汕头地区产CTX-M型ESBLs肺炎克雷伯菌分析

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作者 陈淑贞 石蓉林 +2 位作者 姚芬 蔡应木 钱元恕 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期609-611,642,共4页

目的了解汕头地区产CTX-M型ESBLs肺炎克雷伯菌的情况。方法用通用引物blaCTX-M对已确定为产ESBLs的肺炎克雷伯菌进行PCR扩增、脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析,检测其对常见抗菌药物的耐药性。结果本地区CTX-M型ESBLs肺炎克雷伯菌检出率为30.1... 目的了解汕头地区产CTX-M型ESBLs肺炎克雷伯菌的情况。方法用通用引物blaCTX-M对已确定为产ESBLs的肺炎克雷伯菌进行PCR扩增、脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析,检测其对常见抗菌药物的耐药性。结果本地区CTX-M型ESBLs肺炎克雷伯菌检出率为30.1%(25/83),标本来源主要为痰液(24株);分布的临床科室为新生儿科、呼吸内科、神经外科、神经内科、儿科、外科ICU、心血管内科及普外科。与其它基因型同时存在较普遍。药敏结果表明对头孢噻肟、头孢曲松、头孢吡肟、氨曲南、阿米卡星、环丙沙星的敏感率分别为32.0%、4.0%、56.0%、36.0%、12.0%、48.0%,对头孢他啶、哌拉西林/三唑巴坦耐药率分别达56.0%和44.0%。随机将8株产CTX-M型ESBLs的肺炎克雷伯菌作PFGE分析,结果显示2株为相同的PFGE型,其它为不相关的PFGE型。结论产CTX-M型ESBLs肺炎克雷伯菌广泛分布于临床各科室,绝大多数菌株来自不同克隆株;多种基因型ESBLs的存在提高了它对抗生素的耐药水平。加强对产ESBLs细菌的检测及分子流行病学研究,对控制院内感染的流行十分重要。 展开更多

关键词 超广谱Β-内酰胺酶 blaCTX-M基因 耐药

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槐提取物和维生素C组合物对紫外照射诱导的HaCaT细胞光损伤的保护作用 被引量：2

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作者 孙璇 李萍 +4 位作者 孙静 郑嘉妮 余丹阳 张艳美 陈朋 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2024年第1期303-309,共7页

本研究旨在探讨槐提取物和维生素C(Vitamin C,V_(C))对紫外线照射引起的HaCaT细胞光损伤的保护作用。通过体外培养HaCaT细胞并将其分为不同组别:对照组(未接受紫外辐照,无槐提取物、V_(C)或二者组合物处理)、紫外线辐射组、125μg/mL槐... 本研究旨在探讨槐提取物和维生素C(Vitamin C,V_(C))对紫外线照射引起的HaCaT细胞光损伤的保护作用。通过体外培养HaCaT细胞并将其分为不同组别:对照组(未接受紫外辐照,无槐提取物、V_(C)或二者组合物处理)、紫外线辐射组、125μg/mL槐提取物(接受紫外辐照及槐提取物处理)、125μg/mL维生素C(接受紫外辐照及维生素C处理)以及125μg/mL组合物组(接受紫外辐照及组合物处理,槐提取物和V_(C)质量比为1:1)。采用荧光染色和酶标仪检测技术来评估槐提取物、V_(C)及二者组合物对紫外照射引起的HaCaT细胞产生的活性氧物质(ROS)和线粒体ROS的抑制率。利用免疫荧光染色和酶联免疫吸附法检测槐提取物、V_(C)和组合物对紫外照射引起的HaCaT细胞中环丁烷嘧啶二聚体(Cyclobutane pyrimidine dimers,CPDs)和细胞炎症因子IL-6的表达水平。结果显示,槐提取物、V_(C)和组合物对UVA处理后HaCaT细胞生成的总ROS抑制率分别为38.23%±9.23%、27.20%±6.87%及64.13%±4.08%,与单独使用槐提取物或V_(C)处理相比,组合物显著提高总ROS抑制率(P<0.01)。槐提取物、V_(C)和组合物对线粒体ROS(Mitochondrial DNA,mtROS)的抑制率分别为50.29%±4.92%、38.81%±8.66%及84.74%±3.68%,与单独使用槐提取物或V_(C)处理相比,组合物极显著提高mtROS抑制率(P<0.01)。此外,在UVB照射后,槐提取物、V_(C)及组合物可极显著减少CPDs的生成(P<0.01),这种效应在组合物组效果更为显著(与槐提取物组比较P<0.05;与V_(C)组比较P<0.01)。同时,槐提取物和组合物显著降低UVA照射后炎症因子IL-6的分泌(P<0.01;P<0.05),表明槐提取物及组合物具有抗炎作用。本研究结果表明槐提取物和维生素C组合物能减轻紫外线引起的氧化应激损伤和炎症反应,为未来体内研究和开发具有健康益处的槐提取物和V_(C)组合物提供实验支持。 展开更多

关键词 槐提取物 维生素C HACAT细胞 抗氧化活性 炎症因子

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绿茶及其提取物抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌作用研究 被引量：23

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作者 华德兴 彭青 +2 位作者 曾香连 姚芬 钱元恕 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期228-233,共6页

目的研究绿茶及提取物对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的抗菌作用并分析其主要抗菌成分。方法采用琼脂稀释法测定各种茶叶的水浸出物及茶叶的主要成分对MRSA的MIC。纸片扩散法观察绿茶浸出物和茶叶主要成份与抗生素合用对MRSA的协同... 目的研究绿茶及提取物对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的抗菌作用并分析其主要抗菌成分。方法采用琼脂稀释法测定各种茶叶的水浸出物及茶叶的主要成分对MRSA的MIC。纸片扩散法观察绿茶浸出物和茶叶主要成份与抗生素合用对MRSA的协同抗菌情况。结果①绿茶浸出物对MRSA的MIC范围为0.125-0.5%,青茶浸出物为0.125-0.5%,白茶浸出物为0.0625-0.25%,红茶浸出物为0.5%,黑茶浸出物为0.25-0.5%。②茶多酚对MRSA的MIC范围为128-256μg/mL,茶色素为256-512μg/mL,茶多糖为512-1024μg/mL,茶皂素和咖啡因则均大于1024μg/mL。③青霉素、苯唑西林、氨苄西林、头孢他啶、头孢替唑、米诺环素、四环素与绿茶浸出物合用的抑菌圈明显大于单用抗生素的抑菌圈,红霉素和氯霉素单用/合用的抑菌圈相同,环丙沙星加入绿茶浸出物后抑菌圈反而减小。④茶多糖、茶皂素、茶色素、咖啡因与苯唑西林单用/合用的抑菌圈均相同,茶多酚与苯唑西林合用的抑菌圈明显大于单用苯唑西林的抑菌圈,表儿茶素没食子酸酯(ECg)/表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCg)与苯唑西林合用的抑菌圈明显大于各自单用的抑菌圈。结论各种茶叶对MRSA均有一定的抗菌作用,其中绿茶和白茶的抗菌作用最强。绿茶抗MRSA的主要成分为茶多酚,并且茶多酚对β-内酰胺类抗生素和四环素抗MRSA有增效作用,但对其它类抗生素呈无关或拮抗作用。茶多酚中的2个单体ECg和EGCg能增强苯唑西林的抗MRSA作用。 展开更多

关键词 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 茶 绿茶 抗菌

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耐甲氧西林金葡菌对抗菌药物的耐药表型和基因型分析 被引量：16

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作者 华德兴 彭青 +2 位作者 黄源春 姚芬 钱元恕 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期128-133,共6页

目的了解来自汕头和北京地区的67株耐甲氧西林金葡菌fMRSA）的耐药情况及耐药机制，并分析耐药表型与基因型的一致情况。方法以琼脂稀释法测定24种抗菌药物对MRSA的体外抗菌活性，PCR扩增MRSA的耐药基因，nitrocefin测定细菌产β-内酰... 目的了解来自汕头和北京地区的67株耐甲氧西林金葡菌fMRSA）的耐药情况及耐药机制，并分析耐药表型与基因型的一致情况。方法以琼脂稀释法测定24种抗菌药物对MRSA的体外抗菌活性，PCR扩增MRSA的耐药基因，nitrocefin测定细菌产β-内酰胺酶的情况。结果67株MRSA除了对氯霉素和多西环素的耐药率较低，分别为3％和7．5％，对万古霉素、米诺环素和利凡诺100％敏感外，对利福平的耐药率为52．2％，对四环素的耐药率为77．6％，而对于其它包括青霉素、第1～4代头孢菌素、单环β-内酰胺类、碳青霉烯类、氨基糖苷类和磺胺类的耐药率均在80％～90％以上，氨苄西林加酶抑制剂以后则耐药程度有所降低。qacA／B、mecA、tetM、NorA、gyrA、aac（6）／aph（2），aphp，III和β-内酰胺酶检出率分别为11．9％、95．5％、70．1％、4．5％、10．4％、82．1％、73．1％和92．5％，未检出qacC、antr6-I、ant（2＂）-1、VanA和VanB耐药基因。67株MRSA均携带有多种耐药基因：同时携带2种耐药基因的有7株，3种的有10株，4种的有11株，5种的29株，6种的10株。结论67株MRSA耐药情况严重，并同时携带多种耐药基因。 展开更多

关键词 耐甲氧西林金葡菌 抗菌药物 表型 基因型

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氟哌啶醇季铵盐衍生物对血管平滑肌细胞钙离子的影响 被引量：32

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作者 韦日生 石刚刚 张映娜 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期54-56,共3页

目的　研究氟哌啶醇季铵盐衍生物 (F2 )对大鼠胸主动脉平滑肌细胞内钙离子荧光强度的影响。方法　用Ca2 +荧光染料Fluo 3 AM负载细胞 ,在激光扫描共聚焦显微镜上测定细胞内游离钙的变化。结果　在含氯化钙 (1 2 6mmol·L-1)的细胞... 目的　研究氟哌啶醇季铵盐衍生物 (F2 )对大鼠胸主动脉平滑肌细胞内钙离子荧光强度的影响。方法　用Ca2 +荧光染料Fluo 3 AM负载细胞 ,在激光扫描共聚焦显微镜上测定细胞内游离钙的变化。结果　在含氯化钙 (1 2 6mmol·L-1)的细胞外液中 ,30mmol·L-1KCl使细胞内钙荧光强度迅速增强 ,4种浓度F2 (0 1、1、10、10 0 μmol·L-1)作用 3min时 ,使KCl诱导细胞内钙荧光强度分别降至 6 4%± 9% ,(n=16 ,P <0 0 5 )、16 %± 5 % ,(n =2 0 ,P <0 0 1)、0 6 %±0 8% ,(n =2 0 ,P <0 0 1)、0 1%± 0 3 % ,(n =15 ,P <0 0 1) ,呈量效依赖关系。结论　F2 展开更多

关键词 氟哌啶醇委铵盐 血管平滑肌细胞 激光扫描共聚焦显微镜 钙离子

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Ecg/Egcg与β内酰胺类抗生素对MRSA的协同抗菌机制研究 被引量：10

6

作者 华德兴 彭青 +2 位作者 黄源春 姚芬 钱元恕 《中国感染与化疗杂志》 CAS 2010年第2期123-126,共4页

目的测定表儿茶素没食子酸酯(Ecg)/表没食子儿茶素没食子酸酯(Egcg)与β内酰胺类抗生素对耐甲氧西林金葡菌(MRSA)的协同抗菌作用,并探讨其作用机制。方法以微量稀释法测定Ecg、Egcg和β内酰胺类抗生素的体外协同抗MRSA作用;以RT-PCR技... 目的测定表儿茶素没食子酸酯(Ecg)/表没食子儿茶素没食子酸酯(Egcg)与β内酰胺类抗生素对耐甲氧西林金葡菌(MRSA)的协同抗菌作用,并探讨其作用机制。方法以微量稀释法测定Ecg、Egcg和β内酰胺类抗生素的体外协同抗MRSA作用;以RT-PCR技术检测Ecg和Egcg对自溶酶基因lytM和lgrA表达的影响;以蛋白免疫印迹法测定Egcg对MRSA的PBP2a蛋白表达的影响;测定Ecg和Egcg对β内酰胺酶的抑制情况,并与他唑巴坦的抑酶作用进行比较。结果50mg/L的Ecg/Egcg均能增强苯唑西林、头孢拉啶、头孢呋辛和美罗培南对MRSA的抗菌作用,并以与美罗培南的协同作用最强;且Ecg与β内酰胺类抗生素的协同效果比Egcg明显。随着Ecg和Egcg浓度的增高,MRSA的lytM、lgrA基因表达上调,同时Egcg可使MRSA-2菌PBP2a蛋白表达下调。浓度为256mg/L的他唑巴坦可完全抑制金葡菌的β内酰胺酶,而Egcg/Ecg对金葡菌β内酰胺酶的抑制作用很微弱。结论Ecg/Egcg联合β内酰胺类抗生素对MRSA的协同作用是由于Ecg/Egcg在抑制PBP2a的表达下调的同时使自溶酶lytM和lgrA基因的表达上调,导致自溶酶分泌增多,促使对细菌黏肽水解增加,从而协同β内酰胺类抗生素抑制细菌细胞壁的合成。 展开更多

关键词 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 表儿茶素没食子酸酯 表没食子儿茶素没食子酸酯 抗菌 机制

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肺炎克雷伯菌产ESBLs基因型分析 被引量：12

7

作者 陈淑贞 石蓉林 +2 位作者 姚芬 蔡应木 钱元恕 《中国感染与化疗杂志》 CAS 2006年第4期236-239,共4页

目的分析我院临床分离的肺炎克雷伯菌产ESBLs基因型,为指导临床合理用药提供依据。方法用琼脂稀释法检测10种抗菌药物对已确定为产ESBLs肺炎克雷伯菌的MIC,分别用TEM、SHV、CTX-M、OXA通用引物进行PCR扩增、产物克隆测序分析。结果83株... 目的分析我院临床分离的肺炎克雷伯菌产ESBLs基因型,为指导临床合理用药提供依据。方法用琼脂稀释法检测10种抗菌药物对已确定为产ESBLs肺炎克雷伯菌的MIC,分别用TEM、SHV、CTX-M、OXA通用引物进行PCR扩增、产物克隆测序分析。结果83株产ESBLs肺炎克雷伯菌中,产TEM型75株,SHV型41株,CTX-M型25株,OXA型9株。其中,同时产3种酶有13株,占15．7%；同时产2种酶有59株,占71．1%；仅11株产单1种酶,占13．2%。而9株同时产TEM、SHV和CTX-M型,测序结果为CTX-M-3,TEM-1及多种SHV型(SHV-12、SHV-28)。药敏结果表明,同时产2或3种酶的菌株比产单1种酶的菌株耐药性更严重。结论所分离产ESBLs肺炎克雷伯菌主要为TEM、SHV、CTX-M、OXA型,且同时存在产2～3种酶,应引起临床高度重视。 展开更多

关键词 肺炎克雷伯菌 超广谱Β内酰胺酶 TEM-1 CTX-M-3 SHV

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环丙沙星致痫大鼠脑脊液氨基酸含量的变化 被引量：10

8

作者 周义文 钱元恕 陆杰 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期295-298,共4页

目的　观察环丙沙星 (CPLX )致痫大鼠脑脊液 (CSF)中兴奋性氨基酸 [天冬氨酸 (Asp)、谷氨酸(Glu) ]和抑制性氨基酸 [γ 氨基丁酸 (GABA)、甘氨酸 (Gly) ]含量的变化 ,探讨CPLX致痫的发生机制。方法给雄性大鼠静脉注射CPLX 10 0mg/kg ,... 目的　观察环丙沙星 (CPLX )致痫大鼠脑脊液 (CSF)中兴奋性氨基酸 [天冬氨酸 (Asp)、谷氨酸(Glu) ]和抑制性氨基酸 [γ 氨基丁酸 (GABA)、甘氨酸 (Gly) ]含量的变化 ,探讨CPLX致痫的发生机制。方法给雄性大鼠静脉注射CPLX 10 0mg/kg ,于用药前 ,在小脑延髓池抽取CSF作为对照 ,用药后癫痫发作 40min时抽取CSF作为试验样本。CSF中氨基酸的含量用高效液相色谱法测定。结果　癫痫发作后 40min时 ,CSF中γ 氨基酸 (GABA)含量为 ( 1 72± 0 94μ)mol/L ,明显高于用药前的 ( 0 3 1± 0 2 3 ) μmol/L(P <0 0 1) ,而天冬氨酸 (Asp)、谷氨酸 (Glu)、甘氨酸 (Gly)的含量分别为 ( 9 64± 2 62 ) μmol/L、( 9 5 4± 8 5 8) μmol/L、( 18 96±2 84) μmol/L ,均明显低于用药前的 ( 14 5 7± 5 85 ) μmol/L、( 16 19± 7 5 6) μmol/L、( 2 7 66± 8 0 1) μmol/L(P<0 0 5～ 0 0 1)。结论　静注CPLX引起大鼠癫痫发作是由于CPLX明显影响了中枢神经系统内兴奋性氨基酸和抑制性氨基酸的代谢平衡 ,氨基酸含量的变化并可通过CSF中的氨基酸含量反映出来。 展开更多

关键词 氨基酸 脑脊液 环丙沙星 高效液相色谱法 癫痫

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透明质酸酶在细菌致病机制中的作用 被引量：11

9

作者 黄源春 钱元恕 焦晓阳 《中国感染与化疗杂志》 CAS 2008年第3期235-238,共4页

关键词 透明质酸酶 透明质酸 细菌 致病机制

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AmpC酶介导的铜绿假单胞菌耐药研究 被引量：6

10

作者 姚芬 张娟 +1 位作者 陈淑贞 钱元恕 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期441-444,共4页

目的了解AmpC酶在铜绿假单胞菌对β-内酰胺类抗生素耐药机制中所起的作用。方法选取同一患者治疗前后临床分离株,随机扩增多态性DNA(RAPD)对菌株进行基因分型,微量稀释法测定细菌对头孢他啶的最低抑菌浓度(MIC),头孢西丁三相试验和头孢... 目的了解AmpC酶在铜绿假单胞菌对β-内酰胺类抗生素耐药机制中所起的作用。方法选取同一患者治疗前后临床分离株,随机扩增多态性DNA(RAPD)对菌株进行基因分型,微量稀释法测定细菌对头孢他啶的最低抑菌浓度(MIC),头孢西丁三相试验和头孢西丁诱导试验检测AmpC酶产生情况。结果8组铜绿假单胞菌的RAPD分型完全一致,抗生素治疗后分离株对头孢他啶的MIC值较治疗前增加≥8倍,抗生素治疗前分离株头孢西丁三相试验均为阴性,其中6株菌株头孢西丁诱导试验阳性,而治疗后的分离株头孢西丁三相试验均呈阳性。结论β-内酰胺类抗生素治疗失败与AmpC酶被诱导后持续高产有关,对诱导高产酶阳性株引起的感染要避免使用AmpC酶的强诱导剂。 展开更多

关键词 AMPC酶 铜绿假单胞菌 耐药

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嗜麦芽窄食单胞菌耐药机制的研究进展 被引量：29

11

作者 彭青 钱元恕 《中国感染与化疗杂志》 CAS 2006年第3期209-211,共3页

关键词 嗜麦芽窄食单胞菌 多重耐药性 耐药机制

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SHV型β内酰胺酶新亚型SHV-71的发现 被引量：5

12

作者 李文芳 彭青 +2 位作者 黄源春 黄支密 钱元恕 《中国感染与化疗杂志》 CAS 2007年第6期437-440,共4页

目的了解鲍曼不动杆菌中SHV型β内酰胺酶的基因型及其耐药性。方法采用纸片扩散法(K-B法)测定5株鲍曼不动杆菌对13种抗菌药物的敏感性;设计SHV型β内酰胺酶引物,采用PCR法获得SHV型酶编码基因的片段,并将PCR扩增产物克隆入pMD18-T载体,... 目的了解鲍曼不动杆菌中SHV型β内酰胺酶的基因型及其耐药性。方法采用纸片扩散法(K-B法)测定5株鲍曼不动杆菌对13种抗菌药物的敏感性;设计SHV型β内酰胺酶引物,采用PCR法获得SHV型酶编码基因的片段,并将PCR扩增产物克隆入pMD18-T载体,以双脱氧链终止法测定核苷酸序列,确定亚型。结果药敏试验结果显示:5株鲍曼不动杆菌对氨苄西林、哌拉西林、头孢西丁、头孢他啶和氨曲南均耐药。3株菌SHV基因型扩增结果呈阳性,其中2株与SHV-12的序列100%相同,另1株(No-03)经GenBank网上同源性比较,未发现完全相同的核苷酸和氨基酸序列,为一种新发现的SHV亚型β内酰胺酶耐药基因,其序列以SHV-71的名称在美国核酸数据库GenBank成功登录(GenBank注册号:DQ296194)。结论临床分离的鲍曼不动杆菌No-03株所产SHV型BLA为一种新SHV亚型β内酰胺酶。 展开更多

关键词 Β内酰胺酶 鲍曼不动杆菌 聚合酶链反应 序列分析

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临床分离革兰阴性菌整合子研究 被引量：4

13

作者 姚芬 黄源春 +1 位作者 陈淑贞 钱元恕 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期313-315,共3页

目的了解临床分离革兰阴性菌整合子的产生情况及整合子在细菌耐药中的作用。方法E实验测定细菌对11种抗生素及抗生素复合制剂的最低抑菌浓度,PCR扩增三种整合酶基因及I型整合子的可变区,并对可变区的扩增产物进行克隆、测序。结果16株... 目的了解临床分离革兰阴性菌整合子的产生情况及整合子在细菌耐药中的作用。方法E实验测定细菌对11种抗生素及抗生素复合制剂的最低抑菌浓度,PCR扩增三种整合酶基因及I型整合子的可变区,并对可变区的扩增产物进行克隆、测序。结果16株革兰阴性菌中,6株含I型整合子,所含基因盒主要是dfr/dhf及aadA基因盒。结论整合子在不同革兰阴性菌中广泛存在,与细菌的多重耐药尤其是对氨基糖苷类抗生素的耐药密切相关。 展开更多

关键词 整合子 革兰阴性菌 耐药

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细菌的消毒防腐剂耐药基因研究进展 被引量：7

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作者 华德兴 钱元恕 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期513-518,577,共7页

消毒防腐剂的耐药性已经越来越受到人们的重视,消毒防腐剂与抗生素之间存在的交叉耐药性值得关注。现发现细菌对季胺类和双胍类等消毒防腐剂的耐药性与基因有关。本文对季胺类和重金属等消毒防腐剂耐药基因作一综述。

关键词 细菌 消毒防腐剂 耐药性 基因

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反义寡核苷酸抑制早期生长反应基因-1表达对内皮细胞缺氧复氧损伤的影响 被引量：2

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作者 周燕琼 张艳美 +4 位作者 高分飞 黄展勤 陈一村 郑燕珊 石刚刚 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2015年第1期14-18,共5页

目的：研究反义寡核苷酸（antisense oligodeoxynucleotides,AS-ODN）抑制早期生长反应基因1（early growth response gene-1,Egr-1）表达对内皮细胞缺氧复氧（anoxia/reoxygenation,A/R）损伤的影响。方法：采用新生大鼠进行心脏微血... 目的：研究反义寡核苷酸（antisense oligodeoxynucleotides,AS-ODN）抑制早期生长反应基因1（early growth response gene-1,Egr-1）表达对内皮细胞缺氧复氧（anoxia/reoxygenation,A/R）损伤的影响。方法：采用新生大鼠进行心脏微血管内皮细胞（cardiac microvascular endothelial cells,CMECs）原代培养,取3~4代的CMECs建立缺氧复氧模型。细胞随机分为6组：对照（Con）组、缺氧复氧组（A/R）、溶剂组（LIP）、反义寡核苷酸转染组（AS）、正义寡核苷酸转染组（S）和错配寡核苷酸转染组（Sc）。通过测定细胞培养上清液中乳酸脱氢酶（LDH）及内皮细胞中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）含量,观察内皮细胞损伤程度;应用ELISA法测定细胞培养上清液肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的含量,观察内皮细胞炎症反应水平;Western-blot法检测培养内皮细胞中Egr-1的蛋白表达水平;显微镜下观察细胞形态学改变并计算存活率。结果：A/R造成内皮细胞内MDA升高,SOD下降,上清液中LDH、TNF-α含量升高,A/R刺激下细胞Egr-1的蛋白表达水平明显升高;A/R刺激前给予AS-ODN可抑制Egr-1蛋白的表达,减轻内皮细胞的损伤及炎症反应程度,提高细胞存活率。结论：AS-ODN抑制培养内皮细胞Egr-1的表达,并降低A/R损伤,提示Egr-1与缺氧复氧所致的心脏微血管内皮细胞损伤密切相关。 展开更多

关键词 反义寡核苷酸 心脏微血管内皮细胞 缺 氧复氧损伤 EGR-1

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1998—2005年临床分离肺炎克雷伯菌耐药性分析 被引量：5

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作者 陈淑贞 钱元恕 蔡应木 《中国感染与化疗杂志》 CAS 2006年第6期407-409,共3页

目的了解临床分离的肺炎克雷伯菌对常用抗菌药物的耐药性及其变迁,为合理用药提供依据。方法对本院1998-2005年临床分离肺炎克雷伯菌的耐药谱进行监测以分析其耐药性变迁;用确证试验检测产 ESBLs 株。结果 1998-2005年8年间,除亚胺培南... 目的了解临床分离的肺炎克雷伯菌对常用抗菌药物的耐药性及其变迁,为合理用药提供依据。方法对本院1998-2005年临床分离肺炎克雷伯菌的耐药谱进行监测以分析其耐药性变迁;用确证试验检测产 ESBLs 株。结果 1998-2005年8年间,除亚胺培南外,本院临床分离的肺炎克雷伯菌对其他抗菌药物的耐药率呈逐年上升趋势。该菌最为敏感的抗菌药物是亚胺培南(100%),其次是头孢哌酮-舒巴坦、头孢吡肟、哌拉西林-三唑巴坦、阿莫西林-克拉维酸、环丙沙星和头孢他啶。产 ESBLs 菌株对抗菌药物的耐药率明显高于非产 ESBLs 菌株。结论本院临床分离的肺炎克雷伯菌除对亚胺培南均敏感外,对昕测试的其他11种抗菌药物的耐药率呈逐年上升趋势。 展开更多

关键词 肺炎克雷伯菌 耐药性 超广谱Β内酰胺酶

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Ca^(2+)/PKC通路在大鼠缺氧复氧心肌细胞Egr-1高表达中的作用 被引量：3

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作者 郑付春 贾强用 石刚刚 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2011年第3期241-248,共8页

目的:观察Ca2+/PKC通路在大鼠心肌细胞缺氧复氧状态下参与Egr-1高表达。方法:取生长5~6 d的大鼠心肌细胞分为对照(Control)组、缺氧复氧(H/R)组、溶剂(DMSO)组、EGTA组、维拉帕米(VER)组、H7组和BIM组。各组心肌细胞制作H/R模型。RT-PC... 目的:观察Ca2+/PKC通路在大鼠心肌细胞缺氧复氧状态下参与Egr-1高表达。方法:取生长5~6 d的大鼠心肌细胞分为对照(Control)组、缺氧复氧(H/R)组、溶剂(DMSO)组、EGTA组、维拉帕米(VER)组、H7组和BIM组。各组心肌细胞制作H/R模型。RT-PCR法检测培养心肌细胞中Egr-1 mRNA的表达水平。Western-blot法检测培养心肌细胞中Egr-1蛋白的表达水平。结果:与Control组相比,H/R组及DMSO组心肌细胞Egr-1 mRNA的表达水平明显增高(P<0.05);与H/R组相比,VER组、EGTA组、H7组、BIM组Egr-1 mRNA的表达明显下调,差异具有统计学意义(P<0.05)。与Control组相比,H/R组及DMSO组心肌细胞Egr-1蛋白表达水平明显增高(P<0.05);与H/R组相比,VER组、EGTA组、H7组、BIM组Egr-1蛋白的表达明显下调,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:在大鼠心肌细胞缺氧复氧状态下,Ca2+/PKC信号通路参与介导了Egr-1的高表达。 展开更多

关键词 CA^2+ 蛋白激酶C EGR-1 心肌细胞 缺氧复氧

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量效曲线实验微机化及其作图的优化 被引量：1

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作者 庄学煊 石刚刚 +2 位作者 晏义平 尹俊 张映娜 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 1999年第2期168-170,共3页

关键词 量效曲线实验 作图 实验微机化 实验药理学

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β-内酰胺类抗生素对L1型金属β-内酰胺酶的稳定性及酶动力学研究 被引量：1

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作者 彭青 李文芳 钱元恕 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期411-413,432,共4页

目的通过比较9种β-内酰胺类抗生素对L1型金属β-内酰胺酶(金属酶)的稳定性及酶动力学参数,了解金属酶L1的酶学特性。方法制备金属酶L1的纯化产物,以紫外分光光度计测定9种β-内酰胺类抗生素对L1型金属酶的稳定性及酶动力学参数。结果重... 目的通过比较9种β-内酰胺类抗生素对L1型金属β-内酰胺酶(金属酶)的稳定性及酶动力学参数,了解金属酶L1的酶学特性。方法制备金属酶L1的纯化产物,以紫外分光光度计测定9种β-内酰胺类抗生素对L1型金属酶的稳定性及酶动力学参数。结果重组L1酶水解青霉素及碳青霉烯类抗生素的能力接近,氨曲南及头孢他啶对L1酶高度稳定。结论L1酶的稳定性及动力学研究为指导临床合理应用抗生素提供了科学的理论依据。 展开更多

关键词 Β-内酰胺类抗生素 L1型金属酶 稳定性 酶动力学

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VIM-2型金属β内酰胺酶的序列分析、原核表达及纯化 被引量：1

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作者 林孟娴 王佩芬 +1 位作者 蔡应木 钱元恕 《中国感染与化疗杂志》 CAS 2006年第3期168-171,共4页

目的对铜绿假单胞菌所产blaVIM-2进行基因重组表达及纯化。方法以产blaVIM-2铜绿假单胞菌总基因组DNA为模板,PCR扩增blaVIM-2,将其克隆入pUCm-T载体后测定该核苷酸序列,再将blaVIM-2克隆入表达载体pET-41b(+),然后在大肠埃希菌BL21(DE3... 目的对铜绿假单胞菌所产blaVIM-2进行基因重组表达及纯化。方法以产blaVIM-2铜绿假单胞菌总基因组DNA为模板,PCR扩增blaVIM-2,将其克隆入pUCm-T载体后测定该核苷酸序列,再将blaVIM-2克隆入表达载体pET-41b(+),然后在大肠埃希菌BL21(DE3)中表达,表达产物再过Ni-NTA柱纯化。结果PCR扩增出大小为801bp的基因片段,与GenBank上同类酶的基因序列同源性为100%。此基因能在大肠埃希菌中大量表达,蛋白分子质量大约为56000u。结论对VIM-2金属酶的成功表达及纯化为进一步做酶动力学及酶的其他分子生物学特性研究奠定了基础。 展开更多

关键词 VIM-2型金属β内酰胺酶 克隆 原核表达及纯化 铜绿假单胞菌

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