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神经生长因子受体TrkA在新生鼠、幼鼠及成鼠脊髓表达差异的研究 被引量:5
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作者 王永忠 张志坚 +2 位作者 刘锦波 姜平 查小英 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期361-362,T075,共3页
为了探讨神经生长因子 ( NGF)受体 Trk A在新生鼠、幼鼠及成鼠脊髓的分布状况、进而分析 NGF的作用机制 ,用免疫组化技术检测了新生鼠、幼鼠及成鼠脊髓 NGF受体 Trk A的表达。结果显示 ,新生鼠脊髓前角运动神经元只有胞核 Trk A表达明... 为了探讨神经生长因子 ( NGF)受体 Trk A在新生鼠、幼鼠及成鼠脊髓的分布状况、进而分析 NGF的作用机制 ,用免疫组化技术检测了新生鼠、幼鼠及成鼠脊髓 NGF受体 Trk A的表达。结果显示 ,新生鼠脊髓前角运动神经元只有胞核 Trk A表达明显 ,胞浆及胞膜无表达 ,中间带、背角均无表达。幼鼠前角运动神经元胞浆 Trk A表达明显 ,胞核少量表达 ,胞膜无表达 ;部分中间带、背角神经元胞浆有表达。成鼠前角运动神经元胞浆及部分胞膜都有 Trk A表达 ,胞核无表达 ,中间带、背角神经元胞浆以及胶质细胞也明显表达。推论 ,新生鼠时胞核中 Trk A可与配体结合引起神经元的生物效应 ;成鼠 Trk 展开更多
关键词 神经生长因子受体TrkA 新生鼠 幼鼠 成鼠 脊髓 表达差异
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大鼠脊髓损伤后NGF及其受体TrkA在运动神经元及神经胶质细胞表达的变化 被引量:6
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作者 姜 平 张志坚 +4 位作者 刘锦波 李君荣 任春兰 许 燕 钱雷敏 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期573-578,共6页
为探讨脊髓损伤后运动神经元及神经胶质细胞内神经生长因子(NGF)及其高亲和力受体(TrkA)表达的变化,用改良Allen重击法损伤SCI组动物T12脊髓,按伤后存活时间再将动物分为脊髓损1 d组、2 d组和5 d组。各组动物的脊髓切片经ABC法免疫组织... 为探讨脊髓损伤后运动神经元及神经胶质细胞内神经生长因子(NGF)及其高亲和力受体(TrkA)表达的变化,用改良Allen重击法损伤SCI组动物T12脊髓,按伤后存活时间再将动物分为脊髓损1 d组、2 d组和5 d组。各组动物的脊髓切片经ABC法免疫组织化学染色,用光镜观察TrkA及NGF在脊髓前角运动神经元表达的变化和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及NGF免疫反应阳性胶质细胞的反应性增生程度,并进行图像分析。结果显示:脊髓损伤后前角运动神经元TrkA及NGF的表达随脊髓损伤后动物存活时间的延长逐渐上调;脊髓白质和灰质内尤其是皮质脊髓束内GFAP及NGF阳性胶质细胞明显增生;与此同时,室管膜细胞内亦可见明显的NGF免疫反应产物。上述结果表明,脊髓损伤可刺激脊髓前角运动神经元表达TrkA及NGF,通过自分泌维持受损神经元的存活;损伤部位反应性增生的胶质细胞亦可产生NGF,通过旁分泌作用于脊髓前角运动神经元或皮质脊髓束的轴突末梢,以维持运动神经元的存活及促进皮质脊髓束的再生;适时补充外源性神经营养素或改变损伤局部的微环境将有利于受损脊髓的修复和再生。 展开更多
关键词 大鼠 脊髓损伤 神经生长因子 酪氨酸蛋白激酶A 胶质纤维酸性蛋白 运动神经元 神经胶质细胞
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成年大鼠活体嗅粘膜原代培养细胞中神经干细胞的生长特性及形态学观察 被引量:6
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作者 张志坚 姜平 +4 位作者 端礼荣 刘锦波 龚爱华 王存祖 钱雷敏 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期371-376,共6页
为建立成年活体嗅粘膜神经干细胞的简便、实用的体外培养方法 ,进而为神经干细胞自体移植治疗中枢神经系统损伤的研究提供更为安全的候选细胞 ,本实验自成年大鼠活体分离剪取部分嗅粘膜经胰酶消化制成细胞悬液 ,接种于玻璃培养皿 ,用含 ... 为建立成年活体嗅粘膜神经干细胞的简便、实用的体外培养方法 ,进而为神经干细胞自体移植治疗中枢神经系统损伤的研究提供更为安全的候选细胞 ,本实验自成年大鼠活体分离剪取部分嗅粘膜经胰酶消化制成细胞悬液 ,接种于玻璃培养皿 ,用含 10 %胎牛血清的 F12培养基培养 ,动态观察神经干细胞克隆球的形成及分化过程 ,并用 nestin、NSE、GFAP、vim entin及laminin等抗体作免疫细胞化学染色 ,对阳性细胞进行形态学鉴定。结果显示 ,成年大鼠经嗅粘膜活体取材后 ,可长期存活。成体嗅粘膜细胞混合体外培养时不同类型细胞的贴壁时间存在差异 ,神经干细胞呈球形 ,不直接贴附于培养皿 ,仅粘着在首先贴壁的扁平基底细胞上分裂形成克隆球 ,球内细胞 nestin免疫细胞化学染色阳性。原代培养 14 d后克隆球不再生长 ,球周细胞逐渐向外迁移分化为嗅细胞和嗅鞘细胞。提示 ,成体嗅粘膜神经干细胞可在普通培养基中形成干细胞克隆球 ,嗅粘膜中的其它细胞作为神经干细胞的基底饲养细胞有助于干细胞克隆球的形成 ;活体分离成体嗅粘膜作混合细胞体外培养获取神经干细胞的方法简便、安全、可行 ;本结果为嗅粘膜神经干细胞自体移植治疗中枢神经系统损伤的可行性研究提供了动物实验资料。 展开更多
关键词 神经干细胞 细胞培养 免疫细胞化学 嗅粘膜 大鼠 形态学
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神经营养素受体在幼年大鼠神经系统表达的特点 被引量:5
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作者 钱雷敏 秦茹娟 +4 位作者 张志坚 刘锦波 许燕 姜平 郑德明 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期169-172,共4页
为了研究神经营养素受体 ( Trks)在幼年大鼠神经系统的表达模式及分布规律。本研究应用免疫组织化学技术对幼年大鼠大脑皮质、小脑、脊髓、背根神经节中 Trks的表达及分布进行了形态学观察及定位。结果证明 ,神经营养素受体 Trk A,Trk B... 为了研究神经营养素受体 ( Trks)在幼年大鼠神经系统的表达模式及分布规律。本研究应用免疫组织化学技术对幼年大鼠大脑皮质、小脑、脊髓、背根神经节中 Trks的表达及分布进行了形态学观察及定位。结果证明 ,神经营养素受体 Trk A,Trk B,Trk C在大脑皮质、脊髓、背根神经节中均有表达 ,Trk B呈强阳性且分布广 ,Trk A次之 ,Trk C为弱阳性 ;在小脑 Purkinje细胞Trk C表达阳性 ,Trk A弱阳性 ,Trk B阴性。结论 :幼年大鼠神经系统中 Trks表达存在差异 ,提示神经系统不同部位发育所需的神经营养素不同 ;Trks的分布部位与已报道的神经营养素的分布部位不完全重叠 。 展开更多
关键词 神经营养素受体 幼年大鼠 神经系统 表达 发育 NTS Trks
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神经营养素高亲和力受体在脊髓损伤大鼠运动神经末梢的分布 被引量:1
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作者 任春兰 张志坚 +3 位作者 许燕 刘锦波 吴维秀 姜平 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期497-500,共4页
为了探讨脊髓损伤对运动神经末梢中神经营养素受体TrkA、TrkB和TrkC分布密度的影响,本实验采用改良的Allen氏重击法损伤成年SD大鼠T12节段脊髓,应用免疫组织化学方法分别观察T12脊髓损伤4、12、48 h后,下肢肌肉中运动神经末梢内TrkA、T... 为了探讨脊髓损伤对运动神经末梢中神经营养素受体TrkA、TrkB和TrkC分布密度的影响,本实验采用改良的Allen氏重击法损伤成年SD大鼠T12节段脊髓,应用免疫组织化学方法分别观察T12脊髓损伤4、12、48 h后,下肢肌肉中运动神经末梢内TrkA、TrkB和TrkC受体样免疫反应强度的变化。结果显示:大鼠脊髓T12段损伤48 h后运动终板处即有TrkA、TrkB和TrkC受体样免疫反应产物分布,其中以TrkA免疫反应最强。而正常成年大鼠下肢肌肉中未见其免疫阳性反应产物。本研究结果提示脊髓损伤可刺激运动神经元表达神经营养素受体,并将受体输送至运动终板处的神经末梢,以摄取靶源性神经营养素。本结果为临床上肌肉注射外源性神经营养素治疗脊髓损伤提供了形态学资料。 展开更多
关键词 脊髓损伤 神经营养素受体 免疫反应 运动神经 高亲和力受体 运动终板 大鼠 肌肉 产物 摄取
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大鼠脊髓神经元缺氧复氧损伤中钙敏感受体对其凋亡的影响及意义 被引量:2
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作者 何炜 孙继芾 +3 位作者 蒋润宇 张志坚 陈谦 黄永辉 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期625-630,共6页
目的探究大鼠脊髓神经元缺氧复氧损伤中钙敏感受体对其凋亡的影响及意义。方法将新生SD大鼠脊髓神经元随机分为正常对照组、缺氧复氧组、激动剂(Gd Cl3)组和抑制剂(NPS-2390)组4组。采用95%氮气通入置有细胞培养板的密闭通气盒中15 min... 目的探究大鼠脊髓神经元缺氧复氧损伤中钙敏感受体对其凋亡的影响及意义。方法将新生SD大鼠脊髓神经元随机分为正常对照组、缺氧复氧组、激动剂(Gd Cl3)组和抑制剂(NPS-2390)组4组。采用95%氮气通入置有细胞培养板的密闭通气盒中15 min,37℃培养箱内培养1 h,再用含2%B27、10%胎牛血清的Neurobasol-A液培养细胞24 h复制缺氧复氧模型。应用免疫荧光技术鉴定脊髓神经元并观察钙敏感受体的表达定位,Western blot法检测各组钙敏感受体及凋亡相关蛋白Caspase-3、Bax、Bcl-2的表达水平,激光共聚焦显微镜测定细胞内游离钙的变化,Tunel法观察各组细胞凋亡情况。结果缺氧复氧组的钙敏感受体(t=5.462,P=0.006)、细胞内游离钙(t=8.573,P=0.001)、细胞凋亡(t=4.899,P=0.008)、Caspase-3(t=5.118,P=0.007)和Bax(t=10.930,P=0.001)表达水平均明显高于对照组,激动剂组的钙敏感受体(t=4.975,P=0.008)、细胞内游离钙(t=4.899,P=0.008)、细胞凋亡(t=7.746,P=0.002)、Caspase-3(t=4.776,P=0.009)和Bax(t=5.281,P=0.006)表达水平均明显高于缺氧复氧组,抑制剂组的钙敏感受体(t=3.674,P=0.021)、细胞内游离钙(t=3.846,P=0.018)、细胞凋亡(t=4.281,P=0.013)、Caspase-3(t=3.521,P=0.024)和Bax(t=3.473,P=0.026)表达水平均明显低于缺氧复氧组;缺氧复氧组的Bcl-2表达水平明显低于对照组(t=6.242,P=0.003),激动剂组明显低于缺氧复氧组(t=3.028,P=0.004),抑制剂组明显高于缺氧复氧组(t=2.840,P=0.047)。结论在缺氧复氧损伤过程中,钙敏感受体表达增多,细胞内游离钙增加,脊髓神经元凋亡增多。 展开更多
关键词 缺氧复氧 钙敏感受体 凋亡 脊髓神经元
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