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金属离子协同氨基酸提高重组β-环糊精葡萄糖基转移酶在枯草芽孢杆菌中的表达 被引量:4
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作者 李才明 黄敏 +4 位作者 石建中 顾正彪 洪雁 程力 李兆丰 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期1-8,共8页
随着环糊精的应用越来越广,其生产所必需的环糊精葡萄糖基转移酶(EC 2.4.1.19,简称CGT酶)已成为研究热点。为了克服天然菌种产环糊精葡萄糖基转移酶(CGT)能力低等缺陷,该文将来源于Bacillus circulans STB01的β-CGT酶基因插入质粒p ST... 随着环糊精的应用越来越广,其生产所必需的环糊精葡萄糖基转移酶(EC 2.4.1.19,简称CGT酶)已成为研究热点。为了克服天然菌种产环糊精葡萄糖基转移酶(CGT)能力低等缺陷,该文将来源于Bacillus circulans STB01的β-CGT酶基因插入质粒p ST中,构建了分泌型表达载体cgt/p ST并在宿主B.subtilis WB600中成功表达;通过对摇瓶发酵产CGT酶的条件进行优化发现,当发酵培养基为TB,p H为7.0时,37℃培养48 h后胞外酶活力达到27.9 U/m L,与天然菌株B.circulans STB01在较优发酵条件下所分泌的胞外酶活力相比,提高了近19倍;对TB培养基碳源、氮源进一步优化,以6 g/L的玉米淀粉替代TB培养基中的甘油,以30 g/L的酵母提取物作为氮源,胞外酶活可达到31.2 U/m L;亮氨酸、天冬氨酸的添加能明显促进β-CGT酶的胞外表达,而0.5mmol/L Fe3+的添加能进一步将胞外酶活提高到36.9 U/m L。这是目前报道的β-CGT酶在B.subtilis中胞外表达的最高β-环化活力。 展开更多
关键词 环糊精葡萄糖基转移酶 枯草芽孢杆菌 分泌表达 金属离子 氨基酸
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电场技术在食品杀菌中的研究进展 被引量:3
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作者 郑子涛 金亚美 +3 位作者 张令涛 吴石林 徐学明 杨哪 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第11期177-184,共8页
食品生产涉及的杀菌单元操作是保证产品食用安全性的重要手段,当前各类杀菌技术大多是利用其热效应或非热效应以及两者的结合来实现。传统热杀菌需要传热介质并且在一定时间和温度下完成处理,而电场技术是一种同时具有热效应和非热效应... 食品生产涉及的杀菌单元操作是保证产品食用安全性的重要手段,当前各类杀菌技术大多是利用其热效应或非热效应以及两者的结合来实现。传统热杀菌需要传热介质并且在一定时间和温度下完成处理,而电场技术是一种同时具有热效应和非热效应的食品物理场加工技术,能降低传统热杀菌的有效温度阈值以及缩短杀菌时间,可以更好地保留食品中的营养成分,对感官品质、风味和色泽造成的影响更小。本文对欧姆加热杀菌、高压脉冲电场杀菌和感应电场杀菌的原理以及在食品加工中的前沿研究和进展进行综述,探讨目前电场杀菌技术的特点和差异,并对其未来发展方向提出了展望。 展开更多
关键词 杀菌 电场 热效应 非热效应 电穿孔 电崩溃
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两阶段温度控制策略以及助剂促进淀粉分支酶的胞外表达 被引量:1
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作者 王驰 李柱 +4 位作者 李才明 顾正彪 洪雁 程力 李兆丰 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期19-24,共6页
为了促进重组淀粉分支酶在枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis WB600)中的胞外表达,对重组淀粉分支酶在摇瓶水平上进行了发酵优化。首先,以胞外酶活力为指标,先后考察了初始培养基、pH、培养温度和培养时间4种因素对胞外表达的影响;... 为了促进重组淀粉分支酶在枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis WB600)中的胞外表达,对重组淀粉分支酶在摇瓶水平上进行了发酵优化。首先,以胞外酶活力为指标,先后考察了初始培养基、pH、培养温度和培养时间4种因素对胞外表达的影响;然后,通过两阶段温度策略和助剂的添加进一步提高胞外表达水平。结果表明,当发酵培养基为TB、pH为7.5时,25℃培养24h后胞外酶活力达到19.9U/mL;同时,菌体生长最适温度和酶分泌的最适温度是不一致的,通过两阶段温度控制策略(即0—12h控制温度30℃,12h后温度调至25℃),胞外酶活力与单一温度条件下的最高水平(25℃)相比提高了1.4倍,达到了47.1U/mL;在此基础上,进一步添加0.05%的吐温-80,将胞外酶活进一步提高40%,达到65.8U/mL。 展开更多
关键词 淀粉分支酶 胞外表达 两阶段温度控制策略 发酵优化
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不同工艺制备的马铃薯全粉理化性质比较 被引量:4
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作者 杨娟 程力 +3 位作者 洪雁 李才明 李兆丰 顾正彪 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期148-154,共7页
以同一品种新鲜的马铃薯为原料,比较研究了应用不同工艺制备的马铃薯雪花粉、马铃薯颗粒粉和马铃薯生全粉的理化性质。采用扫描电子显微(SEM)、X-射线衍射(XRD)、快速黏度分析仪(RVA)和色度仪分别对马铃薯全粉的微观形貌、颗粒结构、糊... 以同一品种新鲜的马铃薯为原料,比较研究了应用不同工艺制备的马铃薯雪花粉、马铃薯颗粒粉和马铃薯生全粉的理化性质。采用扫描电子显微(SEM)、X-射线衍射(XRD)、快速黏度分析仪(RVA)和色度仪分别对马铃薯全粉的微观形貌、颗粒结构、糊化特性和亮度值进行了表征,并测定了马铃薯全粉的基本组分和碘蓝值,以中筋小麦粉为参照进行了对比分析。结果表明:马铃薯全粉的膳食纤维含量均高于小麦粉,但淀粉、蛋白含量都低于小麦粉;颗粒粉和生全粉的亮度值较高,但均低于小麦粉,雪花粉的亮度值最低,生全粉的黄值最大;马铃薯全粉中雪花粉的碘蓝值较小、糊化度较大,生全粉的碘蓝值较高,糊化度较低;生全粉中马铃薯淀粉颗粒清晰可见,雪花粉和颗粒粉未能观察到淀粉颗粒;生全粉的衍射峰尖锐,结晶结构完好,雪花粉和颗粒粉的结晶结构被破坏。 展开更多
关键词 马铃薯雪花粉 马铃薯颗粒粉 马铃薯生全粉 理化性质
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来源于Bacillus circulans的重组β-CGT酶的分离纯化及其生化性质分析 被引量:3
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作者 李才明 黄敏 +3 位作者 顾正彪 洪雁 程力 李兆丰 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期360-368,共9页
作者将来源于Bacillus circulans STB01的重组β-CGT酶进行分离纯化,并对其生化性质进行了分析。结果表明,采用Phenyl HP柱疏水层析、Q-HP柱阴离子交换层析两步能很好的对重组β-CGT酶进行纯化,酶的回收率达到45.3%。重组β-CGT酶的表... 作者将来源于Bacillus circulans STB01的重组β-CGT酶进行分离纯化,并对其生化性质进行了分析。结果表明,采用Phenyl HP柱疏水层析、Q-HP柱阴离子交换层析两步能很好的对重组β-CGT酶进行纯化,酶的回收率达到45.3%。重组β-CGT酶的表观相对分子质量约为76 500,且相对分子质量呈单分散,说明酶蛋白分子在溶液中是以单聚体形式存在。该酶的最适pH为6.5,且在甘氨酸-氢氧化钠缓冲液中体现出更好的热稳定性;最适温度为60℃。该酶的活性不依赖于金属离子,在酶催化反应的整个过程中,其主要产物均为β-环糊精。以玉米淀粉、马铃薯淀粉、木薯淀粉为底物时,该酶环化反应的动力学性质不符合米氏方程;而分别以可溶性淀粉、麦芽糊精(DE 5、15、25)为底物时,其环化反应的动力学性质能用米氏方程很好的进行描述。 展开更多
关键词 环糊精葡萄糖基转移酶 环糊精 枯草杆菌 分离纯化 生化性质
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C端柔性区域对多糖降解菌来源的麦芽五糖生成酶冷适性的调控
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作者 丁宁 李才明 +2 位作者 班宵逢 顾正彪 李兆丰 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期67-76,共10页
冷适麦芽五糖生成酶在低温下具有较高的催化活力,同时能够在室温下快速水解淀粉并特异性地生成具有营养功效的麦芽五糖,因此在食品、医药等领域具有广阔的应用前景。作者以来源于Saccharophagus degradans的两种麦芽五糖生成酶(SdG5A和S... 冷适麦芽五糖生成酶在低温下具有较高的催化活力,同时能够在室温下快速水解淀粉并特异性地生成具有营养功效的麦芽五糖,因此在食品、医药等领域具有广阔的应用前景。作者以来源于Saccharophagus degradans的两种麦芽五糖生成酶(SdG5A和SdG5A-CD)为研究对象,将其分别表达于Bacillus subtilis中,并分析比较了重组酶的冷适性。结果表明,重组SdG5A在0℃下可以保持27.8%的酶活力,在室温下生产麦芽五糖的得率高达48.6%,具有较强的冷适性;而不含有linker和淀粉结合域(SBD)的SdG5A-CD不具有冷适性。为了探究SdG5A的冷适性机理,利用RoseTTAFold构建了结构模型,并利用分子动力学模拟等方法分析了结构柔性。结果表明,位于SdG5A C端的linker-SBD区域具有极高的柔性,且在0℃下的均方根涨落与45℃保持一致,说明linker-SBD结构高柔性的分子特征是影响SdG5A冷适性的关键因素。 展开更多
关键词 麦芽五糖生成酶 冷适性 柔性 分子动力学模拟 淀粉结合域
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嗜热α-淀粉酶热稳定性的决定因素及提高策略
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作者 李才明 陈双娣 +3 位作者 顾正彪 洪雁 程力 李兆丰 《食品与机械》 CSCD 北大核心 2018年第9期6-10,共5页
阐明了嗜热α-淀粉酶的微生物来源及性质,分析了影响嗜热α-淀粉酶热稳定性的8种因素,提出采用物理法、化学法和生物法提高嗜热α-淀粉酶热稳定性的策划,为完善α-淀粉酶的热稳定化技术提供了参考依据。
关键词 Α-淀粉酶 热稳定性 决定因素 提高策略
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