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细粒棘球蚴95(Eg95)抗原基因的克隆及真核表达质粒的构建 被引量:10
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作者 丁剑冰 林仁勇 +4 位作者 温浩 王国荃 王笑峰 魏晓丽 傅玉才 《中国人兽共患病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期42-44,共3页
目的 克隆Eg95抗原基因 ,构建携带目的基因的真核表达载体 ,为细粒棘球蚴DNA疫苗的研究提供材料。方法 应用PCR方法从细粒棘球蚴cDNA文库中克隆获得Eg95抗原基因 ,将其克隆至 pUCm -T载体 ,测序确定其正确性。利用定向克隆技术将Eg95... 目的 克隆Eg95抗原基因 ,构建携带目的基因的真核表达载体 ,为细粒棘球蚴DNA疫苗的研究提供材料。方法 应用PCR方法从细粒棘球蚴cDNA文库中克隆获得Eg95抗原基因 ,将其克隆至 pUCm -T载体 ,测序确定其正确性。利用定向克隆技术将Eg95抗原基因片段克隆至真核表达质粒pcDNA3上 ,根据选择标记的氨苄抗性基因筛选到阳性克隆 ,通过酶切分析和PCR鉴定筛选出阳性克隆 ,测序确定序列。结果 测序表明所选 pcDNA3-Eg95阳性克隆均为正确连接Eg95抗原基因的重组质粒 ,可以作为DNA疫苗作进一步的研究。结论 成功构建真核细胞表达载体 pcDNA3-Eg95。 展开更多
关键词 克隆 细粒棘球螺 Eg95抗原基因 真核表达质粒
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四川彝族和新疆维吾尔族HLA-B基因座基因多态性分析 被引量:7
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作者 许铭炎 洪坤学 +9 位作者 马军 邓小玲 李军 彭虹 阮玉华 秦光明 张远志 邢辉 徐小虎 邵一鸣 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期913-917,共5页
应用PCR-SSP方法对无亲缘关系的106位四川彝族样品和110位新疆维吾尔族样品进行HLA-B基因分型。在彝族样品中共检出21个等位基因,其中高频率的等位基因为B*40(0.1981)、B*15(0.1368)、B*51(0.1274),低频率的等位基因为B*47(0.0189)、B*4... 应用PCR-SSP方法对无亲缘关系的106位四川彝族样品和110位新疆维吾尔族样品进行HLA-B基因分型。在彝族样品中共检出21个等位基因,其中高频率的等位基因为B*40(0.1981)、B*15(0.1368)、B*51(0.1274),低频率的等位基因为B*47(0.0189)、B*44(0.0142)、B*18(0.0094)、B*57(0.0047)和B*78(0.0047),总体基因频率分布介于南北汉族之间。在维吾尔族样品中共检出27个等位基因,其中高频率的等位基因为B*35(0.1136)和B*51(0.1136),低频率的等位基因为B*41(0.0045)、B*56(0.0045)和B*78(0.0091),B*08、B*35、B*50等“高加索人”起源的HLA基因在新疆维吾尔族的分布频率高于国内其他民族,与高加索人种的数值相当。经χ2检验,两个民族群体的基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡。经遗传分析,四川彝族群体HLA-B基因座杂合度(H)、个体识别率(DP)和非父排除率(EP)分别为0.8977、0.9661和0.8009;维吾尔族群体的H、DP和EP分别为0.9372、0.9857和0.8732。获得了四川彝族和新疆维吾尔族HLA-B基因座等位基因频率数据,为临床器官移植配型、人类学、法医学及疾病关联性研究提供了重要的群体遗传学资料。 展开更多
关键词 四川彝族 新疆维吾尔族 HLA-B 基因多态性 PCR-SSP
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不同月龄大鼠胰岛细胞衰老及胰岛素表达的研究 被引量:3
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作者 林晖榕 陈慎仁 +3 位作者 傅玉才 耿义群 许铭炎 林超 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期180-182,共3页
目的:探讨不同月龄大鼠胰岛细胞衰老的情况及胰岛素的表达。方法:40只大鼠分为4组:新生大鼠组、1个月大鼠组、6个月大鼠组、24个月大鼠组,取大鼠胰腺,行β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色并检测胰岛内p16的表达以反映胰岛细胞衰老,检测胰岛... 目的:探讨不同月龄大鼠胰岛细胞衰老的情况及胰岛素的表达。方法:40只大鼠分为4组:新生大鼠组、1个月大鼠组、6个月大鼠组、24个月大鼠组,取大鼠胰腺,行β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色并检测胰岛内p16的表达以反映胰岛细胞衰老,检测胰岛内胰岛素的表达。结果:随年龄增长,胰岛内p16表达增加,分别为:新生组0;1月组0.00267±0.01534;6月组0.05290±0.01787;24月组0.24526±0.03191(P<0.01)。β-Gal染色阳性(阳性率、着色面积、着色深浅程度)增加也与增龄相关,新生组大鼠胰岛β-Gal染色均为阴性,其它各组阳性率1月组为2%,6月组为15%,24月组为100%(P<0.01)。着色面积1月组为0.040,6月组为0.218,24月组为2.118。着色程度1月组为0.04,6月组为0.18,24月组为2.41。结论:随年龄增长,胰岛细胞衰老增加,胰岛素表达减少。 展开更多
关键词 胰岛 细胞衰老 半乳糖苷酶类 胰岛素
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细粒棘球绦虫66kDa抗原基因在成虫吸盘上的表达 被引量:11
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作者 傅玉才 许世锷 +4 位作者 金立群 郭衍 谢霖崇 Saint-Andre Marchal T Marchal 《中国人兽共患病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期41-43,共3页
目的 观察细粒棘球绦虫自原头蚴向成虫的生长发育过程中 6 6kDa抗原基因在虫体吸盘上和其它部位表达水平的变化。方法 用重组抗原的抗血清对原头蚴及成虫等不同发育时期的虫体进行免疫组化分析。结果 免疫组化分析显示细粒棘球绦虫 6... 目的 观察细粒棘球绦虫自原头蚴向成虫的生长发育过程中 6 6kDa抗原基因在虫体吸盘上和其它部位表达水平的变化。方法 用重组抗原的抗血清对原头蚴及成虫等不同发育时期的虫体进行免疫组化分析。结果 免疫组化分析显示细粒棘球绦虫 6 6kDa抗原位于各期虫体的皮层和皮下肌层 ,在虫体的表面也发现该抗原的荧光颗粒 ;在经培养 2 0h后的原头蚴和成虫的吸盘上该抗原的含量显著高于虫体的其它部位 ,但在棘球蚴内的原头蚴吸盘上该抗原含量与虫体其它部位一致 ,处于较低的表达水平。结论 原头蚴在向成虫的生长发育过程中当顶突和吸盘翻出时 6 6kDa抗原在吸盘上开始大量产出 ,提示该蛋白质可能与吸盘的吸附功能有关 ;因此该抗原有可能是一有希望的成虫疫苗候选分子。 展开更多
关键词 细粒棘球绦虫 66kDa抗原 免疫组化 虫体吸盘 基因表达
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