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九株谷氨酸生产菌的生物学特性研究
1
作者
杜巧燕
郑璞
+1 位作者
孙志浩
何毅清
《食品工业科技》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第12期185-188,共4页
【目的】研究九株谷氨酸生产菌的生物学特性,为具有广域pH耐受性的谷氨酸高产菌筛选提供实验依据。【方法】考察九株菌的低pH生长、高pH产酸特性;对磺胺胍、酮基丙二酸、丙二酸和香豆素的耐受性以及发酵特性。【结果】Corynebacterium g...
【目的】研究九株谷氨酸生产菌的生物学特性,为具有广域pH耐受性的谷氨酸高产菌筛选提供实验依据。【方法】考察九株菌的低pH生长、高pH产酸特性;对磺胺胍、酮基丙二酸、丙二酸和香豆素的耐受性以及发酵特性。【结果】Corynebacterium glutamicumS9114、Corynebacterium glutamicumATCC13761、Corynebacterium glutamicumT613-85均能在pH3·9下生长,而在pH10·5时S9114、Corynebacterium acetoacidophilum ATCC13870、T613-85依然能够产酸;抗性平板上具有明显生长优势的菌株如下:磺胺胍:S9114;酮基丙二酸:S9114、ATCC13870;丙二酸:ATCC13761、ATCC13870、Microbacterium ammoniaphilumATCC15354;香豆素:除ATCC13761和Corynebacterium melassecolaATCC17966,其他耐受程度相似;九株菌中产酸能力最强的是S9114,其次是T613-85。【结论】以S9114为出发菌株进行改造,确定筛选平板为含磺胺胍2%、酮基丙二酸0·25%、丙二酸1·6%、香豆素0·2%的低pH梯度(pH3·6～4·0)平板和高pH梯度平板(pH10·5～11·2)。
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关键词
谷氨酸生产菌
PH
抗性
产酸
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职称材料
古细菌Pyrococcus furiosus嗜热α-淀粉酶基因在大肠杆菌中的表达
被引量：
2
2
作者
沈微
王正祥
+1 位作者
刘吉泉
诸葛健
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第3期10-14,共5页
用PCR方法从嗜热古细菌Pyrococcusfuriosus的基因组DNA中扩增出胞外α 淀粉酶完整结构基因 ,插入表达载体pET2 8a中构建成质粒 pET amy(sig+) ,以质粒pET amy(sig +)为底物扩增出不含信号序列的α 淀粉酶成熟肽基因片断 ,获得质粒 pET a...
用PCR方法从嗜热古细菌Pyrococcusfuriosus的基因组DNA中扩增出胞外α 淀粉酶完整结构基因 ,插入表达载体pET2 8a中构建成质粒 pET amy(sig+) ,以质粒pET amy(sig +)为底物扩增出不含信号序列的α 淀粉酶成熟肽基因片断 ,获得质粒 pET amy(sig ) ,将重组质粒分别转化大肠杆菌BL2 1 (DE3)。在T7启动子和lac操纵子控制下 ,通过IPTG的诱导在重组大肠杆菌细胞内分别表达出含信号肽和不含信号肽的融合蛋白。其中不含信号肽的融合蛋白具有与P .furio sus产生的胞外α 淀粉酶相似的酶学性质 :最适pH为 5 .0 ,最适温度约为 95℃ ,在 1 2 1℃下热处理 1h酶活仍能保持 50 %以上 ;
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关键词
“Pyrococcus
furiosus”
嗜热α-淀粉酶
基因
PCR方法
融合表达
大肠杆菌细胞
酶学性质
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职称材料
大肠杆菌表达古菌基因的发酵条件研究
被引量：
1
3
作者
丁兰宝
牛丹丹
+1 位作者
石贵阳
王正祥
《食品工业科技》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第8期97-99,102,共4页
对重组大肠杆菌BL21(DE3)表达古菌基因的发酵条件进行了研究,最终确定葡萄糖浓度为10g/L,蛋白胨浓度为19g/L,酵母膏浓度为11.5g/L,硫酸铵浓度为4g/L,磷酸盐浓度为100mmol/L,硫酸镁浓度为10mmol/L。当菌体密度(OD600)达到7.0左右时,加入...
对重组大肠杆菌BL21(DE3)表达古菌基因的发酵条件进行了研究,最终确定葡萄糖浓度为10g/L,蛋白胨浓度为19g/L,酵母膏浓度为11.5g/L,硫酸铵浓度为4g/L,磷酸盐浓度为100mmol/L,硫酸镁浓度为10mmol/L。当菌体密度(OD600)达到7.0左右时,加入乳糖至终浓度1g/L,继续诱导培养8h,古菌高温酸性α-淀粉酶酶活力最高达192U/mL。在分析了该菌对葡萄糖利用情况的基础上,对该菌进行了pH-stat流加培养,36h菌体浓度与高温酸性α-淀粉酶活力分别达到67和600U/mL,比摇瓶最好结果分别提高了5.1和3.1倍。
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关键词
重组大肠杆菌
高温酸性α-淀粉酶
发酵奈件
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职称材料
题名
九株谷氨酸生产菌的生物学特性研究
1
作者
杜巧燕
郑璞
孙志浩
何毅清
机构
江南大学生物工程学院和教育部工业生物技术重点实验室
新加坡义安理工
学院
生命科学与化学工艺学
学院
出处
《食品工业科技》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第12期185-188,共4页
基金
国家高技术研究发展计划("863"计划)重点项目(2006AA020301)
文摘
【目的】研究九株谷氨酸生产菌的生物学特性,为具有广域pH耐受性的谷氨酸高产菌筛选提供实验依据。【方法】考察九株菌的低pH生长、高pH产酸特性;对磺胺胍、酮基丙二酸、丙二酸和香豆素的耐受性以及发酵特性。【结果】Corynebacterium glutamicumS9114、Corynebacterium glutamicumATCC13761、Corynebacterium glutamicumT613-85均能在pH3·9下生长,而在pH10·5时S9114、Corynebacterium acetoacidophilum ATCC13870、T613-85依然能够产酸;抗性平板上具有明显生长优势的菌株如下:磺胺胍:S9114;酮基丙二酸:S9114、ATCC13870;丙二酸:ATCC13761、ATCC13870、Microbacterium ammoniaphilumATCC15354;香豆素:除ATCC13761和Corynebacterium melassecolaATCC17966,其他耐受程度相似;九株菌中产酸能力最强的是S9114,其次是T613-85。【结论】以S9114为出发菌株进行改造,确定筛选平板为含磺胺胍2%、酮基丙二酸0·25%、丙二酸1·6%、香豆素0·2%的低pH梯度(pH3·6～4·0)平板和高pH梯度平板(pH10·5～11·2)。
关键词
谷氨酸生产菌
PH
抗性
产酸
Keywords
glutamate acidproducing bacteria
pH
resistance
acid production
分类号
TS201.2 [轻工技术与工程—食品科学]
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职称材料
题名
古细菌Pyrococcus furiosus嗜热α-淀粉酶基因在大肠杆菌中的表达
被引量：
2
2
作者
沈微
王正祥
刘吉泉
诸葛健
机构
江南大学生物工程学院和教育部工业生物技术重点实验室
出处
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第3期10-14,共5页
基金
教育部骨干教师资助计划(No.1696)
文摘
用PCR方法从嗜热古细菌Pyrococcusfuriosus的基因组DNA中扩增出胞外α 淀粉酶完整结构基因 ,插入表达载体pET2 8a中构建成质粒 pET amy(sig+) ,以质粒pET amy(sig +)为底物扩增出不含信号序列的α 淀粉酶成熟肽基因片断 ,获得质粒 pET amy(sig ) ,将重组质粒分别转化大肠杆菌BL2 1 (DE3)。在T7启动子和lac操纵子控制下 ,通过IPTG的诱导在重组大肠杆菌细胞内分别表达出含信号肽和不含信号肽的融合蛋白。其中不含信号肽的融合蛋白具有与P .furio sus产生的胞外α 淀粉酶相似的酶学性质 :最适pH为 5 .0 ,最适温度约为 95℃ ,在 1 2 1℃下热处理 1h酶活仍能保持 50 %以上 ;
关键词
“Pyrococcus
furiosus”
嗜热α-淀粉酶
基因
PCR方法
融合表达
大肠杆菌细胞
酶学性质
Keywords
Pyrococcus furious, extracellular α amylase, fusion expression
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
大肠杆菌表达古菌基因的发酵条件研究
被引量：
1
3
作者
丁兰宝
牛丹丹
石贵阳
王正祥
机构
江南大学生物工程学院和教育部工业生物技术重点实验室
出处
《食品工业科技》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第8期97-99,102,共4页
基金
新世纪优秀人才支持计划(NCET-04-9704)
国家高技术发展计划(2006AA020204)资助
文摘
对重组大肠杆菌BL21(DE3)表达古菌基因的发酵条件进行了研究,最终确定葡萄糖浓度为10g/L,蛋白胨浓度为19g/L,酵母膏浓度为11.5g/L,硫酸铵浓度为4g/L,磷酸盐浓度为100mmol/L,硫酸镁浓度为10mmol/L。当菌体密度(OD600)达到7.0左右时,加入乳糖至终浓度1g/L,继续诱导培养8h,古菌高温酸性α-淀粉酶酶活力最高达192U/mL。在分析了该菌对葡萄糖利用情况的基础上,对该菌进行了pH-stat流加培养,36h菌体浓度与高温酸性α-淀粉酶活力分别达到67和600U/mL,比摇瓶最好结果分别提高了5.1和3.1倍。
关键词
重组大肠杆菌
高温酸性α-淀粉酶
发酵奈件
Keywords
recombinant E.coli
thermostable acidic α-amylase
fermentation conditions
分类号
TS201.3 [轻工技术与工程—食品科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
九株谷氨酸生产菌的生物学特性研究
杜巧燕
郑璞
孙志浩
何毅清
《食品工业科技》
CAS
CSCD
北大核心
2010
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
古细菌Pyrococcus furiosus嗜热α-淀粉酶基因在大肠杆菌中的表达
沈微
王正祥
刘吉泉
诸葛健
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2003
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
大肠杆菌表达古菌基因的发酵条件研究
丁兰宝
牛丹丹
石贵阳
王正祥
《食品工业科技》
CAS
CSCD
北大核心
2008
1
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