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A群猪轮状病毒微滴式数字PCR检测方法的建立及其应用
1
作者
陈冰冰
蔡蔚游
+3 位作者
刘玉彤
王修武
孙守湖
贺东生
《畜牧兽医学报》
北大核心
2025年第8期4095-4100,共6页
旨在建立一种特异、灵敏的A群猪轮状病毒(porcine rotavirus A,PoRVA)微滴式数字PCR(ddPCR)新型检测方法。本研究根据GenBank中PoRVA的VP 6基因保守序列,设计猪轮状病毒特异性引物和探针,优化其反应条件,从而构建PoRVA的ddPCR检测方法,...
旨在建立一种特异、灵敏的A群猪轮状病毒(porcine rotavirus A,PoRVA)微滴式数字PCR(ddPCR)新型检测方法。本研究根据GenBank中PoRVA的VP 6基因保守序列,设计猪轮状病毒特异性引物和探针,优化其反应条件,从而构建PoRVA的ddPCR检测方法,并测定其特异性、灵敏度、重复性以及临床样品试验。优化反应条件结果显示,最佳引物浓度为600 nmol·L^(-1),最佳探针浓度为300 nmol·L^(-1);退火温度在56℃时,病毒阳性液滴拷贝数最高;特异性结果显示,自行建立的检测方法仅能检出PoRVA,而猪丁型冠状病毒、猪流行性腹泻病毒等七种对照病毒核酸检测结果均为阴性;灵敏度结果显示,该方法最低检测限度为3.97 copies·μL^(-1),比普通PCR(最低检测限度3970 copies·μL^(-1))和荧光定量PCR(最低检测限度39.7 copies·μL^(-1))分别高1000倍和10倍;重复性结果显示,组内和组间变异系数小于10%;对142份临床样品检测显示,ddPCR检出阳性率高于qPCR和PCR。综上,本研究自行建立的PoRVA ddPCR新型检测方法特异性强、灵敏度高、重复性好,适用于猪轮状病毒早期感染诊断和流行病学调查,可为日后持续性监控猪轮状疫情提供可靠的手段。
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关键词
A群猪轮状病毒
微滴式数字PCR
检测方法
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职称材料
汕头市澄海狮头鹅产业高质量发展研究
2
作者
纪灿鑫
杨晓锐
+6 位作者
张志凯
蔡蔚游
吴祥宏
黄紫燕
陈玲红
李淑薇
黄裕鑫
《广东蚕业》
2025年第9期56-58,共3页
汕头市澄海狮头鹅作为地方特色畜禽品种,已经成为驱动区域农业经济发展与助力乡村振兴的重要载体。文章阐述了澄海狮头鹅产业的发展现状,分析了其当前面临的核心问题,具体包括养殖技术滞后、产品加工附加值偏低、销售渠道较为单一、产...
汕头市澄海狮头鹅作为地方特色畜禽品种,已经成为驱动区域农业经济发展与助力乡村振兴的重要载体。文章阐述了澄海狮头鹅产业的发展现状,分析了其当前面临的核心问题,具体包括养殖技术滞后、产品加工附加值偏低、销售渠道较为单一、产业配套支撑乏力等,提出了推动养殖模式高效化、加快产品深加工创新发展、推进销售多元化、加大产业配套支撑力度等优化发展路径,以期为澄海狮头鹅产业高质量发展提供理论依据与实践指引,助力广东省“百千万工程”的有效实施。
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关键词
乡村振兴
狮头鹅
高质量发展
汕头市
澄海区
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职称材料
题名
A群猪轮状病毒微滴式数字PCR检测方法的建立及其应用
1
作者
陈冰冰
蔡蔚游
刘玉彤
王修武
孙守湖
贺东生
机构
华南农业大学兽医学院
汕头市澄海区动物疫病预防控制中心
岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分
中心
出处
《畜牧兽医学报》
北大核心
2025年第8期4095-4100,共6页
基金
岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心项目(P20211154-0302)。
文摘
旨在建立一种特异、灵敏的A群猪轮状病毒(porcine rotavirus A,PoRVA)微滴式数字PCR(ddPCR)新型检测方法。本研究根据GenBank中PoRVA的VP 6基因保守序列,设计猪轮状病毒特异性引物和探针,优化其反应条件,从而构建PoRVA的ddPCR检测方法,并测定其特异性、灵敏度、重复性以及临床样品试验。优化反应条件结果显示,最佳引物浓度为600 nmol·L^(-1),最佳探针浓度为300 nmol·L^(-1);退火温度在56℃时,病毒阳性液滴拷贝数最高;特异性结果显示,自行建立的检测方法仅能检出PoRVA,而猪丁型冠状病毒、猪流行性腹泻病毒等七种对照病毒核酸检测结果均为阴性;灵敏度结果显示,该方法最低检测限度为3.97 copies·μL^(-1),比普通PCR(最低检测限度3970 copies·μL^(-1))和荧光定量PCR(最低检测限度39.7 copies·μL^(-1))分别高1000倍和10倍;重复性结果显示,组内和组间变异系数小于10%;对142份临床样品检测显示,ddPCR检出阳性率高于qPCR和PCR。综上,本研究自行建立的PoRVA ddPCR新型检测方法特异性强、灵敏度高、重复性好,适用于猪轮状病毒早期感染诊断和流行病学调查,可为日后持续性监控猪轮状疫情提供可靠的手段。
关键词
A群猪轮状病毒
微滴式数字PCR
检测方法
Keywords
porcine rotavirus A
droplet digital PCR
detection method
分类号
S855.3 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
汕头市澄海狮头鹅产业高质量发展研究
2
作者
纪灿鑫
杨晓锐
张志凯
蔡蔚游
吴祥宏
黄紫燕
陈玲红
李淑薇
黄裕鑫
机构
肇庆学院食品与制药工程学院
出处
《广东蚕业》
2025年第9期56-58,共3页
基金
2024年肇庆学院校级共青团研究课题“发挥共青团优势促进大学生就业创业的路径探索”(TW202404)。
文摘
汕头市澄海狮头鹅作为地方特色畜禽品种,已经成为驱动区域农业经济发展与助力乡村振兴的重要载体。文章阐述了澄海狮头鹅产业的发展现状,分析了其当前面临的核心问题,具体包括养殖技术滞后、产品加工附加值偏低、销售渠道较为单一、产业配套支撑乏力等,提出了推动养殖模式高效化、加快产品深加工创新发展、推进销售多元化、加大产业配套支撑力度等优化发展路径,以期为澄海狮头鹅产业高质量发展提供理论依据与实践指引,助力广东省“百千万工程”的有效实施。
关键词
乡村振兴
狮头鹅
高质量发展
汕头市
澄海区
分类号
F326.3 [经济管理]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
A群猪轮状病毒微滴式数字PCR检测方法的建立及其应用
陈冰冰
蔡蔚游
刘玉彤
王修武
孙守湖
贺东生
《畜牧兽医学报》
北大核心
2025
0
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职称材料
2
汕头市澄海狮头鹅产业高质量发展研究
纪灿鑫
杨晓锐
张志凯
蔡蔚游
吴祥宏
黄紫燕
陈玲红
李淑薇
黄裕鑫
《广东蚕业》
2025
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参考文献
引证文献
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