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微囊藻毒素-LR超灵敏均相免疫分析方法的建立与优化
被引量:
2
1
作者
张艺
黄飚
+2 位作者
钮伟民
赵灿培
金坚
《中国药理学与毒理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第3期432-437,共6页
目的基于多克隆抗体免疫分析,构建并优化一种超灵敏、均相的光激化学发光法(AlphaLISA),用以检测水体中微囊藻毒素(MC)-LR含量。方法采用竞争原理,MC-LR人工抗原偶联的发光微球与标准品或样品MC-LR共同竞争限量一抗,再被二抗捕获,...
目的基于多克隆抗体免疫分析,构建并优化一种超灵敏、均相的光激化学发光法(AlphaLISA),用以检测水体中微囊藻毒素(MC)-LR含量。方法采用竞争原理,MC-LR人工抗原偶联的发光微球与标准品或样品MC-LR共同竞争限量一抗,再被二抗捕获,然后再通过生物素-亲和素与感光微球形成成免疫复合物,此时感光微球与发光微球发生接近,则产生并传递能量,发出特殊荧光。选择了合适的一抗和二抗工作稀释度,比较缓冲体系和反应时间的作用,从而优化了反应条件。结果通过优化反应条件,即筛选合适的一抗和二抗反应浓度、缓冲体系和反应时间,从而构建了MC-LR AlphaLISA检测法,其总反应时间40 min,灵敏度0.006μg·L^-1,可测线性范围0.006~5μg·L^-1,变异系数小于10%,平均添加回收率107.7%,与MC-RR和MC-RY的交叉反应率分别为13.2%和0.91%。结论本研究方法灵敏度高,特异性好,免疫反应迅速,适用于多样本量水体的MC-LR检测。
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关键词
微囊藻毒素
微囊藻毒素-LR
化学发光测定法
均相免疫分析
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职称材料
题名
微囊藻毒素-LR超灵敏均相免疫分析方法的建立与优化
被引量:
2
1
作者
张艺
黄飚
钮伟民
赵灿培
金坚
机构
江南大学药学院药物设计与分子药理室
江苏省原子医学研究所卫生部核医学重点实验
室
无锡市疾病预防控制中心检验部
出处
《中国药理学与毒理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第3期432-437,共6页
基金
江苏省“333高层次人才培养工程”(BRA20122209)~~
文摘
目的基于多克隆抗体免疫分析,构建并优化一种超灵敏、均相的光激化学发光法(AlphaLISA),用以检测水体中微囊藻毒素(MC)-LR含量。方法采用竞争原理,MC-LR人工抗原偶联的发光微球与标准品或样品MC-LR共同竞争限量一抗,再被二抗捕获,然后再通过生物素-亲和素与感光微球形成成免疫复合物,此时感光微球与发光微球发生接近,则产生并传递能量,发出特殊荧光。选择了合适的一抗和二抗工作稀释度,比较缓冲体系和反应时间的作用,从而优化了反应条件。结果通过优化反应条件,即筛选合适的一抗和二抗反应浓度、缓冲体系和反应时间,从而构建了MC-LR AlphaLISA检测法,其总反应时间40 min,灵敏度0.006μg·L^-1,可测线性范围0.006~5μg·L^-1,变异系数小于10%,平均添加回收率107.7%,与MC-RR和MC-RY的交叉反应率分别为13.2%和0.91%。结论本研究方法灵敏度高,特异性好,免疫反应迅速,适用于多样本量水体的MC-LR检测。
关键词
微囊藻毒素
微囊藻毒素-LR
化学发光测定法
均相免疫分析
Keywords
microcystin
microcystin-LR
chemiluminescent measurments
homogeneous immunoassay
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
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作者
出处
发文年
被引量
操作
1
微囊藻毒素-LR超灵敏均相免疫分析方法的建立与优化
张艺
黄飚
钮伟民
赵灿培
金坚
《中国药理学与毒理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014
2
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