期刊导航
期刊开放获取
上海教育软件发展有限公..
期刊文献
+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
检索
高级检索
期刊导航
共找到
2
篇文章
<
1
>
每页显示
20
50
100
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
文摘
详细
列表
相关度排序
被引量排序
时效性排序
融合蛋白GGHN端延长类似物的克隆表达、纯化及活性研究
被引量：
1
1
作者
冯均尚
窦文芳
+3 位作者
张晓梅
许泓瑜
史劲松
许正宏
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第9期124-129,共6页
GGH是人胰高血糖素样肽-1与人血清白蛋白融合蛋白(GLP-1A2G)2-HSA的简称,为研究N端添加丙氨酸的修饰对其活性的影响,通过基因工程方法成功构建表达该类似物的工程菌,并纯化得到终产物,完成了初步体外活性检测。首先运用PCR技术扩增出融...
GGH是人胰高血糖素样肽-1与人血清白蛋白融合蛋白(GLP-1A2G)2-HSA的简称,为研究N端添加丙氨酸的修饰对其活性的影响,通过基因工程方法成功构建表达该类似物的工程菌,并纯化得到终产物,完成了初步体外活性检测。首先运用PCR技术扩增出融合蛋白GGH类似物的基因片段,以pPIC9K为表达质粒构建了重组表达质粒,将双酶切和测序验证正确的重组质粒电转至分泌型菌株毕赤酵母GS115,然后经过MD平板筛选获得转化子,利用甲醇诱导表达72 h,SDS-PAGE检测上清产物与未修饰的GGH对比,得到阳性转化子。融合蛋白经过发酵液8 000 r/min离心10 min,0.45μm的微孔滤膜微滤,采用截留分子量为10 kD的超滤膜超滤20倍,再依次经过Blue Sepharose 6 Fast Flow、Phenyl Sepharose Fast Flow、Q Sepharose Fast Flow、Sephadex G-25层析柱。在RINm5f细胞上测cAMP的生成,通过与阳性对照的标准曲线对比发现,A-GGH活性比GGH提高10倍,表现出较好的体外活性。
展开更多
关键词
融合蛋白GGH
类似物
毕赤酵母
表达
纯化
活性
在线阅读
下载PDF
职称材料
固态发酵食醋有机酸组成分析中样品预处理方法的研究
被引量：
13
2
作者
余永建
邓晓阳
+2 位作者
陆震鸣
史劲松
许正宏
《食品工业科技》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第4期198-200,211,共4页
比较了4种大分子杂质沉淀方法和4种小分子杂质去除方法对食醋有机酸HPLC分析结果的影响。结果表明,亚铁氰化钾-硫酸锌法可有效地沉淀食醋样品中的生物大分子物质,Sep-PakC18固相萃取小柱可有效的去除样品中色素等小分子杂质。该方法简...
比较了4种大分子杂质沉淀方法和4种小分子杂质去除方法对食醋有机酸HPLC分析结果的影响。结果表明,亚铁氰化钾-硫酸锌法可有效地沉淀食醋样品中的生物大分子物质,Sep-PakC18固相萃取小柱可有效的去除样品中色素等小分子杂质。该方法简单、操作方便,成功地排除了食醋中蛋白、色素等复杂成分对有机酸HPLC分析的干扰。
展开更多
关键词
食醋
HPLC
有机酸
预处理
在线阅读
下载PDF
职称材料
题名
融合蛋白GGHN端延长类似物的克隆表达、纯化及活性研究
被引量：
1
1
作者
冯均尚
窦文芳
张晓梅
许泓瑜
史劲松
许正宏
机构
江南大学
药学院
制药
工程
研究室
江南大学药学院生物活性制品加工工程研究室
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第9期124-129,共6页
基金
江苏省科技支撑计划(BE2009629)
文摘
GGH是人胰高血糖素样肽-1与人血清白蛋白融合蛋白(GLP-1A2G)2-HSA的简称,为研究N端添加丙氨酸的修饰对其活性的影响,通过基因工程方法成功构建表达该类似物的工程菌,并纯化得到终产物,完成了初步体外活性检测。首先运用PCR技术扩增出融合蛋白GGH类似物的基因片段,以pPIC9K为表达质粒构建了重组表达质粒,将双酶切和测序验证正确的重组质粒电转至分泌型菌株毕赤酵母GS115,然后经过MD平板筛选获得转化子,利用甲醇诱导表达72 h,SDS-PAGE检测上清产物与未修饰的GGH对比,得到阳性转化子。融合蛋白经过发酵液8 000 r/min离心10 min,0.45μm的微孔滤膜微滤,采用截留分子量为10 kD的超滤膜超滤20倍,再依次经过Blue Sepharose 6 Fast Flow、Phenyl Sepharose Fast Flow、Q Sepharose Fast Flow、Sephadex G-25层析柱。在RINm5f细胞上测cAMP的生成,通过与阳性对照的标准曲线对比发现,A-GGH活性比GGH提高10倍,表现出较好的体外活性。
关键词
融合蛋白GGH
类似物
毕赤酵母
表达
纯化
活性
Keywords
Fusion protein GGH Analogue Pichia pastoris Expression Purification Bioactivity
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
在线阅读
下载PDF
职称材料
题名
固态发酵食醋有机酸组成分析中样品预处理方法的研究
被引量：
13
2
作者
余永建
邓晓阳
陆震鸣
史劲松
许正宏
机构
江南大学
药学院
制药
工程
研究室
江南大学药学院生物活性制品加工工程研究室
国家固态酿造
工程
技术
研究
中心
出处
《食品工业科技》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第4期198-200,211,共4页
基金
国家自然科学基金(31271922)
国家863课题(2012AA021301)
+1 种基金
国家固态酿造工程技术中心开放课题(2011B2211
GCKF201109)
文摘
比较了4种大分子杂质沉淀方法和4种小分子杂质去除方法对食醋有机酸HPLC分析结果的影响。结果表明,亚铁氰化钾-硫酸锌法可有效地沉淀食醋样品中的生物大分子物质,Sep-PakC18固相萃取小柱可有效的去除样品中色素等小分子杂质。该方法简单、操作方便,成功地排除了食醋中蛋白、色素等复杂成分对有机酸HPLC分析的干扰。
关键词
食醋
HPLC
有机酸
预处理
Keywords
vinegar
HPLC
organic acid
pretreatment
分类号
TS264.22 [轻工技术与工程—发酵工程]
在线阅读
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
融合蛋白GGHN端延长类似物的克隆表达、纯化及活性研究
冯均尚
窦文芳
张晓梅
许泓瑜
史劲松
许正宏
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2013
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
固态发酵食醋有机酸组成分析中样品预处理方法的研究
余永建
邓晓阳
陆震鸣
史劲松
许正宏
《食品工业科技》
CAS
CSCD
北大核心
2013
13
在线阅读
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
上一页
1
下一页
到第
页
确定
用户登录
登录
IP登录
使用帮助
返回顶部
