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基于糖化学生物学的糖类药物研发进展 被引量：1
1
作者 秦春君 熊德彩 尹健 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期429-431,共3页
糖类物质广泛存在于各种生物体中,在多种生命过程中发挥重要作用,具有多种生物医药活性,被广泛应用于医药、食品、化妆品等领域。糖类药物包括不同来源的单糖、寡糖、多糖、糖苷类物质、糖缀合物和拟糖复合物等,被广泛应用于防治感染性... 糖类物质广泛存在于各种生物体中,在多种生命过程中发挥重要作用,具有多种生物医药活性,被广泛应用于医药、食品、化妆品等领域。糖类药物包括不同来源的单糖、寡糖、多糖、糖苷类物质、糖缀合物和拟糖复合物等,被广泛应用于防治感染性疾病。 展开更多
关键词 感染性疾病 化学生物学 糖缀合物 糖复合物 化妆品 糖类物质 糖类药物 研发进展
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系列食品微生物多糖的高黏度发酵关键技术 被引量：1
2
作者 詹晓北 郑志永 +3 位作者 古立谦 朱莉 吴剑荣 张洪涛 《食品科学技术学报》 CAS 2013年第1期46-50,共5页
比较产热凝胶菌株生长和合成多糖阶段的能量代谢差异,特别是能量耗散的差异,构建了土壤杆菌ATCC 31749产热凝胶的代谢途径.研究产生能量代谢差异的原因及其影响因素,利用分子生物学技术和生物信息学工具,构建了土壤杆菌电子呼吸链的传... 比较产热凝胶菌株生长和合成多糖阶段的能量代谢差异,特别是能量耗散的差异,构建了土壤杆菌ATCC 31749产热凝胶的代谢途径.研究产生能量代谢差异的原因及其影响因素,利用分子生物学技术和生物信息学工具,构建了土壤杆菌电子呼吸链的传递途径.研究高密度培养、高强度生产的两步法微生物多糖发酵工艺.在预备罐中以低C/N营养条件,实现产多糖微生物的快速高密度培养.在发酵罐中稀释细胞后以高C/N营养条件高强度生产微生物多糖.研制工业规模下适用于高黏度发酵的高效生物反应器.以结冷胶为高黏度发酵模型体系,研究该反应器在冷模条件下的传质、混合和流变行为特征,设计了新型高效生物反应器,放大至50 m3并应用于结冷胶发酵生产实践中. 展开更多
关键词 微生物多糖 结冷胶 热凝胶 代谢途径 生物反应器
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工程菌-酵母耦合高密度发酵生产乳糖-N-二糖
3
作者 李竹英 张洪涛 +3 位作者 李嘉怡 张子梦 韩成 许淳 《食品与发酵工业》 北大核心 2025年第6期120-126,共7页
乳糖-N-二糖(lacto-N-biose,LNB)是母乳寡糖(human milk oligosaccharides,HMOs)的主要组成部分,也是双歧因子候选者之一,但是目前缺少经济的大规模合成技术。该研究利用蔗糖磷酸化酶和LNB磷酸化酶的非依赖能荷再生优势,以酿酒酵母为能... 乳糖-N-二糖(lacto-N-biose,LNB)是母乳寡糖(human milk oligosaccharides,HMOs)的主要组成部分,也是双歧因子候选者之一,但是目前缺少经济的大规模合成技术。该研究利用蔗糖磷酸化酶和LNB磷酸化酶的非依赖能荷再生优势,以酿酒酵母为能源供给细胞,建立了双菌共培养高效合成LNB的方法。首先构建了E.coli JM109(DE3)/pET28a-GalT1、E.coli JM109(DE3)/pET28a-GalT2、E.coli JM109(DE3)/pET28a-BLUSP的工程菌,筛选出合成二磷酸尿苷葡萄糖(uridine diphosphate glucose,UDP-Glc)产量高达10.5 g/L的最优菌株E.coli JM109(DE3)/pET28a-GalT1。然后与构建的工程菌E.coli JM109(DE3)/pET28a-SPase、E.coli JM109(DE3)/pET28a-GalE和E.coli JM109(DE3)/pET28a-BiGalHexNAcP四菌耦合发酵,LNB产量为6.78 g/L。最后构建了共表达菌株E.coli JM109(DE3)(含有质粒pRSFDuet1-SPase-GalT1和pETDuet1-GalE-BiGalHexNAcP),外源添加辅因子尿苷一磷酸(uridine monophosphate,UMP)(浓度为20 mmol/L),将其与酵母耦合发酵,LNB最高产量为28.66 g/L,与四菌株耦合发酵相比,产量提高了323%。这是目前关于LNB产量最高的报道。研究结果为低成本生产乳糖-N-二糖提供了新的技术路线。 展开更多
关键词 乳糖-N-二糖 蔗糖 蔗糖磷酸化酶 耦合发酵 母乳寡糖
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聚唾液酸和唾液酸寡糖的生物合成及其在营养食品中的应用前景 被引量：8
4
作者 郑志永 詹晓北 +2 位作者 朱德强 朱莉 吴剑荣 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第15期361-368,共8页
聚唾液酸是唾液酸单体以α-2,8和(或)α-2,9糖苷键连接而成的同聚物,是神经细胞中神经黏附分子的重要组成部分,具备良好的生物相容性、非免疫原性和可降解性,在医药和食品领域有重要的应用前景。唾液酸寡糖存在于人脑细胞表面的神经节... 聚唾液酸是唾液酸单体以α-2,8和(或)α-2,9糖苷键连接而成的同聚物,是神经细胞中神经黏附分子的重要组成部分,具备良好的生物相容性、非免疫原性和可降解性,在医药和食品领域有重要的应用前景。唾液酸寡糖存在于人脑细胞表面的神经节苷脂和糖蛋白分子上,与增强人体免疫力和记忆力有关。唾液酸寡糖在人乳中大量存在,在孕妇和婴幼儿营养食品中有潜在应用价值。本文综述聚唾液酸的微生物合成途径和生产工艺,唾液酸寡糖的合成方法,及它们在食品和健康领域中的潜在应用。 展开更多
关键词 聚唾液酸 唾液酸 唾液酸寡糖 食品 应用 健康
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硫化氢供体型丁苯酞开环衍生物的设计、合成及抗血小板活性 被引量：2
5
作者 王晓丽 王兆亚 +3 位作者 王琳娜 季晖 张奕华 尹健 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期158-162,共5页
设计合成了一系列硫化氢供体型丁苯酞开环衍生物(5a^5f),其结构经质谱和核磁共振氢谱确证;采用Born氏比浊法检测目标化合物对二磷酸腺苷(ADP)和花生四烯酸(AA)诱导的血小板聚集的抑制活性,结果表明,化合物5e对ADP和AA诱导的血小板聚集... 设计合成了一系列硫化氢供体型丁苯酞开环衍生物(5a^5f),其结构经质谱和核磁共振氢谱确证;采用Born氏比浊法检测目标化合物对二磷酸腺苷(ADP)和花生四烯酸(AA)诱导的血小板聚集的抑制活性,结果表明,化合物5e对ADP和AA诱导的血小板聚集抑制活性均显著优于丁苯酞,具有深入研究价值。 展开更多
关键词 丁苯酞 硫化氢 硫化氢供体 合成 抗血小板聚集活性
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N-酰基葡糖胺衍生物对GABA转运体功能的影响 被引量：1
6
作者 胡静 樊华 尹健 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期228-234,共7页
为筛选GAT蛋白活性抑制剂,以稳定表达GAT1蛋白的人胚胎肾细胞(HEK-293)为模型,利用GABA摄取定量测试测定N-酰基葡糖胺衍生物对该蛋白功能的影响。同时,由于GAT1蛋白的功能与其N-糖链结构尤其是末端唾液酸密切相关,再通过定量该蛋白糖链... 为筛选GAT蛋白活性抑制剂,以稳定表达GAT1蛋白的人胚胎肾细胞(HEK-293)为模型,利用GABA摄取定量测试测定N-酰基葡糖胺衍生物对该蛋白功能的影响。同时,由于GAT1蛋白的功能与其N-糖链结构尤其是末端唾液酸密切相关,再通过定量该蛋白糖链末端唾液酸的表达分析衍生物对蛋白糖链修饰的作用。结果显示,10 mmol/L 3-O-甲基-N-乙酰基葡糖胺(3-O-Met-Glc NAc)通过抑制GAT1蛋白的唾液酸化(降至66.8%)将GABA摄取活性减弱到到53%(P<0.01);而10 mmol/L N-丙酰基葡糖胺(Glc NProp),N-环丙甲酰基葡糖胺(Glc NCyclo),N-己酰基葡糖胺(Glc NHex),N-乙酰氨基乙酰基葡糖(Glc NAc-acetamido)则通过抑制蛋白糖链末端修饰分别将GABA摄取活性减弱到54%、63%、63%和67%(P<0.01)。因此,N-酰基葡糖胺衍生物可用于进一步筛选研究GAT蛋白活性抑制剂或唾液酸生物合成抑制剂。 展开更多
关键词 Γ-氨基丁酸 GABA转运蛋白 N-糖基化 唾液酸 N-酰基葡糖胺衍生物 中枢神经系统疾病
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D-塔格糖的生理活性及生物合成研究进展 被引量：3
7
作者 李子杰 沈立群 +2 位作者 费康清 陈洲 中西秀树 《食品科学技术学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第6期20-28,共9页
D-塔格糖是一种重要的稀有己酮糖,其甜度是蔗糖的92%,热量只有蔗糖的三分之一;D-塔格糖分别于2001年和2014年被美国食品药品监督管理局和我国卫生和计划生育委员会批准为食品新原料。D-塔格糖具有降低血糖、减少肥胖、改善肠道菌群、抗... D-塔格糖是一种重要的稀有己酮糖,其甜度是蔗糖的92%,热量只有蔗糖的三分之一;D-塔格糖分别于2001年和2014年被美国食品药品监督管理局和我国卫生和计划生育委员会批准为食品新原料。D-塔格糖具有降低血糖、减少肥胖、改善肠道菌群、抗龋齿、抗氧化等功能。D-塔格糖作为一种理想功能性甜味剂,具有广泛的应用价值,然而塔格糖的生产成本以及产量一直是限制塔格糖发展和应用的重要原因。D-塔格糖的合成方法主要有化学合成法和生物转化法。化学合成法生产D-塔格糖虽然是一种经济有效的方法,但是在生产过程中需要高温高压的条件,并且容易生成山梨糖、甘露糖等杂糖,不利于分离纯化。为了克服这些缺点,生物转化法生产D-塔格糖得到了广泛的关注和研究,因此,系统阐述了以不同底物,如己糖(半乳糖醇、D-半乳糖和D-果糖)、乳糖、多糖(麦芽糊精和淀粉)转化成D-塔格糖的研究进展和优缺点,并对其未来研究趋势进行了展望,以期为D-塔格糖的研发与生产提供借鉴。 展开更多
关键词 D-塔格糖 生理功能 L-阿拉伯糖异构酶 乳糖 生物转化法
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幽门螺杆菌脂多糖抗原表位片段的化学合成及抗体亲和力研究
8
作者 赵慧 邹小鹏 +2 位作者 肖蕾 胡静 尹健 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期645-656,共12页
幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, Hp)是引发慢性胃炎、消化性溃疡,甚至胃癌的重要致病菌,目前尚无上市预防或治疗Hp感染的疫苗。本研究通过化学法合成了Hp脂多糖核心寡糖中不同链长的α-1,6-葡聚糖片段(二糖至六糖),使用基于酰基远程... 幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, Hp)是引发慢性胃炎、消化性溃疡,甚至胃癌的重要致病菌,目前尚无上市预防或治疗Hp感染的疫苗。本研究通过化学法合成了Hp脂多糖核心寡糖中不同链长的α-1,6-葡聚糖片段(二糖至六糖),使用基于酰基远程参与作用和溶剂效应的协同糖基化策略成功构建了1,2-顺式-糖苷键。糖芯片筛选结果显示,脂多糖免疫兔血清和患者血清中的IgG抗体均能与合成的α-1,6-葡聚糖片段结合;脂多糖免疫兔血清IgG抗体与α-1,6-葡聚三糖具有较强的结合能力;绝大多数Hp感染患者血清IgG抗体能够很好地识别α-1,6-葡聚三糖和五糖,部分患者血清IgG抗体与α-1,6-葡聚二糖具有较强的结合作用。此研究结果表明,α-1,6-葡聚二糖、三糖和五糖可能是Hp脂多糖中的重要糖抗原片段。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 脂多糖 α-1 6-葡聚糖 糖芯片 抗体亲和力
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固定化酶新技术——酿酒酵母孢子微胶囊固定化酶技术 被引量：3
9
作者 孔军 李子杰 +1 位作者 中西秀树 高晓冬 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期257-265,共9页
随着固定化酶技术的日新月异,微胶囊技术得到了长足的发展。与传统微胶囊生产技术不同,文章介绍了一种"天然的"微胶囊固定化酶生产新技术——酿酒酵母孢子微胶囊固定化酶技术,详述了该固定化技术原理及实例。该技术优点在于:... 随着固定化酶技术的日新月异,微胶囊技术得到了长足的发展。与传统微胶囊生产技术不同,文章介绍了一种"天然的"微胶囊固定化酶生产新技术——酿酒酵母孢子微胶囊固定化酶技术,详述了该固定化技术原理及实例。该技术优点在于:固定化酶的组装"自然"完成,具有天然抗逆性,大小均一,可重复使用,绿色环保,可实现多种酶的共同固定。最后,对其应用前景进行了展望。 展开更多
关键词 固定化酶 微胶囊技术 酿酒酵母孢子固定化酶 “一孢多酶”法
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木糖异构酶酿酒酵母孢子“微胶囊”的构建及酶学性质分析 被引量：2
10
作者 李毅 李子杰 +1 位作者 中西秀树 高晓冬 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期6-11,共6页
将来源于嗜热细菌Thermus thermophilus HB8的木糖异构酶(XI)基因xyl A与SPR1信号肽序列(ss)融合后连接到p RS424-TEFpr表达载体上,将重组质粒p RS424-TEFpr-ss-xyl A转化酿酒酵母AN120野生型菌株、osw2Δ缺陷型菌株以及dit1Δ缺陷型菌... 将来源于嗜热细菌Thermus thermophilus HB8的木糖异构酶(XI)基因xyl A与SPR1信号肽序列(ss)融合后连接到p RS424-TEFpr表达载体上,将重组质粒p RS424-TEFpr-ss-xyl A转化酿酒酵母AN120野生型菌株、osw2Δ缺陷型菌株以及dit1Δ缺陷型菌株并进行产孢。通过荧光定位、蛋白免疫印迹分析以及酶活测定,表明酿酒酵母孢子"微胶囊"固定化酶系统构建成功。由于该固定化酶的最佳反应温度为85℃,避免了酿酒酵母孢子在D-葡萄糖为底物条件下萌发的弊端。同时,根据蛋白免疫印迹分析和重复利用性结果,表明二酪氨酸层的存在对于酶的包埋,对高温的耐受性都表现出了较好的特性。此外对野生型和osw2Δ孢子固定的XI的酶学性质进行了研究,相对于游离酶,孢子固定化酶更加稳定。在p H为6的酸性条件或p H为9的碱性条件下,固定化酶相对酶活能达到60%以上,同时在温度95℃时,固定化的酶相对酶活也能达到60%以上。与野生型孢子相比,osw2Δ孢子展现出了潜在的优势,既可以有效阻止酶的释放,又提高了底物分子的通透性。 展开更多
关键词 酿酒酵母 孢子 木糖异构酶 酶固定化
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基于电子仿生学的玛咖粉鉴伪 被引量：2
11
作者 党艳婷 李爱民 +7 位作者 苑鹏 夏凯 刘士伟 刘亚旭 赵可心 周文萱 段盛林 温霖 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期169-175,共7页
为鉴别玛咖粉的真伪文中运用台式能谱扫描电镜观察了玉米粉、萝卜粉、蔓菁粉和玛咖粉颗粒的微观形态,并对玛咖粉和蔓菁粉的元素组成进行了分析测试。结果表明,萝卜粉、玉米粉与玛咖粉形态差异明显,蔓菁粉与玛咖粉微观形态最相近,但表观... 为鉴别玛咖粉的真伪文中运用台式能谱扫描电镜观察了玉米粉、萝卜粉、蔓菁粉和玛咖粉颗粒的微观形态,并对玛咖粉和蔓菁粉的元素组成进行了分析测试。结果表明,萝卜粉、玉米粉与玛咖粉形态差异明显,蔓菁粉与玛咖粉微观形态最相近,但表观也有区别,同样可以进行玛咖粉的真假鉴伪;由X射线能谱分析结果可知,若被测样品中N元素质量比接近(43.75±0.79)%,O元素质量比接近(29.92±0.74)%,可初步推定该样品为纯玛咖粉;否则被测样品为疑似掺蔓菁粉的假玛咖粉。同时运用电子鼻对掺有蔓菁粉的玛咖粉进行鉴别。结果表明,掺不同蔓菁比例的玛咖粉气味指纹图谱呈现一定的规律性,电子鼻能够有效鉴别掺蔓菁的玛咖粉,还可以大致确定掺假的比例区间;此外通过统计质量控制(statistical quality control,SQC)分析模型可以实现原料和产品的质量控制。 展开更多
关键词 玛咖粉 蔓菁粉 鉴伪 台式扫描电镜 电子鼻 统计质量控制(statistical quality control SQC)分析
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热凝胶在碱溶过程的流变学和质构学行为分析 被引量：4
12
作者 叶剑 郑志永 +1 位作者 詹晓北 蒋芸 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期82-88,共7页
碱溶过程是影响热凝胶提取工艺效率和产品质量的关键因素。为探寻适合工业化提取热凝胶的工艺条件,研究了碱处理时间、碱溶温度和碱浓度对热凝胶溶胶流变学和提取后凝胶产品质构的影响。结果表明,(1)随着碱处理时间的延长,溶胶黏度降低... 碱溶过程是影响热凝胶提取工艺效率和产品质量的关键因素。为探寻适合工业化提取热凝胶的工艺条件,研究了碱处理时间、碱溶温度和碱浓度对热凝胶溶胶流变学和提取后凝胶产品质构的影响。结果表明,(1)随着碱处理时间的延长,溶胶黏度降低,稠度系数下降,流变指数增加,溶胶接近于牛顿型流体,凝胶强度基本不变;(2)热凝胶凝胶强度和溶胶黏度均随碱溶温度升高而下降,较高的温度处理会降低热凝胶的品质,室温或水冷环境下可以满足工业要求;(3)随着碱浓度的增加,流体流变行为从宾汉塑性流体向牛顿流体接近。碱浓度低于0. 3 mol/L时碱浓度明显影响溶胶流体性质,碱浓度高于0. 5 mol/L时碱浓度明显影响热凝胶品质。 展开更多
关键词 热凝胶 碱溶 流变学分析 质构分析
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kre1Δ酿酒酵母孢子固定肌酐酶体系的构建及其酶学分析 被引量：1
13
作者 潘华平 中西秀树 +1 位作者 孔军 高晓冬 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期1-7,共7页
酵母孢子固定化酶是一种利用酵母孢子对酶进行包埋固定的新型酶固定化技术。研究表明,利用有孢子壁缺陷的osw2Δ酿酒酵母孢子作为酶固定化载体,不仅能大幅提高酶活,而且具有较强的抗逆性及较好的可重复利用性。为了研究新发现的kre1Δ... 酵母孢子固定化酶是一种利用酵母孢子对酶进行包埋固定的新型酶固定化技术。研究表明,利用有孢子壁缺陷的osw2Δ酿酒酵母孢子作为酶固定化载体,不仅能大幅提高酶活,而且具有较强的抗逆性及较好的可重复利用性。为了研究新发现的kre1Δ孢子是否具有类似的性能,将肌酐酶转入酵母孢子,并对其酶学性能进行分析。实验结果表明,kre1Δ孢子固定的肌酐酶活性与osw2Δ孢子相近,都显著高于野生型孢子。与游离酶相比,kre1Δ孢子固定的肌酐酶与osw2Δ一样,都有较好的可重复利用性和较强的抗逆性。同时,kre1Δ孢子与osw2Δ孢子肌酐酶活的最适温度均为60℃,最适pH值均为6.0,且kre1Δ孢子与osw2Δ孢子一样都表现出较好的耐高温性及较广范围的pH耐受性。因此,kre1Δ孢子也是综合性能较好的酶固定化载体。 展开更多
关键词 肌酐酶 酶固定化 酿酒酵母 孢子 孢子壁
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延长黄原胶缓释期的技术研究
14
作者 左文怡 朱莉 +1 位作者 杨泽林 詹晓北 《植物营养与肥料学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期692-698,共7页
【目的】研究了水杨酸(SA)在黄原胶(XG)及聚乙烯醇(PVA)为主要材料的基质型缓释系统中的释放速率。【方法】共设计了29个配方,分为4组:XG+PVA+SA、XG+PVA+醋酸酯淀粉(AS)+SA、XG+PVA+硬脂酸+SA、XG+PVA+壳聚糖(CS)+SA。根据设计的配方... 【目的】研究了水杨酸(SA)在黄原胶(XG)及聚乙烯醇(PVA)为主要材料的基质型缓释系统中的释放速率。【方法】共设计了29个配方,分为4组:XG+PVA+SA、XG+PVA+醋酸酯淀粉(AS)+SA、XG+PVA+硬脂酸+SA、XG+PVA+壳聚糖(CS)+SA。根据设计的配方将材料研磨混匀后以聚乙烯醇溶液为粘合剂进行造粒。首先制作了6～10 mm五种造粒直径的缓释颗粒,并以4%、5%、6%(w/v)三种浓度的PVA溶液分别造粒,研究了造粒大小、PVA溶液浓度对颗粒释放行为的影响。确定造粒条件后研究了四种配方不同配比对颗粒释放行为的影响,采用静水溶出法和土柱淋溶法对释放行为进行表征,以水杨酸的释放率及累积释放量为指标绘制释放曲线。【结果】所制缓释颗粒的水杨酸释放曲线都遵循一个趋势:水杨酸释放率在前一段时间呈快速增长,转折点之后增长速度趋于平缓。根据试验结果分析,粗粒径的黄原胶溶胀更缓慢,对内容物的释放也会更慢。缓释颗粒直径较小时最终释放的百分比更高但由于比表面积大释放也更快,颗粒直径过大时最终释放的百分比会降低且持续时间也不会延长,最终选定造粒直径8 mm。对粘合剂PVA溶液的使用量的研究结果显示,在选取的三种PVA溶液浓度中,以浓度为4%的PVA溶液进行造粒、混合粉末与4%PVA溶液的比例(w/w)以1.1∶1为宜。四种不同组成的配方经优化后缓释效果最好的比例分别为:XG∶SA=3∶1,在去离子水中释放持续约2.5天;XG∶AS∶SA=3∶1∶1,在去离子水中释放持续时间2.5天;XG∶硬脂酸∶SA=1∶1∶1,去离子水中持续时间约为3天;XG∶CS∶SA=3∶1∶1,在去离子水中可持续4天,而在土柱中释放持续可达36天左右。【结论】使用0.178 mm粒径的黄原胶粉末,在XG∶CS∶SA=3∶1∶1,造粒直径8mm,以4%PVA溶液进行粘合造粒的条件下,所得缓释颗粒的土柱淋溶释放时间可长达36天,为本试验所得释放时间最长的缓释体系。该缓释系统成本较低廉,制作方法简单,对环境友好。 展开更多
关键词 黄原胶 水杨酸 聚乙烯醇 缓释
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基于杂交指示剂的无标记适配体电化学传感器用于铅离子检测
15
作者 张雨婷 陈灏翰 +2 位作者 李惠 王晓丽 周楠迪 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期1629-1635,共7页
为克服传统重金属铅离子(Pb^(2+))检测方法无法适应现场在线分析的缺陷,该研究以杂交指示剂亚甲基蓝(MB)作为电化学信号探针,以适配体作为Pb^(2+)识别原件构建无标记适配体电化学传感器。在金电极表面,通过先后修饰适配体及其互补序列c... 为克服传统重金属铅离子(Pb^(2+))检测方法无法适应现场在线分析的缺陷,该研究以杂交指示剂亚甲基蓝(MB)作为电化学信号探针,以适配体作为Pb^(2+)识别原件构建无标记适配体电化学传感器。在金电极表面,通过先后修饰适配体及其互补序列cDNA形成双链,随后吸附在双链间的MB通过差分脉冲伏安法产生强烈的电化学信号。当Pb^(2+)存在时,适配体特异性捕获Pb^(2+)造成双链断开释放MB,从而造成电信号降低,实现对Pb^(2+)的定量检测。构建的电化学传感器对Pb^(2+)的线性范围为0.1~100000μg/L,检出限低至33.4 ng/L,对牛奶和湖水样品的加标回收率分别为87.1%~115%和106%~108%,相对标准偏差(RSD)分别为10%~13%和5.0%~9.5%。该方法构建的无标记适配体电化学传感器具有制备简单、成本低廉、灵敏快捷等优点,有望应用于环境及食品工业中Pb^(2+)的现场分析。 展开更多
关键词 铅离子 适配体 电化学传感器 杂交指示剂
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单一内标定量核磁法测定肺炎链球菌多糖抗原中荚膜多糖、C-多糖和磷含量
16
作者 郭吉茹 秦春君 +4 位作者 胡静 曹欣 徐永学 刘建凯 尹健 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期472-477,共6页
肺炎糖疫苗在预防由肺炎链球菌引起的肺炎和脑膜炎等疾病中发挥关键作用。荚膜多糖、C-多糖和磷含量是疫苗研发和生产中多糖抗原质量控制的重要指标,研究发展了基于单一内标物六甲基磷酰三胺(hexamethylphosphoramide,HMPA)的定量1H NMR... 肺炎糖疫苗在预防由肺炎链球菌引起的肺炎和脑膜炎等疾病中发挥关键作用。荚膜多糖、C-多糖和磷含量是疫苗研发和生产中多糖抗原质量控制的重要指标,研究发展了基于单一内标物六甲基磷酰三胺(hexamethylphosphoramide,HMPA)的定量1H NMR和31P NMR法,实现6A,6B,18C,19A,19F及23F型肺炎链球菌多糖抗原中荚膜多糖、C-多糖和磷含量的同步测定。利用内参物比较法,探究了多糖溶解性质对定量核磁测定的影响,发现定量1H NMR的测定结果受到多糖水溶液黏度和浓度的影响。发现高黏度多糖在3~15 mg/mL,低黏度多糖在5-25 mg/mL是最适检测液浓度范围。该“一内标三定量”NMR法具有良好的精密度、特异性和准确度,为肺炎链球菌疫苗的质量控制提供了一种有价值的新策略。 展开更多
关键词 肺炎链球菌 荚膜多糖 定量1H NMR 定量31P NMR C-多糖 磷
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不同培养方式对三种典型食用菌营养品质的影响 被引量：1
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作者 李丽 张静 +5 位作者 明松 崔家豪 徐萌萌 陈磊 石贵阳 丁重阳 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第13期298-306,I0001,I0002,共11页
为了比较研究不同培养方式对食用菌营养品质的影响,该论文系统分析了3种典型食用菌猴头菇、榆黄菇、茶树菇液体发酵菌丝体和固体栽培不同潮次子实体的功能代谢产物。研究发现,相较于固体栽培子实体,同株菌液体发酵菌丝体多糖产量较高;... 为了比较研究不同培养方式对食用菌营养品质的影响,该论文系统分析了3种典型食用菌猴头菇、榆黄菇、茶树菇液体发酵菌丝体和固体栽培不同潮次子实体的功能代谢产物。研究发现,相较于固体栽培子实体,同株菌液体发酵菌丝体多糖产量较高;且菌丝体多糖分子质量均明显小于相应菌株前三潮子实体;3种食用菌菌丝体多糖的单糖组成中存在鼠李糖,而相应子实体中均未检测到,而茶树菇菌丝体多糖的单糖组成还检测到木糖和甘露糖组分。此外,菌丝体氨基酸组成、核苷类物质组成与相应子实体组分一致,但榆黄菇菌丝体蛋白质含量明显少于其子实体,猴头菇和茶树菇菌丝体核苷类物质均明显少于同一菌株的不同潮次子实体。多酚、麦角固醇、麦角硫因同时存在于菌丝体和子实体,但3种食用菌菌丝体中这些化合物的含量小于同一菌株的不同潮次子实体。由此,不同培养方式、不同潮次对食用菌营养品质均有不同程度的影响,不同培养方式对食用菌营养品质影响较大。液体发酵在生产多糖上具有显著优势,菌丝体和子实体都是理想的蛋白来源和补充剂,固体栽培方式在生产多酚、三萜、麦角硫因、麦角固醇、核苷这些小分子代谢产物上优于液体发酵。这对于将食用菌子实体和菌丝体深度开发为不同属性的、不同功效的功能性食品和膳食补充剂奠定了重要的理论依据。 展开更多
关键词 猴头菇 榆黄菇 茶树菇 菌丝体 子实体
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新型一氧化氮比率型纳米探针的构建及性能研究
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作者 王晓丽 刘浩 +3 位作者 杜龙啸 吴可馨 张雨婷 周楠迪 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期247-253,共7页
该文首先通过两步化学反应合成NO识别分子3,4-二氨基苯硫醇(DABT),然后制备具有强表面拉曼增强散射(SERS)效应的银包金纳米星(AuNSs@Ag)材料,并通过Ag—S键对其进行DABT修饰,制备了比率型SERS纳米探针AuNSs@Ag-DABT。利用透射电子显微... 该文首先通过两步化学反应合成NO识别分子3,4-二氨基苯硫醇(DABT),然后制备具有强表面拉曼增强散射(SERS)效应的银包金纳米星(AuNSs@Ag)材料,并通过Ag—S键对其进行DABT修饰,制备了比率型SERS纳米探针AuNSs@Ag-DABT。利用透射电子显微镜、水合粒径、Zeta电位以及紫外吸收光谱对纳米探针进行表征,并开展了NO的定量检测。结果表明:构建的AuNSs@Ag-DABT纳米探针表面有尖锐突出的星状结构,尺寸约为80 nm。NO存在时,DABT与NO发生反应并在541 cm^(-1)附近出现一个新的拉曼峰(三唑环),而在1078 cm^(-1)处的拉曼峰(C—S离面弯曲峰)强度保持不变,因此可以根据I_(541)/I_(1078)的比值定量检测NO。在最优条件下,I541/I1078的比值与NO浓度在10~60 nmol/L范围内表现出良好的线性响应,检出限为3.89 nmol/L。选择性实验表明该比率型SERS纳米探针对NO响应具有良好的专一性和抗干扰性。 展开更多
关键词 一氧化氮 表面拉曼增强散射 纳米探针 定量检测
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哈茨木霉产水解热凝胶的内切β-1,3-葡聚糖酶的分离纯化 被引量：5
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作者 徐敏 李晶 +4 位作者 郑志永 朱莉 詹晓北 李珊 张洪涛 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期157-161,共5页
结合多种分离方法,从哈茨木霉(Trichoderma harzianum Rifai ACCC30371)的发酵产物中分离得到一种对不溶性多糖热凝胶具有较高水解活性的内切β-1,3-葡聚糖酶。结果表明,哈茨木霉发酵液经50%饱和度硫酸铵沉淀预处理后,依次经过HiPrep 26... 结合多种分离方法,从哈茨木霉(Trichoderma harzianum Rifai ACCC30371)的发酵产物中分离得到一种对不溶性多糖热凝胶具有较高水解活性的内切β-1,3-葡聚糖酶。结果表明,哈茨木霉发酵液经50%饱和度硫酸铵沉淀预处理后,依次经过HiPrep 26/10 desalting层析柱脱盐、QFF阴离子交换层析柱去除杂质蛋白,最终经Superdex 75凝胶柱纯化获得纯度较高的内切β-1,3-葡聚糖酶。最终酶活回收率为6.63%,内切酶比酶活由6.86U/mg提高到133.01U/mg,纯化倍数达到19.39倍。MALDI-TOF-TOF鉴定结果表明,该内切酶与产自绿色木霉的endoglucanase存在较高的同源性。 展开更多
关键词 哈茨木霉 β-1 3-葡聚糖内切酶 热凝胶 分离纯化
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海带岩藻多糖的提取工艺优化及初步结构分析 被引量：6
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作者 李国莹 袁方 +2 位作者 罗玮 李汉广 余晓斌 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2014年第20期312-316,321,共6页
采用高压均质与复合酶结合的方法提取海带岩藻多糖,在单因素实验的基础上,选料水比、酶用量、酶作用pH为自变量,以岩藻多糖得率为响应值,利用Box-Behnken实验设计和响应面分析法,优化得岩藻多糖最佳提取工艺条件为:料水比1∶35,酶解pH5.... 采用高压均质与复合酶结合的方法提取海带岩藻多糖,在单因素实验的基础上,选料水比、酶用量、酶作用pH为自变量,以岩藻多糖得率为响应值,利用Box-Behnken实验设计和响应面分析法,优化得岩藻多糖最佳提取工艺条件为:料水比1∶35,酶解pH5.32,酶用量为2.5%,在此条件下,岩藻多糖得率为14.53%±0.05%;利用HPGFC测定岩藻多糖分子量为639、248、79ku;利用IC-PAD检测岩藻多糖的各组分及含量为:岩藻糖42.81%、鼠李糖1.95%、阿拉伯糖1.57%、半乳糖31.35%、葡萄糖3.30%、木糖5.56%、甘露糖13.30%。 展开更多
关键词 岩藻多糖 响应面 优化 结构分析
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