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逆转录病毒载体介导大鼠乳腺癌细胞共表达MIP-1α和B7-1
被引量：
2
1
作者
王振发
王烈
+5 位作者
王瑜
陈少全
林晨
卫立辛
覃林花
张长松
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
2007年第2期132-136,共5页
目的:建立共表达小鼠MIP-1α和B7-1基因的大鼠乳腺癌细胞株,并进行体外活性检测。方法:应用含不同选择标记的重组逆转录病毒载体,经1mg/mlG418和2μg/ml puromycin双药物筛选后获得MIP-1α+B7-1基因共表达的大鼠乳腺癌细胞株。RT-PCR、...
目的:建立共表达小鼠MIP-1α和B7-1基因的大鼠乳腺癌细胞株,并进行体外活性检测。方法:应用含不同选择标记的重组逆转录病毒载体,经1mg/mlG418和2μg/ml puromycin双药物筛选后获得MIP-1α+B7-1基因共表达的大鼠乳腺癌细胞株。RT-PCR、免疫组化检测mMIP-1α的表达,RT-PCR、流式细胞术检测mB7-1的表达;将共表达MIP-1α和B7-1的肿瘤细胞与大鼠脾淋巴细胞混合培养后,MTT法检测淋巴细胞的增殖指数、琼脂糖打孔法检测共表达MIP-1α和B7-1肿瘤细胞对单个核细胞的趋化活性。结果:经脂质体转染包装细胞产生的重组逆转录病毒上清病毒滴度达4.6×107CFU/L。细胞生长曲线显示,重组逆转录病毒感染对乳腺癌细胞增殖无明显影响。重组逆转录病毒感染的大鼠乳腺癌细胞株SHZ-88/mMIP-1α+mB7-1有B7-1和MIP-1α mRNA及蛋白的表达。淋巴细胞增殖指数PI值SHZ-88/PLXSN组为(0.76±0.25),SHZ-88/mMIP-1α+mB7-1组为(1.95±0.31),后者体外刺激淋巴细胞增殖能力增强(P<0.01),SHZ-88/pBabe puro组的趋化指数为(0.99±0.19),mMIP-1α+mB7-1组的为(3.88±0.33),后者显著增强了趋化活性。结论:通过逆转录病毒载体介导建立MIP-1α和B7-1基因共表达的大鼠乳腺癌细胞株具有招引单个核细胞,并将其激活的体外生物学活性。
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关键词
MIP-1Α
B7—1
逆转录病毒载体
大鼠乳腺癌
SHZ-88细胞
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职称材料
题名
逆转录病毒载体介导大鼠乳腺癌细胞共表达MIP-1α和B7-1
被引量：
2
1
作者
王振发
王烈
王瑜
陈少全
林晨
卫立辛
覃林花
张长松
机构
南京军区福州总医院普通外科研究所
第二军医
大学
东方肝胆外科医院
肿瘤
免疫与基因治疗中心
汕头大学医学院肿瘤分子流行病系
出处
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
2007年第2期132-136,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.30471994)
南京军区医学科研"十五"计划项目(No.02MA008)
文摘
目的:建立共表达小鼠MIP-1α和B7-1基因的大鼠乳腺癌细胞株,并进行体外活性检测。方法:应用含不同选择标记的重组逆转录病毒载体,经1mg/mlG418和2μg/ml puromycin双药物筛选后获得MIP-1α+B7-1基因共表达的大鼠乳腺癌细胞株。RT-PCR、免疫组化检测mMIP-1α的表达,RT-PCR、流式细胞术检测mB7-1的表达;将共表达MIP-1α和B7-1的肿瘤细胞与大鼠脾淋巴细胞混合培养后,MTT法检测淋巴细胞的增殖指数、琼脂糖打孔法检测共表达MIP-1α和B7-1肿瘤细胞对单个核细胞的趋化活性。结果:经脂质体转染包装细胞产生的重组逆转录病毒上清病毒滴度达4.6×107CFU/L。细胞生长曲线显示,重组逆转录病毒感染对乳腺癌细胞增殖无明显影响。重组逆转录病毒感染的大鼠乳腺癌细胞株SHZ-88/mMIP-1α+mB7-1有B7-1和MIP-1α mRNA及蛋白的表达。淋巴细胞增殖指数PI值SHZ-88/PLXSN组为(0.76±0.25),SHZ-88/mMIP-1α+mB7-1组为(1.95±0.31),后者体外刺激淋巴细胞增殖能力增强(P<0.01),SHZ-88/pBabe puro组的趋化指数为(0.99±0.19),mMIP-1α+mB7-1组的为(3.88±0.33),后者显著增强了趋化活性。结论:通过逆转录病毒载体介导建立MIP-1α和B7-1基因共表达的大鼠乳腺癌细胞株具有招引单个核细胞,并将其激活的体外生物学活性。
关键词
MIP-1Α
B7—1
逆转录病毒载体
大鼠乳腺癌
SHZ-88细胞
Keywords
MIP-1α
B7-1
retroviral vector
rat breast cancer
SHZ-88 cell
分类号
R392.7 [医药卫生—免疫学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
逆转录病毒载体介导大鼠乳腺癌细胞共表达MIP-1α和B7-1
王振发
王烈
王瑜
陈少全
林晨
卫立辛
覃林花
张长松
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
2007
2
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