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抑制KDM2A基因对肝癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响
被引量：
3
1
作者
何济南
孔红言
+4 位作者
向丹丹
黄帅文
宋启琴
苗蕊
黄加权
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第7期814-822,共9页
目的探讨抑制KDM2A基因对肝癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其可能的调控机制。方法收集2014-2017年华中科技大学同济医学院附属同济医院收治的40例肝细胞癌(HCC)患者的肝癌组织及其癌旁组织,体外培养人肝癌细胞株HepG2、Huh7、HCCLM3、...
目的探讨抑制KDM2A基因对肝癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其可能的调控机制。方法收集2014-2017年华中科技大学同济医学院附属同济医院收治的40例肝细胞癌(HCC)患者的肝癌组织及其癌旁组织,体外培养人肝癌细胞株HepG2、Huh7、HCCLM3、MHCC-97H及正常肝细胞LO2,采用q RT-PCR及Western blotting检测肝癌组织及细胞中KDM2A mRNA及蛋白的表达情况。取Huh7细胞,设置:(1)si-NC组(转染si-NC)与si-KDM2A组(转染si-KDM2A);(2)mimic-NC组(转染mimic-NC)、miRNA-29a-3p mimic组(转染miRNA-29a-3p mimic)、inhibitor-NC组(转染inhibitor-NC)与miRNA-29a-3p inhibitor组(转染miRNA-29a-3p inhibitor)。采用q RT-PCR和Western blotting检测KDM2A mRNA及蛋白的表达情况,CCK-8法检测细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞侵袭和迁移能力。采用在线数据库TargetScan、miRDIP、miRWalk、Starbase及miRDB预测KDM2A与miR-29a-3p的结合位点。将KDM2A 3'-UTR(WT)或KDM2A 3'-UTR(MUT)报告质粒分别与NC-miRNA或miR-29a-3p mimic共转染293T细胞48 h后,采用荧光素酶报告实验检测荧光素酶活性。结果与癌旁组织相比,肝癌组织中KDM2A mRNA和蛋白相对表达水平明显升高(P<0.05);与正常肝细胞LO2相比,肝癌细胞HepG2、Huh7、HCCLM3、MHCC-97H中KDM2A mRNA和蛋白相对表达水平明显升高(P<0.05)。与si-NC组比较,si-KDM2A组Huh7细胞增殖、侵袭和迁移能力明显降低(P<0.05或P<0.01)。在线数据库TargetScan、miRDIP、miRWalk、Starbase及miRDB分析结果显示,miR-29a-3p与KDM2A存在结合位点。双荧光素酶报告实验结果显示,miR-29a-3p mimic可明显降低KDM2A-MUT荧光素酶活性(P<0.01)。过表达miRNA-29a-3p后,Huh7细胞中KDM2A mRNA和蛋白相对表达水平降低(P<0.01),细胞增殖、侵袭和迁移能力下降(P<0.05);抑制miRNA-29a-3p的表达后,Huh7细胞中KDM2A mRNA和蛋白相对表达水平升高(P<0.05),细胞增殖、侵袭和迁移能力增强(P<0.05)。结论抑制KDM2A的表达可减弱人肝癌细胞Huh7的增殖和转移能力,而miR-29a-3p可能是KDM2A的上游调节因子,可参与肝癌的发生发展。
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关键词
KDM2A
miR-29a-3p
肝细胞癌
增殖
侵袭和转移
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职称材料
题名
抑制KDM2A基因对肝癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响
被引量：
3
1
作者
何济南
孔红言
向丹丹
黄帅文
宋启琴
苗蕊
黄加权
机构
华中
科
技
大学
同济医学院
附属
同济
医院
感染
科
江汉大学附属第三人民医院中西医结合肝病科
出处
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第7期814-822,共9页
基金
湖北省卫生健康委科研项目(WJ2021M201)
吴阶平医学基金(320.6750.2021-02-130)。
文摘
目的探讨抑制KDM2A基因对肝癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其可能的调控机制。方法收集2014-2017年华中科技大学同济医学院附属同济医院收治的40例肝细胞癌(HCC)患者的肝癌组织及其癌旁组织,体外培养人肝癌细胞株HepG2、Huh7、HCCLM3、MHCC-97H及正常肝细胞LO2,采用q RT-PCR及Western blotting检测肝癌组织及细胞中KDM2A mRNA及蛋白的表达情况。取Huh7细胞,设置:(1)si-NC组(转染si-NC)与si-KDM2A组(转染si-KDM2A);(2)mimic-NC组(转染mimic-NC)、miRNA-29a-3p mimic组(转染miRNA-29a-3p mimic)、inhibitor-NC组(转染inhibitor-NC)与miRNA-29a-3p inhibitor组(转染miRNA-29a-3p inhibitor)。采用q RT-PCR和Western blotting检测KDM2A mRNA及蛋白的表达情况,CCK-8法检测细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞侵袭和迁移能力。采用在线数据库TargetScan、miRDIP、miRWalk、Starbase及miRDB预测KDM2A与miR-29a-3p的结合位点。将KDM2A 3'-UTR(WT)或KDM2A 3'-UTR(MUT)报告质粒分别与NC-miRNA或miR-29a-3p mimic共转染293T细胞48 h后,采用荧光素酶报告实验检测荧光素酶活性。结果与癌旁组织相比,肝癌组织中KDM2A mRNA和蛋白相对表达水平明显升高(P<0.05);与正常肝细胞LO2相比,肝癌细胞HepG2、Huh7、HCCLM3、MHCC-97H中KDM2A mRNA和蛋白相对表达水平明显升高(P<0.05)。与si-NC组比较,si-KDM2A组Huh7细胞增殖、侵袭和迁移能力明显降低(P<0.05或P<0.01)。在线数据库TargetScan、miRDIP、miRWalk、Starbase及miRDB分析结果显示,miR-29a-3p与KDM2A存在结合位点。双荧光素酶报告实验结果显示,miR-29a-3p mimic可明显降低KDM2A-MUT荧光素酶活性(P<0.01)。过表达miRNA-29a-3p后,Huh7细胞中KDM2A mRNA和蛋白相对表达水平降低(P<0.01),细胞增殖、侵袭和迁移能力下降(P<0.05);抑制miRNA-29a-3p的表达后,Huh7细胞中KDM2A mRNA和蛋白相对表达水平升高(P<0.05),细胞增殖、侵袭和迁移能力增强(P<0.05)。结论抑制KDM2A的表达可减弱人肝癌细胞Huh7的增殖和转移能力,而miR-29a-3p可能是KDM2A的上游调节因子,可参与肝癌的发生发展。
关键词
KDM2A
miR-29a-3p
肝细胞癌
增殖
侵袭和转移
Keywords
KDM2A
miR-29a-3p
hepatocellular carcinoma
proliferation
invasion and migration
分类号
R73-37 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
抑制KDM2A基因对肝癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响
何济南
孔红言
向丹丹
黄帅文
宋启琴
苗蕊
黄加权
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024
3
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