基因同源性最高,为GIIb亚型。基于氨基酸序列比对和HBLF2302的S蛋白三级结构预测发现,在S蛋白中157号位突变为157T,854号位点突变为854I。318V为独特突变,改变了与侧链残基的作用力,与631C形成氢键连接。并发现中国株区别于其它地区的GⅡb亚型,位于ORF1a区域有三个独特位点。本研究丰富了牛腹泻病原的流行病学数据,为牛腹泻病的防控奠定基础。; 关键词病毒性腹泻牛冠状病毒流行病学调查腹泻病原; Keywords viral diarrhea bovine coronavirus epidemiology investigation diarrhea pathogens; 分类号 S852.653 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名牛冠状病毒S1蛋白的真核表达及间接ELISA方法的建立与应用被引量：3: 3; 作者黄金李思远毛立蔡旭航谢玲玲王府周华李基棕李彬; 机构江苏省农业科学院兽医研究所南京农业大学动物医学院江苏大学生命科学学院/食品与生物工程学院贵州省种畜禽种质测定中心黔西市动物疫病预防控制中心西北农林科技大学动物医学院; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期2050-2060,共11页; 基金 “十四五”国家重点研发计划(2021YFD1801101) 贵州省种业发展项目(肉牛遗传改良与高效养殖技术研究)。; 文摘为建立一种检测牛冠状病毒(BCoV)的抗体间接ELISA检测方法,本研究利用昆虫杆状病毒表达系统表达BCoV的S1蛋白,并作为包被抗原,建立BCoV的S1蛋白抗体间接ELISA检测方法,应用于临床样品检测。结果显示,S1蛋白大小约100 ku,可表达于昆虫High5细胞培养基上清,经Western blot鉴定S1蛋白抗原性良好;经反应条件优化,确定抗原包被浓度为0.125μg·mL^(-1),血清稀释度为1∶200;采用1%明胶,于37℃封闭3 h;血清样品于37℃孵育30 min;酶标二抗的稀释度1∶25000,37℃孵育45 min;37℃避光显色13 min;临界值为0.297;经检验,该方法特异性良好;批间及批内变异系数均小于10%。当临界值为OD_(450 nm)为0.297时,若以IFA为标准,ELISA的敏感性为96.88%(31/32),特异性为87.50%(7/8),与IFA具有很强的一致性(κ=0.844,P<0.01);若以中和试验为标准,ELISA的敏感性为100.00%(31/31),特异性为88.89%(8/9),与血清中和试验具有很强的一致性(κ=0.925,P<0.01)。采用该方法对303份牛血清进行检测,BCoV阳性率为74.91%。由此说明,本研究建立的ELISA方法特异性强,敏感性高,重复性好,可用于BCoV的血清学调查和临床诊断,并可以应用于替代中和试验检测BCoV免疫后抗体水平。; 关键词牛冠状病毒昆虫杆状病毒表达系统 S1蛋白间接ELISA; Keywords bovine coronavirus insect baculovirus expression system S1 protein indirect ELISA; 分类号 S852.659.6 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名牛冠状病毒TaqMan荧光定量检测方法的建立及国内部分地区流行病学调查被引量：2: 4; 作者黄金李思远谢玲玲周迪杨蓉王松周华蔡旭航李基棕李彬; 机构江苏省农业科学院兽医研究所/农业农村部兽用生物制品工程技术重点实验室南京农业大学动物医学院江苏大学生命科学学院食品与生物工程学院贵州省种畜禽种质测定中心贵州省草地技术试验推广站黔西市动物疫病预防控制中心西北农林科技大学动物医学院; 出处《江苏农业科学》北大核心 2023年第17期29-33,共5页; 基金国家重点研发计划(编号:2021YFD1801101) 江苏省自然科学基金(编号:BK20221432)。; 文摘牛冠状病毒(BCoV)在全球广泛存在,在临床上能引起牛腹泻以及呼吸道感染,给养殖业带来巨大经济损失。为快速批量检测临床样品、分析国内的BCoV隐性感染及流行情况,根据BCoV的N基因序列设计了引物和探针,建立了TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法,对其特异性、敏感性、重复性进行评估,并将其与靶向BCoV的N基因的常规RT-PCR方法进行对比。利用本方法对采集自我国西藏、江苏、河北、贵州、安徽等5个省份的22个未发病牛场的35份口腔拭子样品和244份粪便样品进行检测以了解流行情况。结果表明,质粒标准品拷贝数的对数与C T值呈现良好稳定的负线性关系,标准曲线为y=-3.4418 x+39.5840,r^(2)=0.9994,E=98.2%;最低检测拷贝数为6.0×10拷贝/μL,重复性变异系数均<5%;对临床样品进行检测,检出率明显高于常规RT-PCR方法。对22个牛场的279份病料进行检测,结果显示BCoV的总体阳性率为73.12%,牛场阳性率为100.00%。本研究成功建立了靶向BCoV N基因、灵敏度高、特异性好的荧光定量RT-PCR检测方法,并初步掌握了我国5个省份BCoV的流行现状,为后续BCoV研究奠定了基础。; 关键词牛冠状病毒 TaqMan荧光定量样品检测隐性感染 RT-PCR; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	TGEV SHXB株组织毒对1月龄仔猪的致病性研究	肖丽张宝太蔡旭航李思远朱雪蛟郭荣利查银河舒建洪主性李基棕李彬	《中国动物传染病学报》北大核心	2025	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	河北省廊坊市牛主要病毒性腹泻病原感染状况检测及牛冠状病毒演化分析	李思远付新成袁雪松毛立蔡旭航孙心如黄金谢玲玲王府周华张琪李基棕李彬	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2024	4	在线阅读下载PDF 职称材料
3	牛冠状病毒S1蛋白的真核表达及间接ELISA方法的建立与应用	黄金李思远毛立蔡旭航谢玲玲王府周华李基棕李彬	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2024	3	在线阅读下载PDF 职称材料
4	牛冠状病毒TaqMan荧光定量检测方法的建立及国内部分地区流行病学调查	黄金李思远谢玲玲周迪杨蓉王松周华蔡旭航李基棕李彬	《江苏农业科学》北大核心	2023	2	在线阅读下载PDF 职称材料