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GRP78在胃癌生长中的作用
被引量：
3
1
作者
付政祺
镇鸿燕
刘丽江
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第4期625-628,共4页
目的:探讨内质网分子伴侣葡萄糖调节蛋白78(GRP78)参与胃癌细胞生长的作用。方法:回顾性分析34例胃癌及34例癌旁组织,利用组织微阵列技术,构建组织阵列,采用免疫组织化学技术SP法检测该阵列中GRP78蛋白在胃癌及其癌旁组织中表达情况。利...
目的:探讨内质网分子伴侣葡萄糖调节蛋白78(GRP78)参与胃癌细胞生长的作用。方法:回顾性分析34例胃癌及34例癌旁组织,利用组织微阵列技术,构建组织阵列,采用免疫组织化学技术SP法检测该阵列中GRP78蛋白在胃癌及其癌旁组织中表达情况。利用Western blotting检测人体胃癌组织、癌旁组织(肿瘤旁1cm处)和正常组织(远离肿瘤≥10 cm处)中GRP78蛋白的表达情况。利用Western blotting检测人胃癌细胞SGC7901和过表达GRP78的SGC7901-H78细胞(稳定转染GRP78)中GRP78和生长相关蛋白cyclin D1的表达情况。结果:(1)免疫组织化学检测发现:人体胃癌组织中GRP78表达水平明显高于癌旁组织和正常组织,且与性别、分化程度相关(P<0.05);(2)Western blotting检测发现:胃癌组织中GRP78蛋白的表达明显高于癌旁组织和正常组织;(3)Western blotting检测发现:相对于SGC7901细胞,SGC7901-H78细胞中GRP78蛋白的表达明显升高,同时检测生长相关蛋白cyclin D1的表达发现,随着GRP78表达的上调,cyclin D1蛋白表达增加。结论:GRP78蛋白的高表达可能参与了胃癌细胞的生长。
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关键词
胃肿瘤
葡萄糖调节蛋白78
细胞周期蛋白D1
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职称材料
靶向ER-α36的vshRNA真核表达慢病毒载体的构建、鉴定及其对胃癌细胞增殖的影响
被引量：
1
2
作者
王绪明
黄萱
+4 位作者
付政祺
邹丰
张尚昆
王兆一
刘丽江
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第12期2113-2119,共7页
目的:针对雌激素受体(ER)-α36基因的特异性靶序列,构建并鉴定靶向ER-α36基因RNAi慢病毒载体,研究ER-α36沉默后对胃癌细胞增殖的影响。方法:筛选确定的ER-α36基因RNAi有效靶序列,合成靶序列的Oligo DNA,与慢病毒载体(GV307)连接,测...
目的:针对雌激素受体(ER)-α36基因的特异性靶序列,构建并鉴定靶向ER-α36基因RNAi慢病毒载体,研究ER-α36沉默后对胃癌细胞增殖的影响。方法:筛选确定的ER-α36基因RNAi有效靶序列,合成靶序列的Oligo DNA,与慢病毒载体(GV307)连接,测序鉴定。转染293T细胞,包装产生慢病毒,感染胃癌SGC7901细胞株。荧光显微镜下观察SGC7901感染后荧光表达情况,real-time PCR和Western blotting方法检测ER-α36的表达变化。用1×10-10mol/L的17β-雌二醇处理沉默ER-α36的SGC7901细胞,用细胞计数法观察细胞增殖能力的变化及检测相关下游信号通路分子Src、ERK1/2、cyclin D1表达的变化。结果:阳性克隆PCR及测序证明成功构建慢病毒载体LV-ER-α36-RNAi,倒置显微镜下观察LV-ER-α36-RNAi慢病毒载体感染率达80%以上。Real-time PCR和Western blotting方法证实四环素(Te T)诱导下LV-ER-α36-RNAi明显抑制SGC7901细胞内ER-α36 mRNA和蛋白质的表达。与对照组相比,沉默ER-α36的SGC7901细胞增殖能力减弱,Src、ERK1/2、cyclin D1蛋白表达明显降低,Src蛋白活化能力减弱(P<0.05)。结论:我们构建的Te T诱导靶向ER-α36的vshRNA慢病毒载体LVER-α36-RNAi,可明显沉默ER-α36的表达,为研究ER-α36蛋白的作用机理提供实验依据,ER-α36与胃癌细胞等肿瘤细胞的增殖有关。
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关键词
SGC7901细胞
雌激素受体α36
慢病毒载体
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职称材料
题名
GRP78在胃癌生长中的作用
被引量：
3
1
作者
付政祺
镇鸿燕
刘丽江
机构
江汉大学
医学院
病理
学与
病理
生理学教研室
江汉大学江大病理诊断所
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第4期625-628,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.30870981
No.81272754)
+1 种基金
湖北省自然科学基金青年项目(No.2013CFB215)
江汉大学博士科研启动基金资助项目(No.2010023)
文摘
目的:探讨内质网分子伴侣葡萄糖调节蛋白78(GRP78)参与胃癌细胞生长的作用。方法:回顾性分析34例胃癌及34例癌旁组织,利用组织微阵列技术,构建组织阵列,采用免疫组织化学技术SP法检测该阵列中GRP78蛋白在胃癌及其癌旁组织中表达情况。利用Western blotting检测人体胃癌组织、癌旁组织(肿瘤旁1cm处)和正常组织(远离肿瘤≥10 cm处)中GRP78蛋白的表达情况。利用Western blotting检测人胃癌细胞SGC7901和过表达GRP78的SGC7901-H78细胞(稳定转染GRP78)中GRP78和生长相关蛋白cyclin D1的表达情况。结果:(1)免疫组织化学检测发现:人体胃癌组织中GRP78表达水平明显高于癌旁组织和正常组织,且与性别、分化程度相关(P<0.05);(2)Western blotting检测发现:胃癌组织中GRP78蛋白的表达明显高于癌旁组织和正常组织;(3)Western blotting检测发现:相对于SGC7901细胞,SGC7901-H78细胞中GRP78蛋白的表达明显升高,同时检测生长相关蛋白cyclin D1的表达发现,随着GRP78表达的上调,cyclin D1蛋白表达增加。结论:GRP78蛋白的高表达可能参与了胃癌细胞的生长。
关键词
胃肿瘤
葡萄糖调节蛋白78
细胞周期蛋白D1
Keywords
Stomach neoplasms
Glucose-regulated protein 78
Cyclin D1
分类号
R735.2 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
靶向ER-α36的vshRNA真核表达慢病毒载体的构建、鉴定及其对胃癌细胞增殖的影响
被引量：
1
2
作者
王绪明
黄萱
付政祺
邹丰
张尚昆
王兆一
刘丽江
机构
江汉大学
医学院
病理
学与
病理
生理学教研室
江汉大学江大病理诊断所
组织
病理
诊断
部
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第12期2113-2119,共7页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.30870981
No.812727754)
文摘
目的:针对雌激素受体(ER)-α36基因的特异性靶序列,构建并鉴定靶向ER-α36基因RNAi慢病毒载体,研究ER-α36沉默后对胃癌细胞增殖的影响。方法:筛选确定的ER-α36基因RNAi有效靶序列,合成靶序列的Oligo DNA,与慢病毒载体(GV307)连接,测序鉴定。转染293T细胞,包装产生慢病毒,感染胃癌SGC7901细胞株。荧光显微镜下观察SGC7901感染后荧光表达情况,real-time PCR和Western blotting方法检测ER-α36的表达变化。用1×10-10mol/L的17β-雌二醇处理沉默ER-α36的SGC7901细胞,用细胞计数法观察细胞增殖能力的变化及检测相关下游信号通路分子Src、ERK1/2、cyclin D1表达的变化。结果:阳性克隆PCR及测序证明成功构建慢病毒载体LV-ER-α36-RNAi,倒置显微镜下观察LV-ER-α36-RNAi慢病毒载体感染率达80%以上。Real-time PCR和Western blotting方法证实四环素(Te T)诱导下LV-ER-α36-RNAi明显抑制SGC7901细胞内ER-α36 mRNA和蛋白质的表达。与对照组相比,沉默ER-α36的SGC7901细胞增殖能力减弱,Src、ERK1/2、cyclin D1蛋白表达明显降低,Src蛋白活化能力减弱(P<0.05)。结论:我们构建的Te T诱导靶向ER-α36的vshRNA慢病毒载体LVER-α36-RNAi,可明显沉默ER-α36的表达,为研究ER-α36蛋白的作用机理提供实验依据,ER-α36与胃癌细胞等肿瘤细胞的增殖有关。
关键词
SGC7901细胞
雌激素受体α36
慢病毒载体
Keywords
SGC7901 cells
Estrogen receptorα 36
Lentivirus vector
分类号
R393 [医药卫生—基础医学]
R730.23 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
GRP78在胃癌生长中的作用
付政祺
镇鸿燕
刘丽江
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
靶向ER-α36的vshRNA真核表达慢病毒载体的构建、鉴定及其对胃癌细胞增殖的影响
王绪明
黄萱
付政祺
邹丰
张尚昆
王兆一
刘丽江
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014
1
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