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细粒棘球蚴95(Eg95)抗原基因的克隆及真核表达质粒的构建 被引量：10
1
作者 丁剑冰 林仁勇 +4 位作者 温浩 王国荃 王笑峰 魏晓丽 傅玉才 《中国人兽共患病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期42-44,共3页
目的　克隆Eg95抗原基因 ,构建携带目的基因的真核表达载体 ,为细粒棘球蚴DNA疫苗的研究提供材料。方法　应用PCR方法从细粒棘球蚴cDNA文库中克隆获得Eg95抗原基因 ,将其克隆至 pUCm -T载体 ,测序确定其正确性。利用定向克隆技术将Eg95... 目的　克隆Eg95抗原基因 ,构建携带目的基因的真核表达载体 ,为细粒棘球蚴DNA疫苗的研究提供材料。方法　应用PCR方法从细粒棘球蚴cDNA文库中克隆获得Eg95抗原基因 ,将其克隆至 pUCm -T载体 ,测序确定其正确性。利用定向克隆技术将Eg95抗原基因片段克隆至真核表达质粒pcDNA3上 ,根据选择标记的氨苄抗性基因筛选到阳性克隆 ,通过酶切分析和PCR鉴定筛选出阳性克隆 ,测序确定序列。结果　测序表明所选 pcDNA3-Eg95阳性克隆均为正确连接Eg95抗原基因的重组质粒 ,可以作为DNA疫苗作进一步的研究。结论　成功构建真核细胞表达载体 pcDNA3-Eg95。 展开更多
关键词 克隆 细粒棘球螺 Eg95抗原基因 真核表达质粒
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四川彝族和新疆维吾尔族HLA-B基因座基因多态性分析 被引量：7
2
作者 许铭炎 洪坤学 +9 位作者 马军 邓小玲 李军 彭虹 阮玉华 秦光明 张远志 邢辉 徐小虎 邵一鸣 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期913-917,共5页
应用PCR-SSP方法对无亲缘关系的106位四川彝族样品和110位新疆维吾尔族样品进行HLA-B基因分型。在彝族样品中共检出21个等位基因,其中高频率的等位基因为B*40(0.1981)、B*15(0.1368)、B*51(0.1274),低频率的等位基因为B*47(0.0189)、B*4... 应用PCR-SSP方法对无亲缘关系的106位四川彝族样品和110位新疆维吾尔族样品进行HLA-B基因分型。在彝族样品中共检出21个等位基因,其中高频率的等位基因为B*40(0.1981)、B*15(0.1368)、B*51(0.1274),低频率的等位基因为B*47(0.0189)、B*44(0.0142)、B*18(0.0094)、B*57(0.0047)和B*78(0.0047),总体基因频率分布介于南北汉族之间。在维吾尔族样品中共检出27个等位基因,其中高频率的等位基因为B*35(0.1136)和B*51(0.1136),低频率的等位基因为B*41(0.0045)、B*56(0.0045)和B*78(0.0091),B*08、B*35、B*50等“高加索人”起源的HLA基因在新疆维吾尔族的分布频率高于国内其他民族,与高加索人种的数值相当。经χ2检验,两个民族群体的基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡。经遗传分析,四川彝族群体HLA-B基因座杂合度(H)、个体识别率(DP)和非父排除率(EP)分别为0.8977、0.9661和0.8009;维吾尔族群体的H、DP和EP分别为0.9372、0.9857和0.8732。获得了四川彝族和新疆维吾尔族HLA-B基因座等位基因频率数据,为临床器官移植配型、人类学、法医学及疾病关联性研究提供了重要的群体遗传学资料。 展开更多
关键词 四川彝族 新疆维吾尔族 HLA-B 基因多态性 PCR-SSP
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弥漫性甲状腺功能亢进症的遗传率研究 被引量：4
3
作者 刘鸿禧 林珏龙 +4 位作者 李玟 郑典梅 王丽贞 李淑贞 李莉 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 1994年第4期14-17,共4页
本文对粤东地区204例(男49例,女155例)弥漫性甲状腺功能亢进症(以下均简称甲亢)的一级亲属和在籍贯、年龄,性别以及数量方面均与甲亢(先证者)组相对应的204例正常健康人的一级亲属的患病情况进行了分析研究.结果发现,粤东地区甲亢患者... 本文对粤东地区204例(男49例,女155例)弥漫性甲状腺功能亢进症(以下均简称甲亢)的一级亲属和在籍贯、年龄,性别以及数量方面均与甲亢(先证者)组相对应的204例正常健康人的一级亲属的患病情况进行了分析研究.结果发现,粤东地区甲亢患者的一级亲属患病率为3.232%,正常健康人一级亲属患病率为0.145%,两者对比,相差22.3倍,经 x^2检验。差异极显著(P<0.001).按多基因病遗传率公式计算,粤东地区甲亢遗传率为68.6±3.8%.此结果与先前多数学者的报告相符. 展开更多
关键词 遗传率 甲亢 病理
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不同月龄大鼠胰岛细胞衰老及胰岛素表达的研究 被引量：3
4
作者 林晖榕 陈慎仁 +3 位作者 傅玉才 耿义群 许铭炎 林超 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期180-182,共3页
目的:探讨不同月龄大鼠胰岛细胞衰老的情况及胰岛素的表达。方法:40只大鼠分为4组:新生大鼠组、1个月大鼠组、6个月大鼠组、24个月大鼠组,取大鼠胰腺,行β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色并检测胰岛内p16的表达以反映胰岛细胞衰老,检测胰岛... 目的:探讨不同月龄大鼠胰岛细胞衰老的情况及胰岛素的表达。方法:40只大鼠分为4组:新生大鼠组、1个月大鼠组、6个月大鼠组、24个月大鼠组,取大鼠胰腺,行β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色并检测胰岛内p16的表达以反映胰岛细胞衰老,检测胰岛内胰岛素的表达。结果:随年龄增长,胰岛内p16表达增加,分别为:新生组0;1月组0.00267±0.01534;6月组0.05290±0.01787;24月组0.24526±0.03191(P<0.01)。β-Gal染色阳性(阳性率、着色面积、着色深浅程度)增加也与增龄相关,新生组大鼠胰岛β-Gal染色均为阴性,其它各组阳性率1月组为2%,6月组为15%,24月组为100%(P<0.01)。着色面积1月组为0.040,6月组为0.218,24月组为2.118。着色程度1月组为0.04,6月组为0.18,24月组为2.41。结论:随年龄增长,胰岛细胞衰老增加,胰岛素表达减少。 展开更多
关键词 胰岛 细胞衰老 半乳糖苷酶类 胰岛素
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放射诱导p16基因胰腺癌靶向性表达的研究 被引量：1
5
作者 马红兵 王西京 +7 位作者 胡海涛 狄政莉 夏辉 李铮 马洁 白明华 韩志楷 吴丛梅 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期68-70,共3页
目的　构建 pcDNA3.1 Egr.1p-p16重组质粒并检测其在人胰腺癌 JF305细胞中的辐射诱导表达。方法　将人p16 cDNA基因连接到有辐射诱导特性的早期反应因子 Egr.1p的下游,构建成 pcDNA3.1 -Egr.1p- p16 重组质粒,利用脂质体介导转染人胰腺... 目的　构建 pcDNA3.1 Egr.1p-p16重组质粒并检测其在人胰腺癌 JF305细胞中的辐射诱导表达。方法　将人p16 cDNA基因连接到有辐射诱导特性的早期反应因子 Egr.1p的下游,构建成 pcDNA3.1 -Egr.1p- p16 重组质粒,利用脂质体介导转染人胰腺癌细胞系 JF305 细胞;采用 RT- PCR方法和 Western blot方法检测不同剂量 X射线照射后,被转染细胞中 p16 的转录和表达水平。结果　酶切鉴定证实 pcDNA3. 1 Egr. 1p -p16 重组质粒构建正确。被pcDNA3.1 Egr.1p -p16重组质粒转染的人胰腺癌 JF305细胞经不同剂量 X射线照射后,p16 基因表达均高于未照射组。结论　X射线可诱导 pcDNA3.1 -Egr.1p -p16重组质粒在人胰腺癌 JF305细胞中表达增强。 展开更多
关键词 EGR-1启动子 X射线 P16表达 胰腺癌细胞系
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DHRS4L2非编码RNA调控CPNE6基因表达（英文） 被引量：2
6
作者 李一凡 黄东阳 +6 位作者 王磊 杜冀晖 刘戈飞 王永 周蓓 李蓉 麦丽文 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1098-1105,共8页
DHRS4/NRDR基因编码一种属于SDR家族的酶,在维甲酸合成、类固醇代谢和苯甲基代谢中发挥生物合成催化作用.DHRS4基因定位于14q11.2,有两个相似的拷贝基因,分别为DHRS4L2和DHRS4L1.我们前期发现了DHRS4L2基因一个上游转录起始位点,命名为D... DHRS4/NRDR基因编码一种属于SDR家族的酶,在维甲酸合成、类固醇代谢和苯甲基代谢中发挥生物合成催化作用.DHRS4基因定位于14q11.2,有两个相似的拷贝基因,分别为DHRS4L2和DHRS4L1.我们前期发现了DHRS4L2基因一个上游转录起始位点,命名为DHRS4L2-Ea.在本研究中,我们用RT-PCR和双脱氧测序法发现一个新的从DHRS4L2-Ea转录的选择性剪接亚型DHRS4L2-900a(KC237374).同时RT-PCR结果显示在SK-N-SH细胞DHRS4L2-Ea选择性剪接亚型中DHRS4L2-iso(AY616183)表达最多,为主要亚型.在SK-N-SH细胞过表达DHRS4L2-800a(AY920361)使DHRS4L2-Ea基因下游CPNE6 mRNA表达下调.在HeLa细胞过表达DHRS4L2-800a(AY920361)或DHRS4L2-900a(KC237374)进一步表明DHRS4L2-Ea抑制CPNE6表达的作用.定量PCR结果显示si-RNA抑制DHRS4L2-Ea表达使CPNE6 mRNA表达上调.亚硫酸盐测序结果显示在SK-N-SH转染DHRS4L2-800a(AY920361)的样本中CPNE6基因DNA CpG甲基化增加.综上所述,本研究揭示DHRS4L2表达的非编码RNA抑制其下游基因CPNE6的表达. 展开更多
关键词 DHRS4L2 CPNE6 选择性剪接 转录调控 人神经母细胞瘤
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细粒棘球绦虫66kDa抗原基因在成虫吸盘上的表达 被引量：11
7
作者 傅玉才 许世锷 +4 位作者 金立群 郭衍 谢霖崇 Saint-Andre Marchal T Marchal 《中国人兽共患病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期41-43,共3页
目的　观察细粒棘球绦虫自原头蚴向成虫的生长发育过程中 6 6kDa抗原基因在虫体吸盘上和其它部位表达水平的变化。方法　用重组抗原的抗血清对原头蚴及成虫等不同发育时期的虫体进行免疫组化分析。结果　免疫组化分析显示细粒棘球绦虫 6... 目的　观察细粒棘球绦虫自原头蚴向成虫的生长发育过程中 6 6kDa抗原基因在虫体吸盘上和其它部位表达水平的变化。方法　用重组抗原的抗血清对原头蚴及成虫等不同发育时期的虫体进行免疫组化分析。结果　免疫组化分析显示细粒棘球绦虫 6 6kDa抗原位于各期虫体的皮层和皮下肌层 ,在虫体的表面也发现该抗原的荧光颗粒 ;在经培养 2 0h后的原头蚴和成虫的吸盘上该抗原的含量显著高于虫体的其它部位 ,但在棘球蚴内的原头蚴吸盘上该抗原含量与虫体其它部位一致 ,处于较低的表达水平。结论　原头蚴在向成虫的生长发育过程中当顶突和吸盘翻出时 6 6kDa抗原在吸盘上开始大量产出 ,提示该蛋白质可能与吸盘的吸附功能有关 ;因此该抗原有可能是一有希望的成虫疫苗候选分子。 展开更多
关键词 细粒棘球绦虫 66kDa抗原 免疫组化 虫体吸盘 基因表达
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食管癌病人运铁蛋白(Tf)和组特异性成份(Gc)亚型分布的研究
8
作者 刘鸿禧 张奎芳 +4 位作者 林珏龙 张少英 陆振虞 冯波 陈仁彪 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 1995年第3期9-12,共4页
应用超薄层聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳法，分析了潮汕地区216例无血缘关系、临床上诊断为食管癌的病人和216例健康人的运铁蛋白（Tf）亚型分布情况，结果发现：食管癌病人组TfC1C1纯合子频率为0．2639，Tf*C1基因频率为0．4745显著低... 应用超薄层聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳法，分析了潮汕地区216例无血缘关系、临床上诊断为食管癌的病人和216例健康人的运铁蛋白（Tf）亚型分布情况，结果发现：食管癌病人组TfC1C1纯合子频率为0．2639，Tf*C1基因频率为0．4745显著低于正常人组（分别为0．4352和0．6227，均为P＜0.001）；同时，食管癌病人组TfC2C2纯合子频率为0．2278,Tf*C2基因频率为0．4977，显著高于正常对照组（分别为0．1852，P＜0.05和0．3634，P＜0．001）．应用超薄层聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦结合免疫固定祛，分析了潮汕地区217例无血缘关系的临床上诊断为食管癌病人和217例健康人的组特异性成份（Gc）亚型的分布，发现两组间无显著性差异． 展开更多
关键词 运铁蛋白 组特异性成份 遗传多态性 食管肿瘤
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pEgr-TNFα基因协同射线抑制Hela细胞生长的实验研究
9
作者 曾菲 吴丛梅 +2 位作者 黄天华 洪菊香 周莉 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第B03期46-48,共3页
【目的】研究pEgr-TNFα重组质粒在转染的Hela细胞中的辐射诱导表达特性,验证其联合放射治疗杀伤Hela细胞的作用。【方法】将脂质体包裹的pEgr-TNFα重组质粒,转染宫颈癌细胞系Hela中;采用ELISA方法检测不同剂量X射线诱导后TNFα的表达... 【目的】研究pEgr-TNFα重组质粒在转染的Hela细胞中的辐射诱导表达特性,验证其联合放射治疗杀伤Hela细胞的作用。【方法】将脂质体包裹的pEgr-TNFα重组质粒,转染宫颈癌细胞系Hela中;采用ELISA方法检测不同剂量X射线诱导后TNFα的表达和同一剂量X射线诱导下TNFα的表达时程;用MTT法检测pEgr-TNFα基因协同射线抑制Hela细胞生长的作用。【结果】pEgr-TNFα重组质粒转染Hela细胞,不同剂量X射线均可诱导TNFα表达增强,为假照组的1.02～3.79倍(P<0.01);2 Gy X射线照射后,TNFα表达逐渐增强,在照射后12h达到最高值;被转染的细胞经2 Gy X射线照射,8d后细胞数明显低于其他实验组(P<0.05～0.001)。【结论】pEgr-TNFα基因-放射联合治疗有明显的抑制Hela细胞生长的作用,其作用优于单纯给予射线或基因转染。 展开更多
关键词 早期反应生长基因 射线 抑制 HELA细胞 宫颈癌细胞系
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