miR-1调控胃癌细胞SGC-7901迁移能力的实验研究 被引量：3

1

作者 杨欢 付海龙 +4 位作者 毛佳慧 李霞 王梅 钱晖 许文荣 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2016年第3期178-181,共4页

目的探讨微小RNA-1(miR-1)对胃癌细胞系SGC-7901迁移能力的调控作用。方法脂质体转染寡核苷酸片段NCmimics及miR-1-mimics、NC-inhibitor及miR-1-inhibitor至SGC-7901细胞,定量RT-PCR检测转染后SGC-7901细胞中miR-1的表达水平,Transwel... 目的探讨微小RNA-1(miR-1)对胃癌细胞系SGC-7901迁移能力的调控作用。方法脂质体转染寡核苷酸片段NCmimics及miR-1-mimics、NC-inhibitor及miR-1-inhibitor至SGC-7901细胞,定量RT-PCR检测转染后SGC-7901细胞中miR-1的表达水平,Transwell实验观察转染后细胞迁移能力,western blot检测转染后细胞上皮间质转化(EMT)指标。结果miR-1-mimics转染组miR-1的表达水平(900.10±240.40)明显高于NC-mimics转染组(1.01±0.18),差异有统计学意义(t=6.48,P<0.01)。miR-1-inhibitor转染组miR-1的表达水平(0.65±0.04)明显低于NC-inhibitor转染组(1.01±0.14),差异具有统计学意义(t=4.19,P<0.05)。miR-1-mimics转染组迁移细胞数量[(362±10)个]明显高于NC-mimics转染组[(112±10)个],差异有统计学意义(t=21.65,P<0.01)。miR-1-inhibitor转染组迁移细胞数量[(64±8)个]明显低于NC-inhibitor转染组[(133±14)个],差异有统计学意义(t=17.07,P<0.01)。与NC-mimics转染组比较,miR-1-mimics转染组上皮细胞钙粘蛋白(E-cadherin)表达减弱(t=19.28,P<0.01),神经钙粘蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)表达增强(t=5.43,P<0.01;t=23.14,P<0.01);与NC-inhibitor转染组比较,miR-1-inhibitor转染组E-cadherin表达增强(t=6.14,P<0.01),N-cadherin和Vimentin表达减弱(t=6.78,P<0.01;t=7.94,P<0.01)。结论 miR-1过表达可促进胃癌细胞的迁移;miR-1低表达能可抑制胃癌细胞的迁移;miR-1可能通过EMT转化增强胃癌细胞的迁移能力。 展开更多

关键词 微小RNA-1 胃癌 迁移 上皮间质转化

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胃癌外体(exosome)内miRNA-1的检测分析 被引量：9

2

作者 付海龙 杨欢 +4 位作者 毛佳慧 李霞 王梅 钱晖 许文荣 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2016年第2期103-106,共4页

目的检测胃癌细胞系来源外体（exosome）及其胃癌组织和血清中exosome内miRNA-1的表达水平并分析其临床意义。方法采用实时荧光定量RT-PCR分别检测胃癌细胞系来源exosome、胃癌患者组织及血清exosome内miRNA-1的表达水平,分析其与临床... 目的检测胃癌细胞系来源外体（exosome）及其胃癌组织和血清中exosome内miRNA-1的表达水平并分析其临床意义。方法采用实时荧光定量RT-PCR分别检测胃癌细胞系来源exosome、胃癌患者组织及血清exosome内miRNA-1的表达水平,分析其与临床资料相关性,并绘制ROC曲线进行效能分析。结果 miRNA-1在人胃癌细胞系MGC-803（6.51±0.41）和SGC-7901（14.81±1.30）中的含量明显高于胃上皮细胞系GES-1（1.05±0.25）,差异有统计学意义（t分别为11.26、10.38,P均〈0.01）;而MGC-803、SGC-7901细胞培养上清exosome内miRNA-1的表达水平（49.98±11.77和28.68±4.66）显著高于GES-1来源exosome（1.00±0.02）差异有统计学意义（t分别为4.162、5.942,P均〈0.01）;25对胃癌组织标本中有18例癌组织miRNA-1表达上调,7例表达下调,胃癌组织[1.110（0.070,4.307）]平均表达水平高于癌旁组织[1.149（1.110,2.075）],差异有统计学意义（Z=-1.897,P〈0.05）。miRNA-1在胃癌患者血清exosome内的表达水平[4.130（0.151,12.720）]较体检健康者血清exosome内表达水平[0.704（0.077,7.243）]明显增高（Z=-2.407,P〈0.05）,且与胃癌的淋巴结转移相关;胃癌患者血清exosome内miRNA-1的ROC曲线下面积（AUC^ROC）为0.723 0,95%可信区间（CI）为0.627 0～0.818 7,cut off值为2.39,敏感性为66%,特异性为68%。结论胃癌组织及其胃癌患者血清来源exosome内富含miRNA-1,有望成为新的胃癌诊断标志物。 展开更多

关键词 胃癌 外体 微小RNA-1 血清

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胃癌患者血清外泌体中DANCR表达及其临床意义 被引量：8

3

作者 李阳 潘磊 +6 位作者 梁炜 张鹏 钱晖 许文荣 张志坚 蒋鹏程 张徐 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2017年第3期171-174,共4页

目的检测胃癌患者血清外泌体(exosome)中抗分化非编码RNA(DANCR)的表达水平并分析其临床应用价值。方法采用实时荧光定量RT-PCR检测胃癌细胞培养上清和胃癌患者血清exosome中DANCR表达水平,分析其与临床病理资料的相关性,绘制ROC曲线评... 目的检测胃癌患者血清外泌体(exosome)中抗分化非编码RNA(DANCR)的表达水平并分析其临床应用价值。方法采用实时荧光定量RT-PCR检测胃癌细胞培养上清和胃癌患者血清exosome中DANCR表达水平,分析其与临床病理资料的相关性,绘制ROC曲线评价其诊断效能。结果 DANCR在人胃癌细胞系HGC-27中表达水平(4.43±0.37)明显高于胃黏膜上皮细胞(1.01±0.01),差异有统计学意义(P<0.05)。HGC-27细胞培养上清exosome中DANCR表达水平(3.06±0.14)明显高于GES-1细胞(1.01±0.20),差异有统计学意义(P<0.05)。DANCR在胃癌患者血清exosome中的平均含量[5.060(1.380,22.785)]较胃良性疾病患者[0.535(0.340,1.380)]和体检健康者[1.200(0.605,1.655)]明显升高(Z分别为-3.409,-4.229,P均<0.01),且与肿瘤大小、TNM分期以及淋巴结转移相关。胃良性疾病患者与体检健康者相比,血清exosome中DANCR含量差异无统计学意义(Z=-1.308,P>0.05)。胃癌患者血清exosome中DANCR的ROC曲线下面积(AUCROC)为0.777,95%可信区间(CI)为0.678~0.876,cut-off值2.50,敏感性为68.6%,特异性为84.4%。结论胃癌患者血清exosome中DANCR表达水平升高,有望成为胃癌诊断的新指标。 展开更多

关键词 胃癌 外泌体 抗分化非编码RNA 血清

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长链非编码RNA在乳腺癌中的研究进展 被引量：6

4

作者 张徐 王梦瑶 +3 位作者 徐捡 王勇 钱晖 许文荣 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2015年第6期454-456,共3页

研究发现长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)表达异常与乳腺癌发生、发展和转移密切相关。深入研究LncRNA在乳腺癌中的作用及机制有望为乳腺癌诊断和治疗提供新的分子靶点。本文就LncRNA在乳腺癌中的作用、机制和潜在临床应用... 研究发现长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)表达异常与乳腺癌发生、发展和转移密切相关。深入研究LncRNA在乳腺癌中的作用及机制有望为乳腺癌诊断和治疗提供新的分子靶点。本文就LncRNA在乳腺癌中的作用、机制和潜在临床应用价值作一综述。 展开更多

关键词 长链非编码RNA 乳腺癌 分子标志物

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血清外体内fibulin-1检测在胃癌诊断中的应用 被引量：3

5

作者 杨欢 付海龙 +4 位作者 毛佳慧 李霞 王梅 钱晖 许文荣 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2016年第2期107-109,共3页

目的评价血清外体（exosome）内fibulin-1蛋白分子在胃癌诊断中的临床应用价值。方法 Exosome沉淀法提取胃癌细胞及胃上皮细胞上清、胃癌患者及体检健康人血清exosome;western blot、ELISA法检测exosome内fibulin-1蛋白的表达水平,绘制... 目的评价血清外体（exosome）内fibulin-1蛋白分子在胃癌诊断中的临床应用价值。方法 Exosome沉淀法提取胃癌细胞及胃上皮细胞上清、胃癌患者及体检健康人血清exosome;western blot、ELISA法检测exosome内fibulin-1蛋白的表达水平,绘制ROC曲线并进行诊断效能分析。结果胃癌细胞及其上清exosome内fibulin-1表达水平显著低于胃上皮细胞及其上清exosome;胃癌患者血清exosome内fibulin-1的表达水平（31.94±16.92）μg/mL明显低于体检健康者（47.16±17.27）μg/mL（P=0.045）;胃癌患者血清exosome内fibulin-1的ROC曲线下面积（AUC^ROC）是0.727 5,95%可信区间（CI）为0.569 4～0.885 6,cut off值为43.19μg/mL,敏感性为70%,特异性为75%。结论血清exosome内fibulin-1分子有望作为胃癌诊断的潜在新型分子标志物。 展开更多

关键词 胃癌 外体 fibulin-1 诊断

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外泌体内分子标志物检测及其临床应用 被引量：11

6

作者 许文荣 孙瑶湘 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2017年第3期161-164,共4页

外泌体(exosome)是一类可由多种细胞分泌并包裹了蛋白质、mRNA、微小RNA(microRNA)、非编码RNA(lncRNA)、DNA、脂质等物质的膜性囊泡,研究发现exosome在细胞间通讯、肿瘤免疫、肿瘤治疗、组织损伤修复、疾病诊断中具有重要的意义。对不... 外泌体(exosome)是一类可由多种细胞分泌并包裹了蛋白质、mRNA、微小RNA(microRNA)、非编码RNA(lncRNA)、DNA、脂质等物质的膜性囊泡,研究发现exosome在细胞间通讯、肿瘤免疫、肿瘤治疗、组织损伤修复、疾病诊断中具有重要的意义。对不同来源的exosome携带的内容物进行分析并筛选其特异性的分子标志物,将为相关疾病的诊断及其发生发展的研究提供非常重要的帮助。Exosome可以在血液、尿液、唾液、胸腹水、乳汁、脑脊液、肺泡灌洗液等体液中被检出。随着exosome分离和分析检测技术的发展,越来越多分子标志物被发现,exosome内分子标志物有望为恶性疾病的早期诊断、预后判断提供新的依据。 展开更多

关键词 外泌体 分子标志物 诊断

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MicroRNAs与肾相关疾病诊断的研究进展

7

作者 祝源 张娇 +4 位作者 俞静 贾浩源 尹磊 许文荣 钱晖 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2015年第10期782-784,共3页

肾脏代偿功能强大,肾相关疾病早期症状不明显,易延误治疗契机导致肾脏不可逆性病变,严重影响人类生存和生活质量。微小RNAs(microRNAs,miRNAs)在机体的生长发育中必不可少,研究表明,miRNAs在疾病的发生、发展以及预后中发挥着重要作用... 肾脏代偿功能强大,肾相关疾病早期症状不明显,易延误治疗契机导致肾脏不可逆性病变,严重影响人类生存和生活质量。微小RNAs(microRNAs,miRNAs)在机体的生长发育中必不可少,研究表明,miRNAs在疾病的发生、发展以及预后中发挥着重要作用。本文就近年来miRNAs在肾相关疾病早期诊断和预后评价中的研究进展作一综述。 展开更多

关键词 微小RNA 肾病 诊断

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低浓度5-氟尿嘧啶对胃癌细胞生物学特性的影响

8

作者 付海龙 杨欢 +4 位作者 毛佳慧 李霞 王梅 钱晖 许文荣 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2016年第3期182-185,共4页

目的探讨低浓度5-氟尿嘧啶(5-FU)对胃癌细胞转录因子OCT4、SOX2及细胞增殖能力的影响。方法用MTT法检测并确定5-FU对胃癌细胞系MGC803、SGC-7901的半数抑制浓度(IC50),实时荧光定量PCR及western blot检测经不同浓度的5-FU处理后胃癌细... 目的探讨低浓度5-氟尿嘧啶(5-FU)对胃癌细胞转录因子OCT4、SOX2及细胞增殖能力的影响。方法用MTT法检测并确定5-FU对胃癌细胞系MGC803、SGC-7901的半数抑制浓度(IC50),实时荧光定量PCR及western blot检测经不同浓度的5-FU处理后胃癌细胞转录因子OCT4、SOX2表达水平,平板克隆形成实验分析胃癌细胞增殖能力的改变情况。结果5-FU对MGC803、SGC-7901细胞的IC50分别为(28.82±1.25)和(23.95±1.34);低浓度5-FU(0.5、1μmol/L)处理后,胃癌细胞MGC803、SGC-7901中转录因子OCT4、SOX2在mRNA及蛋白质水平中的表达均增强,差异具有统计学意义(P<0.05);平板克隆形成实验结果表明,经低浓度5-FU(0.5、1μmol/L)作用后胃癌细胞的增殖能力变强,形成的克隆数增多,差异有统计学意义(P<0.05);但5-FU浓度为2μmol/L时OCT4和SOX4的表达有不同程度的减弱,且克隆形成能力也有下降。结论低浓度5-FU能增强胃癌细胞转录因子表达、促进胃癌细胞增殖。 展开更多

关键词 胃癌细胞 5-氟尿嘧啶 低浓度 转录因子

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miR-29a在乳腺癌组织中的表达及其对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响 被引量：4

9

作者 刘奎 孔繁九 +4 位作者 杜善梅 李倩 张春福 陶泽华 孙晓春 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2015年第11期818-822,共5页

目的检测miR-29a在乳腺癌组织中的表达水平并探讨其对人乳腺癌细胞增殖和迁移的影响。方法用荧光定量RTPCR检测乳腺癌组织及癌旁组织中miR-29a的表达水平;用脂质体法将miR-29amimic及miR-29a inhibitor分别转染乳腺癌细胞系MDA-MB-231,... 目的检测miR-29a在乳腺癌组织中的表达水平并探讨其对人乳腺癌细胞增殖和迁移的影响。方法用荧光定量RTPCR检测乳腺癌组织及癌旁组织中miR-29a的表达水平;用脂质体法将miR-29amimic及miR-29a inhibitor分别转染乳腺癌细胞系MDA-MB-231,通过MTT实验和Transwell实验观察miR-29a对MDA-MB-231细胞增殖和迁移能力的影响;miRanda软件预测miR-29a的靶基因,westernblot验证其表达结果。结果荧光定量RT-PCR检测结果表明,与癌旁组织(2.17±0.89)比较,miR-29a在乳腺癌组织(5.65±1.45)中的表达水平上调(t=3.94,P<0.01);MTT实验和Transwell实验结果显示,与mimics阴性对照组[(106.36±5.15)%,(216.70±7.20)个]相比,miR-29amimics组[(133.32±6.31)%,(294.30±8.60)个]乳腺癌细胞的增殖和迁移能力增加(t分别为3.36和6.85,P均<0.01);与inhibitor阴性对照组[(105.35±3.42)%,(240.30±9.50)个]相比,miR-29a inhibitor组[(66.63±3.82)%,(156.30±7.80)个]乳腺癌细胞的增殖和迁移能力降低(t分别为8.18和6.81,P均<0.01)。miRanda软件预测人第10号染色体缺失的同源性磷酸酶-张力蛋白基因(PTEN)可能为miR-29a的靶基因。western blot结果显示,与mimics阴性对照组(0.55±0.01)相比,乳腺癌细胞转染miR-29amimic后,其PTEN蛋白质的表达水平(0.22±0.01)下调(t=14.29,P<0.01);与inhibitor阴性对照组(0.49±0.02)相比,转染miR-29a inhibitor后,PTEN蛋白质的表达水平(1.25±0.02)上调(t=19.39,P<0.01)。结论miR-29a在乳腺癌组织中的表达水平增高,并可能通过下调PTEN蛋白的表达促进乳腺癌细胞的增殖和转移。 展开更多

关键词 miR-29a 乳腺癌 增殖 迁移 PTEN蛋白

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胃癌患者血清LINC00978表达及其临床意义 被引量：3

10

作者 黄振华 梁炜 +6 位作者 潘磊 张鹏 付敏 钱晖 许文荣 蒋鹏程 张徐 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2017年第8期575-578,共4页

目的检测胃癌患者血清中LINC00978表达水平,评估其表达水平与临床病理参数的关系,并探讨其临床诊断价值。方法实时荧光定量RT-PCR检测LINC00978在胃癌细胞、体检健康者、胃良性疾病及胃癌患者血清中的表达水平,分析其与胃癌患者临床病... 目的检测胃癌患者血清中LINC00978表达水平,评估其表达水平与临床病理参数的关系,并探讨其临床诊断价值。方法实时荧光定量RT-PCR检测LINC00978在胃癌细胞、体检健康者、胃良性疾病及胃癌患者血清中的表达水平,分析其与胃癌患者临床病理参数的相关性,并用ROC曲线分析其诊断效能。结果 LINC00978在人胃癌细胞系MGC-803中的表达水平(18.88±1.15)明显高于胃黏膜上皮细胞(1.00±0.03),差异有统计学意义(t=-21.926,P<0.05)。LINC00978在胃癌患者血清中的平均含量[3.525(1.385,8.954)]较胃良性疾病患者[0.419(0.258,1.369)]和体检健康者[0.814(0.351,2.510)]均明显升高(Z值分别为-4.834和-4.686;P均<0.01),且与淋巴结转移、浸润深度和TNM分期相关(r分别为0.448、0.369和0.383,P均<0.01);胃癌患者术后血清中LINC00978的表达水平[0.17(0.15,0.39)]较术前[0.98(0.59,1.61)]明显降低(Z=-5.731,P<0.01)。与体检健康者相比,LINC00978在胃良性疾病患者血清中表达差异无统计学意义(Z=-1.693,P>0.05)。胃癌患者血清LINC00978的ROC曲线下面积(AUCROC)为0.807,95%可信区间(CI)为0.723~0.882,当cut-off值为1.806时,其诊断胃癌的敏感性为71.4%,特异性为75.9%。结论 LINC00978在胃癌患者血清中呈高表达,且与淋巴结转移、浸润深度和TNM分期相关,有望成为潜在的胃癌诊断的生物学标志物。 展开更多

关键词 胃癌 LINC00978 血清 生物学标志物

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胃癌间充质干细胞高表达G6PD促进肿瘤细胞迁移 被引量：1

11

作者 黄霞 陈斌 +4 位作者 黄超 韩志强 陈志红 许文荣 朱伟 《临床检验杂志》 CAS 2020年第12期936-942,共7页

目的探究胃癌间充质干细胞(gastric cancer mesenchymal stem cells,GCMSCs)葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)的表达及其在肿瘤细胞迁移中的作用。方法采用western blot检测G6PD在GCMSCs、骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell... 目的探究胃癌间充质干细胞(gastric cancer mesenchymal stem cells,GCMSCs)葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)的表达及其在肿瘤细胞迁移中的作用。方法采用western blot检测G6PD在GCMSCs、骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSCs)和胃癌细胞来源外泌体(exosome)预处理BMMSCs中的表达水平。生化分析仪检测MSCs中G6PD的活性。活性氧(ROS)探针检测MSCs中ROS的表达水平。台盼蓝染色法检测细胞存活率。细胞迁移试验检测G6PD对MSCs和胃癌细胞迁移的影响。使用CCK-8试剂盒检测MSCs增殖能力。结果GCMSCs中G6PD的表达量及活性较BMMSCs明显升高(t分别为7.497、11.75,P<0.01),且GCMSCs促进胃癌细胞迁移能力较BMMSCs明显增强(P<0.05)。胃癌细胞来源的exosome通过调节P53,上调BMMSCs中G6PD的表达水平(P<0.01)。G6PD可清除MSCs细胞内活性氧,维持MSCs在低胎牛血清(t=11.29,P<0.01)或H2O2(t=3.444,P<0.05)的条件下存活,并促进MSCs增殖和迁移(P<0.01)。胃癌患者肿瘤基质细胞G6PD的表达与胃癌组织大小及转移有关(P<0.05)。结论GCMSCs通过高表达G6PD促进胃癌细胞迁移。肿瘤基质G6PD有望成为肿瘤诊断和预后监测的潜在标志物。 展开更多

关键词 间充质干细胞 胃癌 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 外泌体 迁移

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长链非编码RNA ZFAS1在非小细胞肺癌患者组织中表达及作用 被引量：4

12

作者 张徐 臧雪燕 +6 位作者 顾建美 张鹏 梁炜 陈京燕 潘磊 钱晖 许文荣 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2017年第11期813-817,848,共6页

目的检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者癌组织中锌指结构反义转录本1(zinc finger antisense 1,ZFAS1)表达水平,探讨ZFAS1在NSCLC进展中的生物学作用。方法实时荧光定量RT-PCR检测ZFAS1在NSCLC患者癌组织和癌旁组织中的表达水平。RNA干扰ZFAS... 目的检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者癌组织中锌指结构反义转录本1(zinc finger antisense 1,ZFAS1)表达水平,探讨ZFAS1在NSCLC进展中的生物学作用。方法实时荧光定量RT-PCR检测ZFAS1在NSCLC患者癌组织和癌旁组织中的表达水平。RNA干扰ZFAS1在A549细胞中表达,细胞计数和克隆形成实验检测细胞增殖情况,流式分析检测细胞周期和细胞凋亡,Transwell迁移和基质胶侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力,实时荧光定量RT-PCR检测Cyclin D1、Bcl2、N-cadherin、ZEB1、Slug和Twist基因表达水平变化。结果 ZFAS1在NSCLC患者癌组织中的平均表达水平[0.01(0.002,0.054)]较癌旁组织[0.002(0.001,0.012)]明显升高(Z=-2.638,P<0.01)。ZFAS1基因敲减后,A549细胞增殖能力明显减弱(P<0.01);A549细胞周期G1期比例升高,S期比例下降(P<0.01);A549细胞凋亡比例明显增加(P<0.01);A549细胞迁移和侵袭能力明显下降(P均<0.01);A549细胞中Cyclin D1、Bcl2、N-cadherin、ZEB1、Slug和Twist基因表达水平均降低(P均<0.05)。结论 ZFAS1在NSCLC患者癌组织中呈高表达。ZFAS1基因敲减诱导细胞周期阻滞、凋亡和抑制上皮-间质转变(EMT),减弱NSCLC细胞增殖、迁移和侵袭能力。 展开更多

关键词 锌指结构反义转录本1 长链非编码RNA 非小细胞肺癌 上皮-间质转变

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环状RNA hsa_circ_002059在胃癌患者组织与循环血液中的表达及意义 被引量：1

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作者 李荣 江佳佳 +1 位作者 钱晖 许文荣 《临床检验杂志》 CAS 2021年第9期650-655,共6页

目的建立胃癌患者癌组织、血浆和血浆外泌体中hsa_circ_002059表达的检测方法,探讨其在胃癌组织与循环血液中表达的临床应用价值。方法应用circ2Traits和starBase v2.0数据库预测胃癌相关环状RNA hsa_circ_002059的表达;实时荧光定量RT-... 目的建立胃癌患者癌组织、血浆和血浆外泌体中hsa_circ_002059表达的检测方法,探讨其在胃癌组织与循环血液中表达的临床应用价值。方法应用circ2Traits和starBase v2.0数据库预测胃癌相关环状RNA hsa_circ_002059的表达;实时荧光定量RT-PCR检测配对的胃癌组织与癌旁组织(87例)、胃癌患者和体检健康者血浆(52例)及外泌体(62例)样本中hsa_circ_002059表达水平的差异,并分析与临床病理参数的相关性;ROC曲线和生存曲线分析评价其在胃癌诊断与预后评估中的临床价值。结果hsa_circ_002059具有多个胃癌相关miRNA结合位点,在胃癌组织中的表达水平显著低于癌旁组织(U=1759.0,P<0.001),且与肿瘤大小有关(χ^(2)=6.183,P=0.013)。组织hsa_circ_002059筛查胃癌的ROC曲线下面积(AUCROC)为0.768,敏感性和特异性分别为0.67和0.92。在胃癌患者血浆中hsa_circ_002059的表达水平明显高于体检健康者(U=1011.5,P=0.027),且与淋巴结转移有关(χ^(2)=12.231,P=0.005)。血浆hsa_circ_002059筛查胃癌的AUCROC为0.626,敏感性和特异性分别为0.65和0.64。此外,hsa_circ_002059高表达患者的平均生存时间显著低于低表达者(χ^(2)=4.594,P=0.032),在胃癌患者血浆外泌体中hsa_circ_002059的表达水平与体检健康者之间的差异无统计学意义(U=1746.0,P=0.379)。结论hsa_circ_002059表达与胃癌进展有关,其在组织和血浆中表达水平的检测有望用于胃癌辅助诊断与预后评估。 展开更多

关键词 实时荧光定量RT-PCR 环状RNA hsa_circ_002059 胃癌

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LINC00978在非小细胞肺癌中的临床价值和生物学作用 被引量：3

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作者 胡妍 丁小鸽 +10 位作者 顾建美 侯思南 陈妍珂 臧雪燕 张佳音 张宇 邵孟 茅浙英 钱晖 许文荣 张徐 《临床检验杂志》 CAS 2019年第8期596-602,共7页

目的 探究长链非编码RNA(long non-coding RNA, lncRNA)LINC00978 在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)中的表达变化及生物学功能,并初步探讨其作用机制。方法 采用qRT-PCR检测NSCLC患者肿瘤组织与血清中LINC00978的表... 目的 探究长链非编码RNA(long non-coding RNA, lncRNA)LINC00978 在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)中的表达变化及生物学功能,并初步探讨其作用机制。方法 采用qRT-PCR检测NSCLC患者肿瘤组织与血清中LINC00978的表达水平。通过CCK-8、平板克隆、Transwell迁移和侵袭实验观察LINC00978敲减和过表达对A549细胞生物学功能的影响。采用流式细胞术、qRT-PCR和western blot探究LINC00978的作用机制。结果 LINC00978在NSCLC患者肿瘤组织( t =2.465, P <0.05)和血清( t =8.781, P <0.01)中呈高表达。LINC00978敲减抑制A549细胞增殖、迁移和侵袭能力( P 均<0.01 ),诱导G 1期阻滞以及细胞凋亡( P 均<0.01)。LINC00978敲减下调Cyclin D1和Bcl-2的表达而上调Bax的表达( P 均< 0.05 )。此外,LINC00978敲减抑制N-cadherin、Vimentin、Snail、Slug和Twist的表达而促进E-cadherin的表达( P 均<0.05)。LINC00978过表达则具有相反作用。结论 LINC00978在NSCLC中高表达,并促进NSCLC发生、发展,具有成为NSCLC诊断及治疗新靶点的潜能。 展开更多

关键词 长链非编码RNA 非小细胞肺癌 LINC00978 上皮-间质转化

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LncSox4在非小细胞肺癌中的表达及生物学作用 被引量：2

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作者 侯思南 陈妍珂 +5 位作者 顾建美 丁小鸽 张佳音 钱晖 许文荣 张徐 《临床检验杂志》 CAS 2019年第10期731-736,共6页

目的检测LncSox4在人非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达水平变化,初步探讨其生物学作用及机制,为NSCLC诊断和治疗提供新的生物指标。方法采用qRT-PCR检测LncSox4在NSCLC患者肿瘤组织中的表达水平。通过克隆形成试验、生长曲线分析、Transwel... 目的检测LncSox4在人非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达水平变化,初步探讨其生物学作用及机制,为NSCLC诊断和治疗提供新的生物指标。方法采用qRT-PCR检测LncSox4在NSCLC患者肿瘤组织中的表达水平。通过克隆形成试验、生长曲线分析、Transwell迁移和侵袭试验检测敲除LncSox4对A549细胞生物学功能的影响;采用流式细胞术分析细胞周期情况;采用qRT-PCR和western blot检测上皮-间质转化(EMT)相关基因及蛋白质的表达水平。结果与癌旁对照相比,LncSox4在NSCLC癌组织中呈显著高表达(t=7.109,P<0.01);LncSox4基因沉默后,A549细胞生长速度减缓,细胞克隆形成数量减少(P<0.01),细胞迁移和侵袭能力降低(P<0.01),诱导细胞发生G 1期阻滞(P<0.01);LncSox4基因沉默抑制A549细胞中Cyclin D1、c-Myc、N-cadherin、Vimentin蛋白的表达,促进E-cadherin蛋白的表达;LncSox4基因沉默还显著降低EMT相关转录因子Snail、Slug和Twist的表达水平。结论LncSox4在NSCLC中高表达,通过影响细胞增殖、迁移和侵袭促进NSCLC恶性进展,有望成为NSCLC诊疗新靶点。 展开更多

关键词 长链非编码RNA 非小细胞肺癌 LncSox4 上皮-间质转化

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circRNA在胃癌中的研究进展 被引量：5

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作者 李铄 王茂叶 +3 位作者 臧雪燕 蒋鹏程 许文荣 张徐 《临床检验杂志》 CAS 2021年第3期213-217,共5页

环状RNA(circular RNA,circRNA)特异性表达与胃癌发生、发展有密切关系,通过深入研究circRNA在胃癌中的作用机制,有望为早期胃癌的无创诊断及预后提供新的潜在检测标志物。该文就circRNA的生物学作用、检测方法、以及其在胃癌中的作用... 环状RNA(circular RNA,circRNA)特异性表达与胃癌发生、发展有密切关系,通过深入研究circRNA在胃癌中的作用机制,有望为早期胃癌的无创诊断及预后提供新的潜在检测标志物。该文就circRNA的生物学作用、检测方法、以及其在胃癌中的作用机制、诊断和预后等方面的研究进展作一综述。 展开更多

关键词 环状RNA 胃癌 循环标志物 外泌体 诊断

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胃癌组织标本中lncRNA RN7SK的表达及其筛查价值 被引量：2

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作者 李霞 梁照锋 +3 位作者 毛佳慧 王蓉蓉 钱晖 许文荣 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2018年第5期342-344,共3页

目的检测胃癌组织中长链非编码RNA(lnc RNA)RN7SK表达水平,并探讨其在临床筛查中的价值。方法 q RT-PCR检测lnc RNA RN7SK在胃癌细胞、胃癌组织中的表达水平;绘制ROC曲线,分析其用于筛查胃癌的效能。结果 lnc RNA RN7SK在人胃癌细胞系SG... 目的检测胃癌组织中长链非编码RNA(lnc RNA)RN7SK表达水平,并探讨其在临床筛查中的价值。方法 q RT-PCR检测lnc RNA RN7SK在胃癌细胞、胃癌组织中的表达水平;绘制ROC曲线,分析其用于筛查胃癌的效能。结果 lnc RNA RN7SK在人胃癌细胞系SGC-7901(3.91±0.53)、MGC-803(3.44±0.29)、HGC-27(4.04±0.87)和BGC-823(4.30±1.13)中的表达水平明显高于人胃粘膜上皮细胞系GES-1(1.02±0.27),差异具有统计学意义(t分别为12.33、7.48、7.20、4.90,P<0.05)。lnc RNA RN7SK在55例胃癌组织中有47例(85.5%)表达上调,8例(14.5%)表达下降。lnc RNA RN7SK筛查胃癌患者的ROC曲线下面积(AUCROC)为0.827,95%可信区间(CI)为0.746~0.907,当cut-off值为0.618时,敏感性为0.836,特异性为0.782。结论 lnc RNA RN7SK在胃癌组织中高表达,且具有较高的筛查效能,可作为潜在的胃癌诊断分子标志物。 展开更多

关键词 胃癌 长链非编码RNA RN7SK 组织 临床诊断

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长链非编码RNA LINC00473对人胃癌细胞增殖和迁移能力的影响 被引量：1

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作者 朱虹 张玮 +2 位作者 刘国倩 孟红霞 邵世和 《临床检验杂志》 CAS 2019年第5期383-388,共6页

目的探讨LINC00473在人胃癌细胞系中的表达水平及其对胃癌细胞生物学行为的影响。方法采用实时荧光定量PCR检测胃癌细胞中LINC00473的表达水平;转染靶向LINC00473的siRNA片段或LINC00473过表达载体以构建敲减或过表达的胃癌细胞系;通过C... 目的探讨LINC00473在人胃癌细胞系中的表达水平及其对胃癌细胞生物学行为的影响。方法采用实时荧光定量PCR检测胃癌细胞中LINC00473的表达水平;转染靶向LINC00473的siRNA片段或LINC00473过表达载体以构建敲减或过表达的胃癌细胞系;通过CCK-8细胞增殖实验、平板克隆形成实验、Transwell迁移实验、western blot实验检测细胞的增殖和迁移能力以及EMT相关蛋白标志物表达水平的变化。结果与GES-1细胞相比,LINC00473在胃癌细胞中的表达水平明显降低(P<0.05)。与siNC转染对照组相比,敲减LINC00473表达后,靶细胞的增殖能力(F=163.10,P<0.01)、克隆形成(t=3.29,P<0.05)和迁移能力(t=4.68,P<0.05)明显增加;E-cadherin表达减弱(t=4.08,P<0.05),N-cadherin(t=5.06,P<0.01)、Snail(t=7.69,P<0.01)和Vimentin(t=3.82,P<0.05)蛋白的表达水平升高。与Vector转染对照组相比,上调LINC00473表达后靶细胞的增殖能力(F=186.00,P<0.01)、克隆形成(t=3.22,P<0.05)和迁移能力(t=5.52,P<0.01)明显下降;E-cadherin表达升高(t=2.90,P<0.05),N-cadherin(t=7.44,P<0.01)、Snail(t=2.78,P<0.05)和Vimentin(t=4.64,P<0.01)蛋白的表达水平降低。结论敲减LINC00473的表达可促进胃癌细胞的增殖、迁移的能力,可能通过调控EMT参与胃癌细胞的迁移。 展开更多

关键词 胃癌 长链非编码RNA LINC00473 增殖 迁移

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幽门螺杆菌virD4基因的克隆表达及其功能初探

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作者 朱虹 杨洋 +3 位作者 樊书 栾瑄 孟红霞 邵世和 《临床检验杂志》 CAS 2019年第7期539-545,共7页

目的研究幽门螺杆菌SBK临床分离株virD4的功能。方法通过T-A克隆获得virD4基因片段;构建pET-28a(+)-virD4原核表达载体,转化入Rosetta工程菌,IPTG诱导表达;KCl染色切胶纯化法获得重组蛋白质,SDS-PAGE法分析鉴定重组蛋白质;纯化的重组蛋... 目的研究幽门螺杆菌SBK临床分离株virD4的功能。方法通过T-A克隆获得virD4基因片段;构建pET-28a(+)-virD4原核表达载体,转化入Rosetta工程菌,IPTG诱导表达;KCl染色切胶纯化法获得重组蛋白质,SDS-PAGE法分析鉴定重组蛋白质;纯化的重组蛋白质免疫小鼠,获得多克隆抗体,ELISA法检测效价,western blot法分析抗原反应特异性;重组蛋白质与GES-1细胞共培养,检测其对细胞炎症因子的表达及细胞增殖的影响。结果 virD4基因全长为1 728 bp,序列与Shi470菌株的virD4基因同源性较高;成功构建原核表达载体,经诱导及纯化获得相对分子质量为63 000的重组蛋白质;成功免疫小鼠制备多克隆抗体,效价为512 000,抗原抗体反应具有特异性;virD4能诱导GES-1细胞分泌炎症因子和增殖。结论成功克隆并表达virD4基因,制备多克隆抗体,其重组蛋白质能诱导细胞因子分泌及细胞增殖。 展开更多

关键词 幽门螺杆菌 virD4 tfs3编码Ⅳ型分泌系统 原核表达 重组蛋白质

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